| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 金属蛋白简介 | 第15-47页 |
| 第一节 金属蛋白的定义 | 第15-17页 |
| 第二节 金属蛋白的功能 | 第17-20页 |
| 第三节 金属蛋白的研究热点 | 第20-25页 |
| 第四节 金属蛋白的研究方法 | 第25-35页 |
| 第五节 本论文研究的目的、意义及主要内容 | 第35-38页 |
| 参考文献 | 第38-47页 |
| 第二章 艰难梭菌中SOD_(cd)的结构、功能与抑制研究 | 第47-81页 |
| 第一节 艰难梭菌及SOD简介 | 第47-51页 |
| 2.1.1 艰难梭菌简介 | 第47-48页 |
| 2.1.2 MnSOD与艰难梭菌侵染 | 第48-49页 |
| 2.1.3 SOD简介 | 第49-50页 |
| 2.1.4 课题的研究目的,意义以及内容 | 第50-51页 |
| 第二节 SOD_(cd)的克隆,表达,纯化以及表征 | 第51-59页 |
| 2.2.1 实验材料和仪器 | 第51-52页 |
| 2.2.2 SOD_(cd)的基因克隆,表达和纯化 | 第52-53页 |
| 2.2.3 SOD_(cd)的表征 | 第53-55页 |
| 2.2.4 结果与讨论 | 第55-59页 |
| 第三节 MnSOD_(cd)的活性与结构研究 | 第59-66页 |
| 2.3.1 实验材料和仪器 | 第59页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第59-60页 |
| 2.3.3 结果与讨论 | 第60-66页 |
| 第四节 MnSOD_(cd)的酶活抑制研究 | 第66-72页 |
| 2.4.1 实验材料和仪器 | 第66-67页 |
| 2.4.2 实验内容 | 第67-68页 |
| 2.4.3 结果与讨论 | 第68-72页 |
| 第五节 本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 第三章 艰难梭菌中SOD_(cd)的金属特异性研究 | 第81-123页 |
| 第一节 MnSOD的金属特异性简介 | 第81-84页 |
| 3.1.1 FeSOD和MnSOD的异同 | 第81-82页 |
| 3.1.2 MnSOD和FeSOD的反应机理 | 第82-83页 |
| 3.1.3 本章研究目的、意义和内容 | 第83-84页 |
| 第二节 SOD_(cd)的金属选择性研究 | 第84-90页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第84页 |
| 3.2.2 Apo-SOD_(cd)的制备和表征 | 第84-85页 |
| 3.2.3 Apo-SOD_(cd)金属亲和力比较 | 第85-86页 |
| 3.2.4 Apo-SOD_(cd)结合金属后热稳定性 | 第86-87页 |
| 3.2.5 结果与讨论 | 第87-90页 |
| 第三节 SOD_(cd)的金属反应性研究 | 第90-113页 |
| 3.3.1 实验材料和仪器 | 第90-91页 |
| 3.3.2 不同金属取代的SOD_(cd)制备和表征 | 第91页 |
| 3.3.3 不同金属取代的SOD_(cd)活性研究 | 第91-92页 |
| 3.3.4 不同金属取代的SOD_(cd)结构研究 | 第92-93页 |
| 3.3.5 不同金属取代的SOD_(cd)光谱和叠氮滴定 | 第93-94页 |
| 3.3.6 不同金属取代的SOD_(cd)电化学 | 第94-96页 |
| 3.3.7 DFT计算反应过渡态能量和反应机理研究 | 第96页 |
| 3.3.8 结果与讨论 | 第96-113页 |
| 第四节 本章小结 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-123页 |
| 第四章 梅毒螺旋体TroR功能的金属依赖性研究 | 第123-163页 |
| 第一节 梅毒螺旋体TroR综述 | 第123-131页 |
| 4.1.1 梅毒螺旋体简介 | 第123页 |
| 4.1.2 tro ABCDR操纵子简介 | 第123-124页 |
| 4.1.3 TroR生物信息学分析 | 第124-127页 |
| 4.1.4 DtxR家族成员结构特点 | 第127-128页 |
| 4.1.5 TroR研究中的关键科学问题 | 第128-130页 |
| 4.1.6 TroR研究目的,意义以及内容 | 第130-131页 |
| 第二节 TroR表达,纯化以及表征 | 第131-139页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第131-132页 |
| 4.2.2 TroR基因克隆，表达和纯化 | 第132-133页 |
| 4.2.3 Sumo蛋白酶表达与纯化 | 第133-134页 |
| 4.2.4 TroR的表征 | 第134页 |
| 4.2.5 结果与讨论 | 第134-139页 |
| 第三节 TroR金属离子结合性质研究 | 第139-149页 |
| 4.3.1 实验材料 | 第139页 |
| 4.3.2 TroR的金属结合性质研究 | 第139-140页 |
| 4.3.3 TroR金属诱导的构象变化 | 第140-141页 |
| 4.3.4 结果与讨论 | 第141-149页 |
| 第四节 基于金属离子的TroR-DNA相互作用研究 | 第149-154页 |
| 4.4.1 实验材料和仪器 | 第149页 |
| 4.4.2 TroR与DNA结合的金属依赖性 | 第149-150页 |
| 4.4.3 结果与讨论 | 第150-154页 |
| 第五节 本章小结 | 第154页 |
| 参考文献 | 第154-163页 |
| 第五章 APP与DR6相互作用研究及其分子机制研究 | 第163-211页 |
| 第一节 老年痴呆症相关p淀粉样前体蛋白(APP)综述 | 第163-172页 |
| 5.1.1 老年痴呆病简介 | 第163-164页 |
| 5.1.2 APP简介 | 第164-167页 |
| 5.1.3 APP E1结构域“新功能” | 第167-169页 |
| 5.1.4 死亡受体6简介 | 第169-171页 |
| 5.1.5 课题意义,目的,工作基础和主要内容 | 第171-172页 |
| 第二节 NAPP,DR6(41-218)基因构建,蛋白表达与纯化 | 第172-176页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第172页 |
| 5.2.2 N-APP和DR6(41-218)的质粒构建和蛋白表达 | 第172-173页 |
| 5.2.3 N-APP 和 DR6(41-218)蛋白纯化 | 第173-174页 |
| 5.2.4 APP18-286 质谱鉴定 | 第174页 |
| 5.2.5 结果与讨论 | 第174-176页 |
| 第三节 N-APP和DR6(41-218)相互作用以及Cu~(2+),Zn~(2+)对其作用的影响 | 第176-189页 |
| 5.3.1 实验材料和仪器 | 第176页 |
| 5.3.2 APP18-286的金属重组和表征 | 第176-177页 |
| 5.3.3 N-APP 和 DR6(41-218)的 ITC 研究 | 第177页 |
| 5.3.4 CFP-APP18-126 和 DR6(41-218)的 FRET 研究 | 第177页 |
| 5.3.5 APP18-126的晶体结构研究 | 第177-178页 |
| 5.3.6 APP18-208-Cu~（2+）/Zn~（2+）的分子动力学模拟结构 | 第178页 |
| 5.3.7 APP18-286/DR6(41-218)的小角散射研究 | 第178页 |
| 5.3.8 APP18-286 与 DR6(41-218)蛋白质对接研究 | 第178-179页 |
| 5.3.9 基于APP18-286/DR6(41-218)复合物对接结构定点突变 | 第179页 |
| 5.3.10 结果与讨论 | 第179-189页 |
| 第四节 N-APP的神经细胞毒性以及Cu~(2+),Zn~(2+)的影响 | 第189-198页 |
| 5.4.1 实验材料 | 第189-190页 |
| 5.4.2 N-APPs 的 SH-SY5Y 和 PC12 细胞毒性 | 第190页 |
| 5.4.3 N-APP处理的SH-SY5Y，PC12细胞ROS焚光染色 | 第190页 |
| 5.4.4 N-APP 激活 CaspaseS 和 6 的 Western-Blot 确认 | 第190-191页 |
| 5.4.5 N-APPs造成小鼠大脑皮层原代神经元修剪轴突 | 第191-192页 |
| 5.4.6 数据处统计分析 | 第192页 |
| 5.4.7 结果与讨论 | 第192-198页 |
| 第五节 本章小结 | 第198-200页 |
| 参考文献 | 第200-211页 |
| 第六章 APP E2结构域与脑铁稳态平衡初探 | 第211-229页 |
| 第一节 APP E2结构域-亚铁氧化酶? | 第211-214页 |
| 6.1.1 APP E2结构域具有“亚铁氧化酶”活性 | 第211-212页 |
| 6.1.2 反驳APP E2结构域的“亚铁氧化酶”活性 | 第212-213页 |
| 6.1.3 APP E2结构域与FPN1相互作用 | 第213页 |
| 6.1.4 课题研究意义,目的和内容 | 第213-214页 |
| 第二节 E2表达,纯化与鉴定 | 第214-217页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第214-215页 |
| 6.2.2 E2表达与纯化 | 第215页 |
| 6.2.3 E2 ESI-MS 质谱鉴定 | 第215-216页 |
| 6.2.4 结果与讨论 | 第216-217页 |
| 第三节 E2与三价铁离子的相互作用 | 第217-222页 |
| 6.3.1 实验材料 | 第217页 |
| 6.3.2 E2与Fe~（3+） 的重组与ICP/OES鉴定 | 第217页 |
| 6.3.3 E2-Fe~（3+） 的 EPR 谱 | 第217页 |
| 6.3.4 E2与Fe~（3+）(Gly)_2的紫外，突光以及ITC滴定 | 第217-218页 |
| 6.3.5 E2-Fe~（3+）的循环伏安研究 | 第218-219页 |
| 6.3.6 E2-Fe~（3+）的晶体结构研究 | 第219页 |
| 6.3.7 结果与讨论 | 第219-222页 |
| 第四节 APP E2-FPN_(HBD)嵌合体基因构建,蛋白表达与纯化 | 第222-225页 |
| 6.4.1 实验材料 | 第222-223页 |
| 6.4.2 E2-FPN_(HBD)嵌合体基因构建,蛋白表达与纯化 | 第223页 |
| 6.4.3 结果与讨论 | 第223-225页 |
| 第五节 总结和展望 | 第225-226页 |
| 参考文献 | 第226-229页 |
| 工作总结和展望 | 第229-231页 |
| 附录 | 第231-241页 |
| 攻读博士学位期间已发表和完成的论文 | 第241-245页 |
| 致谢 | 第245-246页 |
