| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-28页 |
| 1 鱼类性别研究概述 | 第11-12页 |
| 1.1 鱼类性别的研究意义 | 第11页 |
| 1.2 鱼类性别的影响因素 | 第11-12页 |
| 2 鱼类精子活力概述 | 第12-23页 |
| 2.1 精子活力的研究意义 | 第13页 |
| 2.2 精子激活和抑制 | 第13-14页 |
| 2.3 精子活力的影响因素 | 第14-17页 |
| 2.4 精子活力测量方法 | 第17-19页 |
| 2.5 精子活力评价指标 | 第19-23页 |
| 3 miRNA概述 | 第23-28页 |
| 3.1 miRNA的发现历程 | 第23页 |
| 3.2 miRNA的生物发生 | 第23-25页 |
| 3.3 miRNA的作用机制 | 第25-26页 |
| 3.4 miRNA与精子活力 | 第26-28页 |
| 第二章 黄颡鱼性别相关基因的鉴定与表达分析 | 第28-39页 |
| 1 研究背景 | 第28页 |
| 2 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1 实验动物简介 | 第28-29页 |
| 2.2 实验动物饲养方法 | 第29页 |
| 2.3 实验试剂 | 第29页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第29-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.1 RNA提取 | 第30页 |
| 3.2 黄颡鱼性腺转录组测序文库构建及测序 | 第30-31页 |
| 3.3 黄颡鱼转录组数据的分析 | 第31页 |
| 3.4 激素处理 | 第31-32页 |
| 3.5 RNA反转录 | 第32页 |
| 3.6 荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 4 实验结果与分析 | 第33-37页 |
| 4.1 筛选并确认黄颡鱼转录组数据中与性别相关的基因 | 第33-34页 |
| 4.2 黄颡鱼性别相关基因的表达谱 | 第34-35页 |
| 4.3 amh和amhr2在HPG轴和肝脏中的相对表达量 | 第35页 |
| 4.4 类固醇激素对amh和amhr2在性腺中表达的影响 | 第35-37页 |
| 5 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 miR-34a对斑马鱼精子活力调控功能研究 | 第39-69页 |
| 1 研究背景 | 第39-45页 |
| 1.1 miR-34 基因家族介绍 | 第39-40页 |
| 1.2 精子活力相关基因研究概述 | 第40-42页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9基因组定向编辑技术 | 第42-45页 |
| 2 实验材料 | 第45-47页 |
| 2.1 实验动物简介 | 第45页 |
| 2.2 实验动物饲养方法 | 第45-46页 |
| 2.3 实验试剂 | 第46页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第46-47页 |
| 3 实验方法 | 第47-55页 |
| 3.1 Cas9/gRNA系统构建斑马鱼miR-34a纯合缺失突变体 | 第47-51页 |
| 3.2 分子克隆相关方法 | 第51-53页 |
| 3.3 斑马鱼精子活力测定 | 第53-54页 |
| 3.4 miR-34a靶基因预测方法 | 第54-55页 |
| 4 实验结果与分析 | 第55-66页 |
| 4.1 构建斑马鱼miR-34a纯合缺失突变体 | 第55-60页 |
| 4.2 miR-34a在斑马鱼精巢中的表达分析 | 第60-61页 |
| 4.3 miR-34a~(-/-)斑马鱼精子活力鉴定 | 第61-64页 |
| 4.4 miR-34a在斑马鱼中的预测靶基因研究 | 第64-66页 |
| 5 讨论 | 第66-69页 |
| 5.1 miR-34a功能研究 | 第66-67页 |
| 5.2 miR-34a预测靶基因研究 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-92页 |
| 附录 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
