| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-18页 |
| 1.1 菜青虫 | 第13-15页 |
| 1.1.1 为害特点 | 第13-14页 |
| 1.1.2 为害发生特点 | 第14页 |
| 1.1.3 防治方法 | 第14-15页 |
| 1.2 胰蛋白酶抑制剂 | 第15-16页 |
| 1.3 转录组测序 | 第16-17页 |
| 1.4 本文研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第2章 决明胰蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及纯化 | 第18-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第19-20页 |
| 2.2.2 决明种子总RNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.3 决明CoTI基因cDNA的合成 | 第20页 |
| 2.2.4 RT-PCR体外扩增目的片段 | 第20页 |
| 2.2.5 PCR产物的克隆与测序 | 第20页 |
| 2.2.6 CoTI原核表达载体的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.7 蛋白纯化 | 第21页 |
| 2.2.8 蛋白浓度的测定 | 第21页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第21-26页 |
| 2.3.1 决明总RNA的鉴定 | 第21页 |
| 2.3.2 CoTI基因的克隆 | 第21-24页 |
| 2.3.3 重组质粒的构建与鉴定 | 第24-25页 |
| 2.3.4 蛋白纯化 | 第25页 |
| 2.3.5 CoTI蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
| 2.4 本章小结 | 第26-27页 |
| 第3章 菜青虫中肠转录组学分析 | 第27-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 3.1.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.2 菜青虫中肠RNA的提取 | 第27-28页 |
| 3.1.3 转录组测序 | 第28页 |
| 3.1.4 测序数据及其质量控制 | 第28-29页 |
| 3.1.5 转录组序列组装 | 第29页 |
| 3.1.6 转录组测序文库质量评估 | 第29-30页 |
| 3.1.7 Unigene功能注释 | 第30页 |
| 3.1.8 Uinigene基因结构分析 | 第30页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第30-61页 |
| 3.2.1 菜青虫中肠RNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.2 测序数据产出统计与质量控制 | 第31页 |
| 3.2.3 转录组测序数据组装结果 | 第31-32页 |
| 3.2.4 Unigene功能注释 | 第32-33页 |
| 3.2.5 Nr注释 | 第33-38页 |
| 3.2.6 Unigene GO功能分类 | 第38-39页 |
| 3.2.7 COG和KOG功能分类 | 第39-41页 |
| 3.2.8 KEGG代谢通路分析 | 第41页 |
| 3.2.9 解毒酶的抑制 | 第41-61页 |
| 3.2.10 SSR | 第61页 |
| 3.3 本章小结 | 第61-62页 |
| 第4章 菜青虫中肠差异表达基因分析 | 第62-73页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-63页 |
| 4.1.1 转录组数据 | 第62页 |
| 4.1.2 Unigene表达量分析 | 第62-63页 |
| 4.1.3 差异表达基因筛选 | 第63页 |
| 4.1.4 差异表达基因分析 | 第63页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第63-72页 |
| 4.2.1 菜青虫高表达的差异表达基因分析 | 第63-64页 |
| 4.2.2 差异表达基因(DEG)筛选 | 第64-65页 |
| 4.2.3 差异表达基因功能注释 | 第65-72页 |
| 4.3 本章小结 | 第72-73页 |
| 第5章 菜青虫qPCR内参基因的选择 | 第73-82页 |
| 5.1 材料与方法 | 第73-75页 |
| 5.1.1 菜青虫各组织RNA的提取和cDNA的制备 | 第73-74页 |
| 5.1.2 内参引物的设计 | 第74页 |
| 5.1.3 qRT-PCR扩增 | 第74-75页 |
| 5.1.4 菜青虫候选内参基因稳定性分析 | 第75页 |
| 5.2 结果与分析 | 第75-81页 |
| 5.2.1 RNA的提取与cDNA的合成 | 第75-76页 |
| 5.2.2 候选内参基因的选择和引物设计 | 第76-77页 |
| 5.2.3 菜青虫候选内参基因引物特异性分析 | 第77页 |
| 5.2.4 菜青虫候选内参基因的表达谱 | 第77-78页 |
| 5.2.5 菜青虫内参基因筛选 | 第78-81页 |
| 5.3 本章小结 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第88页 |