| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词（Abbreviation） | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 动物去势的目的和方法 | 第13-15页 |
| 1.1.1 动物去势的目的 | 第13页 |
| 1.1.2 动物去势的方法 | 第13-15页 |
| 1.2 免疫去势的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 卵泡刺激素（FSH）免疫去势 | 第15页 |
| 1.2.2 促黄体激素（LH）免疫去势 | 第15页 |
| 1.2.3 促性腺激素释放激素（GnRH）免疫去势 | 第15-17页 |
| 1.2.4 吻素（KISS1）免疫去势 | 第17-18页 |
| 1.3 KISS1-GPR54系统的结构及其生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.3.1 KISS1-GPR54系统的结构与分布 | 第18页 |
| 1.3.2 KISS1-GPR54系统在生殖方面的功能 | 第18-19页 |
| 1.4 减毒沙门氏菌为运载体的研究与应用 | 第19-21页 |
| 1.4.1 减毒沙门氏菌作为运载体疫苗的优点 | 第19-20页 |
| 1.4.2 减毒沙门氏菌基因疫苗鼻腔免疫的作用机理 | 第20-21页 |
| 1.4.3 减毒沙门氏菌基因疫苗的应用 | 第21页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 质粒和细菌 | 第23页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.3 酶和主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 相关溶液的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 沙门氏菌电转化感受态的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.2 pVAX-KISS1-S-asd质粒电转化C500沙门氏菌 | 第26页 |
| 2.2.3 C500（pVAX-KISS1-S-asd）阳性克隆的筛选 | 第26页 |
| 2.2.4 重组菌质粒小量提取 | 第26-27页 |
| 2.2.5 细菌基因组DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.6 重组菌体外稳定性检测 | 第27页 |
| 2.2.7 C500/pKS-asd疫苗的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.8 免疫动物和样品采集 | 第28页 |
| 2.2.9 公羊性行为的检测 | 第28页 |
| 2.2.10 血清中抗kisspeptin-54 抗体的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.11 生殖激素浓度的检测 | 第29-30页 |
| 2.2.12 睾丸组织学检测 | 第30-31页 |
| 2.2.13 下丘脑-垂体-睾丸轴组织mRNA的转录分析 | 第31-33页 |
| 2.2.14 数据处理 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-46页 |
| 3.1 重组菌阳性筛选 | 第34页 |
| 3.2 重组菌菌株稳定性的检测 | 第34-35页 |
| 3.3 传代质粒稳定性的检测 | 第35-36页 |
| 3.4 血清中抗kisspeptin-54 抗体效价检测 | 第36-37页 |
| 3.5 血清中相关生殖激素的检测 | 第37-39页 |
| 3.5.1 血清中kisspeptin-54 浓度 | 第37-38页 |
| 3.5.2 血清中睾酮浓度 | 第38-39页 |
| 3.6 阴囊周长对比 | 第39页 |
| 3.7 睾丸大小和性行为检测 | 第39-41页 |
| 3.7.1 免疫后的睾丸大小对比 | 第39-40页 |
| 3.7.2 免疫后公羊性行为的变化 | 第40-41页 |
| 3.8 睾丸组织学分析 | 第41页 |
| 3.9 相关生殖激素基因mRNA的表达变化 | 第41-46页 |
| 3.9.1 生殖轴各组织总RNA的提取和检测 | 第41-42页 |
| 3.9.2 cDNA质量检测 | 第42-43页 |
| 3.9.3 下丘脑中KISS1 mRNA和GPR54 mRNA的转录 | 第43-44页 |
| 3.9.4 垂体中GPR54 mRNA、GnRHR mRNA和LHβ mRNA的转录 | 第44-45页 |
| 3.9.5 睾丸中AR mRN A、LHR mRNA和FSHR mRNA的转录 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 KISS1基因疫苗鼻腔免疫的优点和效果 | 第46页 |
| 4.2 免疫去势的机制 | 第46-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 5.1 全文总结 | 第49页 |
| 5.2 下一步研究建议 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
