| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第10-21页 |
| 1.1 毕赤酵母表达系统 | 第10-15页 |
| 1.1.1 常用的毕赤酵母宿主菌株 | 第10-11页 |
| 1.1.2 毕赤酵母启动子系统 | 第11-12页 |
| 1.1.3 影响毕赤酵母外源蛋白表达的因素 | 第12-13页 |
| 1.1.4 外源蛋白的表达对毕赤酵母生理代谢的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.5 研究外源表达过程菌体生理代谢的实验方法 | 第14-15页 |
| 1.2 ~(13)C代谢流分析技术 | 第15-19页 |
| 1.2.1 基于同位素稳态的~(13)C代谢流分析 | 第15页 |
| 1.2.2 基于同位素非稳态的~(13)C代谢流分析 | 第15-17页 |
| 1.2.3 用于~(13)C代谢流分析的微型生物反应器 | 第17页 |
| 1.2.4 ~(13)C代谢流分析在毕赤酵母生理代谢研究中的应用 | 第17-19页 |
| 1.2.5 葡萄糖代谢下外源蛋白表达过程菌体生理代谢的研究概况 | 第19页 |
| 1.3 研究目的、内容及意义 | 第19-21页 |
| 第2章 高性能微型并行生物反应器系统的开发 | 第21-33页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第21页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2.3 药品与试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.4 培养基配方及溶液 | 第22-23页 |
| 2.2.5 毕赤酵母培养 | 第23页 |
| 2.2.6 250mL发酵罐平行性考察实验 | 第23页 |
| 2.2.7 体积氧传递系数的测定 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第24-32页 |
| 2.3.1 250mL微型生物反应器系统概貌 | 第24-27页 |
| 2.3.2 250mL微型生物反应器系统的补料系统 | 第27-30页 |
| 2.3.3 平行性验证 | 第30-31页 |
| 2.3.4 供氧能力 | 第31-32页 |
| 2.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 β-半乳糖苷酶高表达对毕赤酵母胞外宏观代谢的影响 | 第33-45页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 材料与方法 | 第33-39页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第33-34页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2.3 药品与试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.4 培养基配方与溶液 | 第35-36页 |
| 3.2.5 毕赤酵母的培养 | 第36页 |
| 3.2.6 分析和测定方法 | 第36-39页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第39-44页 |
| 3.3.1 菌体干重与OD600的关系 | 第39页 |
| 3.3.2 G1HL与GHL葡萄糖批培养过程曲线 | 第39-40页 |
| 3.3.3 G1HL和GHL宏观代谢水平的比较 | 第40-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第4章 β-半乳糖苷酶高表达对毕赤酵母胞内微观代谢的影响 | 第45-66页 |
| 4.1 引言 | 第45-46页 |
| 4.2 材料与方法 | 第46-50页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第46页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第46页 |
| 4.2.3 药品与试剂 | 第46页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第46-50页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第50-65页 |
| 4.3.1 毕赤酵母代谢网络 | 第50-55页 |
| 4.3.2 50L发酵罐转接250mL发酵罐平行性的考察 | 第55-56页 |
| 4.3.3 同位素稳态考察 | 第56-57页 |
| 4.3.4 ~(13)C代谢流分析 | 第57-60页 |
| 4.3.5 G1HL与GHL的胞内代谢流分布 | 第60-61页 |
| 4.3.6 G1HL与GHL的NADPH代谢 | 第61-63页 |
| 4.3.7 G1HL与GHL的能量代谢 | 第63-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 第5章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 5.1 结论 | 第66-67页 |
| 5.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
