摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略词表 | 第12-16页 |
第一部分 综述 ROS在哺乳动物早期胚胎发育中的作用 | 第16-24页 |
1、ROS的产生及动态调节 | 第17-19页 |
2、ROS的功能 | 第19-22页 |
3、ROS影响早期胚胎发育 | 第22-23页 |
4、总结 | 第23-24页 |
第二部分 实验 | 第24-52页 |
引言 | 第24-26页 |
1、材料与方法 | 第26-32页 |
1.1、实验动物 | 第26页 |
1.2、实验试剂 | 第26-27页 |
1.3、主要培养液及试剂的配制 | 第27页 |
1.4、溶液配制 | 第27页 |
1.5、体外受精胚胎的获得 | 第27页 |
1.6、实时荧光定量PCR | 第27-29页 |
1.7、ROS检测 | 第29-30页 |
1.8、荧光强度分析 | 第30页 |
1.9、胚胎线粒体膜电位观察 | 第30-31页 |
1.10、线粒体分布实验 | 第31页 |
1.11、胚胎线粒体mtDNA拷贝数的分析 | 第31页 |
1.12、低熔点琼脂糖凝胶包埋亚硫酸盐测序 | 第31-32页 |
2 实验结果 | 第32-48页 |
2.1、阻滞品系KM与非阻滞品系BDF1胚胎的ZGA的差异 | 第32-34页 |
2.2、阻滞品系KM与非阻滞品系BDF1胚胎中的ROS水平检测 | 第34-36页 |
2.3、阻滞品系KM小鼠胚胎在不同培养液中的合子基因组表达的差异 | 第36-38页 |
2.4、阻滞品系KM小鼠胚胎在不同培养液中ROS水平检测 | 第38-39页 |
2.5、胚胎发育状态 | 第39-41页 |
2.6、AAPH处理组胚胎与对照组胚胎胞质内ROS变化观察 | 第41-42页 |
2.7、2-细胞胚胎线粒体膜电位观察(ΔΨm) | 第42-43页 |
2.8、MtROS变化检测 | 第43-44页 |
2.9、线粒体分布情况观察 | 第44-45页 |
2.10、线粒体DNA(mtDNA)拷贝数统计及TFAM基因表达量 | 第45-46页 |
2.11、线粒体相关基因启动子区CpG位点DNA甲基化水平检测 | 第46-48页 |
3、讨论 | 第48-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
结论 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第62页 |