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脂多糖对肝癌干细胞干性维持的作用及其机制研究

附录第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
前言第12-13页
材料和方法第13-31页
    1. 实验材料第13-16页
        1.1 实验仪器和设备第13-14页
        1.2 细胞培养及处理相关试剂第14-15页
        1.3 流式细胞术相关试剂第15页
        1.4 实时荧光定量PCR相关试剂第15页
        1.5 Western blot相关试剂第15-16页
        1.6 RNA干扰相关试剂第16页
        1.7 实验动物第16页
        1.8 实验细胞系第16页
    2. 实验方法第16-31页
        2.1 细胞复苏、传代与冻存第16-17页
        2.2 细胞计数第17-18页
        2.3 CD133阳性细胞的分选纯化和培养第18页
        2.4 流式细胞术检测第18-19页
        2.5 实时荧光定量PCR第19-21页
            2.5.1 Trizol提取RNA第19-20页
            2.5.2 样品cDNA合成第20页
            2.5.3 RT-PCR第20-21页
        2.6 Western blot第21-27页
            2.6.1 细胞样品蛋白的提取第21-22页
            2.6.2 蛋白定量(BCA法)第22页
            2.6.3 蛋白变性第22-23页
            2.6.4 配制凝胶第23-25页
            2.6.5 电泳第25页
            2.6.6 转膜第25-26页
            2.6.7 封闭及抗体孵育第26-27页
            2.6.8 显影第27页
        2.7 克隆形成实验第27页
        2.8 裸鼠皮下成瘤试验第27-28页
        2.9 实时无标记细胞迁移分析试验第28页
        2.10 Transwell侵袭小室试验第28-29页
        2.11 CCK-8 试验第29页
        2.12 小干扰RNA试验第29-30页
        2.13 数据处理及统计分析第30-31页
结果第31-45页
    1. 分选纯化CD133阳性肝癌干细胞第31页
    2. 脂多糖对肝癌干细胞CD133表达的影响第31-34页
    3. 脂多糖可维持肝癌干细胞中其它干性相关基因的表达第34页
    4. 脂多糖对肝癌干细胞干性特征的影响第34-40页
        4.1 脂多糖对肝癌干细胞克隆形成能力和成瘤能力的影响第34-37页
        4.2 脂多糖对肝癌干细胞迁移和侵袭能力的影响第37-39页
        4.3 脂多糖对肝癌干细胞的化疗抵抗能力的影响第39-40页
    5. 脂多糖对肝癌干细胞干性维持的相关分子机制第40-45页
        5.1 脂多糖对肝癌干细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响第40页
        5.2 特异性干扰HIF-1α表达对脂多糖刺激培养的肝癌干细胞中CD133及其它干性相关基因表达的影响第40-41页
        5.3 特异性干扰HIF-1α的表达对脂多糖刺激培养的肝癌干细胞干性特征的影响第41-43页
        5.4 脂多糖可激活NF-κB通路进而调节肝癌干细胞的HIF-1α和CD133表达第43-45页
讨论第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-51页
综述第51-74页
    参考文献第62-74页
硕士期间获奖及学术论文发表情况第74-75页
致谢第75-76页

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