| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTACT | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| 1.1 植物病害的生物防治 | 第10-11页 |
| 1.2 生防芽孢杆菌研究以及应用概况 | 第11-14页 |
| 1.2.1 国外生防芽孢杆菌研究以及应用概况 | 第11-12页 |
| 1.2.2 国内生防枯草芽孢杆菌研究以及应用概况 | 第12-14页 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌芽孢特性以及形成机理 | 第14-21页 |
| 1.3.1 芽孢结构与特性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 芽孢形成机理 | 第15-17页 |
| 1.3.3 影响芽孢形成的因素和芽孢形成条件的优化 | 第17页 |
| 1.3.4 芽孢形成的关键基因 | 第17-21页 |
| 1.4 本论文研究的目的意义及主要内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 本论文研究的目的和意义 | 第21页 |
| 1.4.2 本论文研究的主要内容 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-28页 |
| 2.1.1 菌种及质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 工具酶及相关试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.4 培养基 | 第26页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-39页 |
| 2.2.1 枯草芽孢杆菌B579的培养 | 第28页 |
| 2.2.2 枯草芽孢杆菌B579的摇瓶发酵 | 第28页 |
| 2.2.3 枯草芽孢杆菌B579基因组的提取方法 | 第28-29页 |
| 2.2.4 碱裂解抽提法提取质粒方法 | 第29页 |
| 2.2.5 枯草芽孢杆菌B579电转感受态细胞的制作及电转化方法 | 第29-30页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法 | 第30-31页 |
| 2.2.7 调控蛋白AbrB基因的克隆 | 第31-33页 |
| 2.2.8 枯草芽孢杆菌表达载体pHY-P43-AbrB的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.9 枯草芽孢杆菌B579/pHY-P43-AbrB质粒遗传稳定性测定 | 第34页 |
| 2.2.10 枯草芽孢杆菌重组质粒pDG148-AbrB的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.11 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| 2.2.12 调控蛋白AbrB蛋白功能鉴定 | 第36页 |
| 2.2.13 调控蛋白AbrB在B579/pDG148-AbrB中的诱导表达 | 第36页 |
| 2.2.14 乳糖最佳添加量的确定 | 第36页 |
| 2.2.15 发酵过程中芽孢浓度变化 | 第36页 |
| 2.2.16 菌体浓度的测定 | 第36页 |
| 2.2.17 活菌总数的测定 | 第36-37页 |
| 2.2.18 芽孢浓度的测定 | 第37页 |
| 2.2.19 芽孢形成率 | 第37页 |
| 2.2.20 乳糖的测定方法(DNS法) | 第37-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-56页 |
| 3.1 枯草芽孢杆菌B579 AbrB基因的克隆 | 第39-41页 |
| 3.1.1 枯草芽孢杆菌B579基因组DNA的提取 | 第39页 |
| 3.1.2 调控蛋白AbrB基因序列分析 | 第39-41页 |
| 3.2 枯草芽孢杆菌B579电转化条件的优化 | 第41-45页 |
| 3.2.1 甘氨酸最适添加量的确定 | 第41-42页 |
| 3.2.2 感受态细胞最适生长状态的确定 | 第42-43页 |
| 3.2.3 最适电击电压的确定 | 第43页 |
| 3.2.4 感受态细胞浓度的确定 | 第43-44页 |
| 3.2.5 质粒DNA浓度对转化效率的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 调控蛋白AbrB蛋白功能的初步鉴定 | 第45-50页 |
| 3.3.1 重组质粒pHY-P43-AbrB的构建 | 第45-47页 |
| 3.3.2 枯草芽孢杆菌B579/pHY-P43-AbrB质粒稳定性测定 | 第47-48页 |
| 3.3.3 全细胞SDS-PAGE检测AbrB在B579/pHY-P43-AbrB中的表达 | 第48-49页 |
| 3.3.4 调控蛋白AbrB蛋白功能鉴定 | 第49-50页 |
| 3.4 乳糖诱导调控芽孢生成 | 第50-56页 |
| 3.4.1 重组表达质粒pDG148-AbrB构建流程 | 第50-52页 |
| 3.4.2 全细胞SDS-PAGE检测AbrB在B579/pDG148-AbrB中的表达 | 第52-53页 |
| 3.4.3 利用乳糖在发酵过程中调控芽孢生成 | 第53-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-65页 |
| 7 攻读硕士期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
