| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 综述 | 第10-26页 |
| 1.1 IL-24的简介 | 第10页 |
| 1.2 IL-24的结构 | 第10-12页 |
| 1.3 mda-7/IL-24的一般功能和活性 | 第12-14页 |
| 1.3.1 mda-7/IL-24在免疫系统和普通组织中的活性 | 第12-13页 |
| 1.3.2 mda-7/IL-24的剪接体 | 第13-14页 |
| 1.4 mda-7/IL-24的抗肿瘤活性 | 第14-21页 |
| 1.4.1 不同表达形式的mda-7/IL-24的抗肿瘤活性 | 第14-15页 |
| 1.4.2 mda-7/IL-24在不同肿瘤中的研究 | 第15-16页 |
| 1.4.3 mda-7/IL-24抗肿瘤的机制 | 第16-20页 |
| 1.4.4 mda-7/IL-24治疗肿瘤中的应用 | 第20-21页 |
| 1.5 大肠杆菌表达系统生产药物蛋白的应用 | 第21页 |
| 1.6 包涵体的体外复性技术 | 第21-24页 |
| 1.6.1 包涵体形成的机制 | 第21-23页 |
| 1.6.2 包涵体的复性工艺 | 第23-24页 |
| 1.7 本实验的研究背景、内容及意义 | 第24-26页 |
| 1.7.1 本论文的研究背景和意义 | 第24-25页 |
| 1.7.2 实验内容 | 第25-26页 |
| 第2章 白细胞介素mda-7/IL-24的异源构建表达 | 第26-38页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-33页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第26-28页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第28页 |
| 2.2.4 常用试剂的配制方法 | 第28-29页 |
| 2.2.5 培养基 | 第29页 |
| 2.2.6 培养方法 | 第29页 |
| 2.2.7 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.3.1 目的基因IL-24的扩增 | 第33-35页 |
| 2.3.2 阳性克隆的验证 | 第35页 |
| 2.3.3 阳性克隆菌的测序分析 | 第35页 |
| 2.3.4 重组蛋白诱导表达结果 | 第35-37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 重组mda-7/IL-24蛋白的体外复性与纯化 | 第38-50页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料与方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 仪器设备 | 第38页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第38页 |
| 3.2.3 常用溶剂的配制方法 | 第38-39页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第39-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-49页 |
| 3.3.1 mda-7/IL-24包涵体的洗涤与溶解 | 第42-44页 |
| 3.3.2 mda-7/IL-24包涵体蛋白的体外复性 | 第44-47页 |
| 3.3.3 mda-7/IL-24包涵体变性后超声的作用 | 第47页 |
| 3.3.4 mda-7/IL-24蛋白的纯化 | 第47-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 通过发酵条件的优化改善包涵体的结构 | 第50-66页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 菌种 | 第50页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第50页 |
| 4.2.3 常用培养基和试剂的配制方法 | 第50页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-65页 |
| 4.3.1 培养条件优化后的结果 | 第52-55页 |
| 4.3.2 金属离子添加剂优化的结果 | 第55-58页 |
| 4.3.3 Box-Behnken分析实验 | 第58-61页 |
| 4.3.4 摇瓶验证优化结果 | 第61页 |
| 4.3.5 mda-7/IL-24包涵体的SEM分析 | 第61-62页 |
| 4.3.6 mda-7/IL-24包涵体的生成速率分 | 第62-64页 |
| 4.3.7 包涵体的纯化 | 第64-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 第5章 mda-7/IL-24的体外活性检测 | 第66-72页 |
| 5.1 引言 | 第66页 |
| 5.2 材料与方法 | 第66-68页 |
| 5.2.1 蛋白药物与细胞 | 第66页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第66页 |
| 5.2.3 实验试剂 | 第66-67页 |
| 5.2.4 常用缓冲液的配制方法 | 第67页 |
| 5.2.5 实验方法 | 第67-68页 |
| 5.3 结果与分析 | 第68-71页 |
| 5.3.1 MTT比色法测定的实验结果 | 第68-70页 |
| 5.3.2 流式细胞仪分析癌细胞的凋亡情况 | 第70-71页 |
| 5.4 本章小结 | 第71-72页 |
| 第6章 总结与展望 | 第72-75页 |
| 6.1 研究总结 | 第72-73页 |
| 6.2 课题展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 科研成果 | 第83页 |
