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川渝部分地区仔猪腹泻病中大肠埃希氏菌的流行病学调查及其毒素基因检测

摘要第9-11页
Abstract第11-12页
符号说明第13-14页
第一章 绪论第14-23页
    1 研究目的和意义第14页
    2 仔猪大肠埃希氏菌病的概述第14-15页
    3 国内外研究现状第15-21页
        3.1 猪源大肠埃希氏菌血清学的相关研究第15-17页
        3.2 猪源大肠埃希氏菌耐药性的相关研究第17-18页
        3.3 猪源大肠埃希氏菌超广谱B-内酰胺酶携带情况的相关研究第18-20页
        3.4 猪源大肠埃希氏菌毒素基因的相关研究第20-21页
    4 研究内容第21-22页
        4.1 仔猪腹泻病料采集第21页
        4.2 大肠埃希氏菌分离及鉴定第21页
        4.3 大肠埃希氏菌血清型鉴定第21页
        4.4 大肠埃希氏菌超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)检测第21页
        4.5 大肠埃希氏菌耐药性检测第21-22页
        4.6 大肠埃希氏菌毒素基因检测第22页
    5 研究目标第22页
    6 成果对实际生产管理的应用价值第22-23页
第二章 仔猪腹泻病中大肠埃希氏菌的分离与鉴定第23-31页
    1 材料与方法第23-26页
        1.1 试验材料第23-24页
            1.1.1 病料第23-24页
            1.1.2 主要试剂及培养基第24页
            1.1.3 主要实验仪器第24页
        1.2 试验方法第24-26页
            1.2.1 病料采集第24-25页
            1.2.2 细菌分离纯化第25页
            1.2.3 革兰氏染色镜检第25页
            1.2.4 生化鉴定第25页
            1.2.5 血清型鉴定第25-26页
    2 结果与分析第26-29页
        2.1 病原菌的分离第26页
        2.2 生化鉴定结果第26页
        2.3 血清型鉴定第26-29页
    3 讨论第29-31页
        3.1 仔猪腹泻病中大肠埃希氏菌的分离鉴定第29页
        3.2 大肠埃希氏菌流行血清型对比分析第29-30页
        3.3 仔猪发生腹泻的原因及处理原则第30-31页
第三章 大肠埃希氏菌的耐药性检测第31-39页
    1 材料与方法第31-34页
        1.1 材料第31-32页
            1.1.1 实验菌株第31页
            1.1.2 标准菌株第31页
            1.1.3 药敏纸片第31-32页
            1.1.4 培养基第32页
            1.1.5 主要实验设备第32页
        1.2 试验方法第32-34页
            1.2.1 药敏试验第32-33页
            1.2.2 试验结果的解释和报告第33页
            1.2.3 药敏试验结果判断标准第33-34页
            1.2.4 自制药敏片制备第34页
    2 结果与分析第34-36页
        2.1 药敏结果第34-35页
        2.2 耐药谱分析第35-36页
    3 讨论第36-39页
        3.1 273株仔猪源大肠埃希氏菌的耐药性分析第36页
        3.2 2003-2012年川渝地区大肠埃希氏菌耐药性趋势分析第36-37页
        3.3 药敏试验方法的选择第37-38页
        3.4 “绿色治疗”方向的提出第38-39页
第四章 大肠埃希氏菌的超广谱B-内酰胺酶检测第39-46页
    1 材料与方法第39-40页
        1.1 材料第39-40页
            1.1.1 实验菌株第39页
            1.1.2 标准菌株第39页
            1.1.3 药敏纸片第39-40页
            1.1.4 培养基第40页
            1.1.5 主要实验设备第40页
        1.2 试验方法第40页
            1.2.1 初步筛选试验第40页
            1.2.2 表型确证试验第40页
    2 结果与分析第40-43页
        2.1 ESBLs的检出率第40-41页
        2.2 产ESBLs菌株的地区分布第41页
        2.3 产ESBLs菌株和非产ESBLs菌株的耐药性对比第41-43页
    3 讨论第43-46页
        3.1 超广谱B-内酰胺酶的检测方法及意义第43-44页
        3.2 产ESBLs菌株的耐药趋势第44页
        3.3 产ESBLs菌株与血清型的关系第44-46页
第五章 大肠埃希氏菌的毒素基因检测第46-61页
    1 材料与方法第46-50页
        1.1 材料第46-47页
            1.1.1 实验菌株第46页
            1.1.2 主要试剂第46-47页
            1.1.3 主要仪器第47页
        1.2 方法第47-50页
            1.2.1 细菌模版制备第47页
            1.2.2 引物设计与合成第47-48页
            1.2.3 多重PCR反应体系第48页
            1.2.4 PCR产物分析与回收第48-49页
            1.2.5 感受态细胞制备第49页
            1.2.6 连接与转化第49页
            1.2.7 重组质粒筛选与抽提第49-50页
            1.2.8 序列测定与分析第50页
    2 结果与分析第50-57页
        2.1 LT、STAP、STB和STX2E的鉴定第50-51页
        2.2 大肠埃希氏菌毒素基因的检测第51-57页
    3 讨论第57-61页
        3.1 LT、STAP、STB和STX2E基因检测第57-58页
        3.2 毒素基因、产ESBLs菌株与优势血清型的相关性分析第58-59页
        3.3 优势血清型菌株的耐药表型与毒素基因的关系第59-61页
全文结论第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页
就读学位期间发表论文目录第69页

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