摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 研究背景及文献综述 | 第12-21页 |
1. 转录因子TFEB | 第12-20页 |
1.1 MITF家族 | 第12页 |
1.2 TFEB | 第12-20页 |
2. 穿梭蛋白 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-45页 |
第一节 实验材料 | 第21-27页 |
1. 质粒 | 第21页 |
2. 细胞株 | 第21页 |
3. 实验所需的主要试剂 | 第21-24页 |
4. 实验所用仪器 | 第24-25页 |
5. 实验所需耗材 | 第25页 |
6. 相关引物 | 第25-27页 |
7. 实验所用主要抗体 | 第27页 |
第二节 常用实验试剂的配制 | 第27-34页 |
1. 相关试剂 | 第27-28页 |
2. 细胞培养相关试剂 | 第28-29页 |
3. 细胞转染相关试剂 | 第29-30页 |
4. Western Blotting相关试剂 | 第30-32页 |
5. 免疫荧光相关试剂 | 第32页 |
6. 免疫共沉淀(Co-IP)主要试剂 | 第32-33页 |
7. 核质分离相关试剂 | 第33-34页 |
8. 其余主要试剂 | 第34页 |
第三节 实验方法 | 第34-45页 |
1. 克隆构建 | 第34-37页 |
2. 细胞的培养 | 第37-38页 |
3. 细胞的转染 | 第38-39页 |
4. 免疫共沉淀 | 第39页 |
5. 免疫荧光 | 第39-40页 |
6. 免疫印迹(Western Blotting) | 第40-41页 |
7. 实时定量PCR(QCPR) | 第41-43页 |
8. 核质分离 | 第43-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-54页 |
第一节 LMB促进TFEB入核 | 第45-47页 |
第二节 TFEB的N端决定其细胞亚定位 | 第47-48页 |
第三节 LMB不影响mTORC1的活性 | 第48-50页 |
第四节 LMB不通过Rag GTPase的定位来影响TFEB的定位 | 第50-51页 |
第五节 TFEB的定位依赖于NES | 第51-54页 |
第四章 总结与讨论 | 第54-56页 |
附录Ⅰ 缩略词 | 第56-57页 |
附录Ⅱ 科研成果 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |