中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
缩略词 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-25页 |
·研究的背景及意义 | 第11-12页 |
·绿僵菌的研究进展 | 第12-13页 |
·绿僵菌致病机理的研究进展 | 第13-16页 |
·识别与粘附 | 第14页 |
·形成附着胞 | 第14-15页 |
·穿透体壁 | 第15页 |
·体内繁殖致死昆虫 | 第15-16页 |
·绿僵菌的应用现状 | 第16页 |
·氰化物水合酶基因的研究进展 | 第16-21页 |
·氰化物分类 | 第16-17页 |
·氰化物的中毒机理 | 第17-18页 |
·氰化物来源 | 第18页 |
·处理氰化物的办法 | 第18-20页 |
·氰化物水合酶的研究进展 | 第20-21页 |
·RNAi 的研究进展 | 第21-23页 |
·RNA 干扰作用的机理 | 第21-22页 |
·RNAi 的特点及意义 | 第22-23页 |
·立题依据和研究目标 | 第23页 |
·研究内容和技术路线 | 第23-24页 |
·研究内容 | 第23页 |
·技术路线 | 第23-24页 |
·本研究的创新性 | 第24-25页 |
2 材料和方法 | 第25-37页 |
·材料 | 第25-27页 |
·供试菌株和昆虫 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·培养基及主要溶液配制 | 第26-27页 |
·基因cDNA 全长的获取 | 第27页 |
·基因DNA 全长的获取 | 第27页 |
·基因的干扰 | 第27-33页 |
·干扰片断的获取 | 第28-29页 |
·中间载体的获取 | 第29页 |
·中间载体与基因干扰片段的连接 | 第29页 |
·连接产物的转化 | 第29-31页 |
·干扰载体的构建 | 第31页 |
·干扰载体转入农杆菌 | 第31-33页 |
·突变菌株的筛选鉴定 | 第33页 |
·干扰突变株的表型分析 | 第33-34页 |
·毒力分析 | 第33-34页 |
·附着胞的观察 | 第34页 |
·MaChy 基因的表达分析 | 第34-36页 |
·收集材料 | 第34页 |
·提取样品的总RNA | 第34页 |
·总RNA 的反转录合成一链cDNA | 第34-35页 |
·定量PCR 反应 | 第35-36页 |
·定量PCR 反应的数据处理 | 第36页 |
·生物信息学分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-46页 |
·绿僵菌MaChy 基因cDNA 的克隆 | 第37-38页 |
·绿僵菌MaChy 基因DNA 的克隆 | 第38-39页 |
·载体构建的结果 | 第39-40页 |
·生物信息学分析结果 | 第40-42页 |
·蛋白质一级结构分析 | 第40-41页 |
·蛋白质二级结构分析及同源建模 | 第41-42页 |
·MaChy 基因蛋白与其他蛋白同源性分析 | 第42-43页 |
·绿僵菌MaChy 基因干扰突变株的获得 | 第43-44页 |
·干扰突变株的表型分析 | 第44-45页 |
·毒力测定 | 第44页 |
·附着胞的观察 | 第44-45页 |
·绿僵菌MaChy 基因表达分析 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
·绿僵菌氰化物水合酶基因的cDNA 序列和DNA 序列克隆的方法 | 第46页 |
·绿僵菌氰化物水合酶基因的编码产物 | 第46-47页 |
·绿僵菌氰化物水合酶基因干扰突变株的表型分析 | 第47-48页 |
·绿僵菌氰化物水合酶基因的表达分析 | 第48-49页 |
5 结论与后续工作 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录 | 第61页 |