| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 海带研究背景 | 第11-13页 |
| 1.1.1 海带生物学特征 | 第11-12页 |
| 1.1.2 海带应用价值 | 第12-13页 |
| 1.2 光、温对海带生长繁殖的研究 | 第13-14页 |
| 1.3 隐花色素/光裂解酶家族(Cryptochrome/Photolyase Family,CPF) | 第14-19页 |
| 1.3.1 光裂解酶 | 第14-15页 |
| 1.3.2 隐花色素 | 第15-17页 |
| 1.3.3 CRY-DASH | 第17-19页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 海带CRY-DASH基因的克隆和体外表达分析 | 第20-61页 |
| 2.1 海带CRY-DASH基因的克隆 | 第20-39页 |
| 2.1.1 材料和方法 | 第20-29页 |
| 2.1.1.1 材料处理 | 第20页 |
| 2.1.1.2 试剂准备 | 第20-21页 |
| 2.1.1.3 RNA提取和cDNA制备 | 第21-23页 |
| 2.1.1.4 RACE法克隆海带CRY-DASH基因全长 | 第23-27页 |
| 2.1.1.5 RACE产物的纯化、克隆及测序 | 第27-29页 |
| 2.1.1.6 序列分析 | 第29页 |
| 2.1.2 结果与分析 | 第29-38页 |
| 2.1.2.1 总RNA提取检测 | 第29-30页 |
| 2.1.2.2 SjCRY-DASH基因克隆 | 第30-32页 |
| 2.1.2.3 海带CRY-DASH基因序列分析 | 第32-38页 |
| 2.1.3 讨论与小结 | 第38-39页 |
| 2.2 SjCRY-DASH体外表达与纯化 | 第39-61页 |
| 2.2.1 材料和方法 | 第39-52页 |
| 2.2.1.1 试剂准备 | 第39-42页 |
| 2.2.1.2 SjCRY-DASH基因ORF的克隆 | 第42-45页 |
| 2.2.1.3 SjCRY-DASH原核表达 | 第45-46页 |
| 2.2.1.4 重组质粒的构建 | 第46-48页 |
| 2.2.1.5 以pCold Ⅰ载体进行融合蛋白诱导表达 | 第48-49页 |
| 2.2.1.6 以pMAL-c5X载体进行融合蛋白诱导表达 | 第49-50页 |
| 2.2.1.7 融合蛋白纯化 | 第50-51页 |
| 2.2.1.8 纯化蛋白检测 | 第51-52页 |
| 2.2.2 结果与分析 | 第52-59页 |
| 2.2.2.1 带酶切位点的ORF扩增 | 第52-53页 |
| 2.2.2.2 重组表达质粒的构建 | 第53-54页 |
| 2.2.2.3 融合蛋白诱导表达与纯化 | 第54-59页 |
| 2.2.3 讨论与小结 | 第59-61页 |
| 第三章 光、温对SjCRY-DASH表达的影响 | 第61-73页 |
| 3.1 不同光质对SjCRY-DASH表达的影响 | 第61-67页 |
| 3.1.1 材料与方法 | 第61-65页 |
| 3.1.1.1 材料处理 | 第61页 |
| 3.1.1.2 试剂与仪器 | 第61页 |
| 3.1.1.3 RNA提取与cDNA合成 | 第61-62页 |
| 3.1.1.4 PCR检测模板质量 | 第62-63页 |
| 3.1.1.5 实时定量PCR检测SjCRY-DASH表达水平 | 第63-65页 |
| 3.1.2 结果与分析 | 第65-66页 |
| 3.1.2.1 反转cDNA质量检测 | 第65页 |
| 3.1.2.2 光质对SjCRY-DASH转录的影响 | 第65-66页 |
| 3.1.3 讨论 | 第66-67页 |
| 3.2 光周期对SjCRY-DASH表达的影响 | 第67-70页 |
| 3.2.1 材料与方法 | 第67页 |
| 3.2.1.1材料处理 | 第67页 |
| 3.2.1.2 试剂与仪器 | 第67页 |
| 3.2.1.3 RNA提取与cDNA合成 | 第67页 |
| 3.2.1.4 SjCRY-DASH表达水平检测 | 第67页 |
| 3.2.2 结果与分析 | 第67-69页 |
| 3.2.3 讨论 | 第69-70页 |
| 3.3 温度对SjCRY-DASH表达的影响 | 第70-72页 |
| 3.3.1 材料与方法 | 第70页 |
| 3.3.1.1 材料处理 | 第70页 |
| 3.3.1.2 试剂与仪器 | 第70页 |
| 3.3.1.3 RNA提取与cDNA合成 | 第70页 |
| 3.3.1.4 SjCRY-DASH表达水平检测 | 第70页 |
| 3.3.2 结果与分析 | 第70-71页 |
| 3.3.3 讨论 | 第71-72页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第72-73页 |
| 第四章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 作者简历 | 第83页 |
| 发表及完成的论文 | 第83页 |
