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蝗绿僵菌CQMa102体表入侵相关基因MaChy的克隆和分析

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-10页
缩略词第10-11页
1 绪论第11-25页
   ·研究的背景及意义第11-12页
   ·绿僵菌的研究进展第12-13页
   ·绿僵菌致病机理的研究进展第13-16页
     ·识别与粘附第14页
     ·形成附着胞第14-15页
     ·穿透体壁第15页
     ·体内繁殖致死昆虫第15-16页
   ·绿僵菌的应用现状第16页
   ·氰化物水合酶基因的研究进展第16-21页
     ·氰化物分类第16-17页
     ·氰化物的中毒机理第17-18页
     ·氰化物来源第18页
     ·处理氰化物的办法第18-20页
     ·氰化物水合酶的研究进展第20-21页
   ·RNAi 的研究进展第21-23页
     ·RNA 干扰作用的机理第21-22页
     ·RNAi 的特点及意义第22-23页
   ·立题依据和研究目标第23页
   ·研究内容和技术路线第23-24页
     ·研究内容第23页
     ·技术路线第23-24页
   ·本研究的创新性第24-25页
2 材料和方法第25-37页
   ·材料第25-27页
     ·供试菌株和昆虫第25页
     ·主要仪器设备第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·培养基及主要溶液配制第26-27页
   ·基因cDNA 全长的获取第27页
   ·基因DNA 全长的获取第27页
   ·基因的干扰第27-33页
     ·干扰片断的获取第28-29页
     ·中间载体的获取第29页
     ·中间载体与基因干扰片段的连接第29页
     ·连接产物的转化第29-31页
     ·干扰载体的构建第31页
     ·干扰载体转入农杆菌第31-33页
   ·突变菌株的筛选鉴定第33页
   ·干扰突变株的表型分析第33-34页
     ·毒力分析第33-34页
     ·附着胞的观察第34页
   ·MaChy 基因的表达分析第34-36页
     ·收集材料第34页
     ·提取样品的总RNA第34页
     ·总RNA 的反转录合成一链cDNA第34-35页
     ·定量PCR 反应第35-36页
     ·定量PCR 反应的数据处理第36页
   ·生物信息学分析第36-37页
3 结果与分析第37-46页
   ·绿僵菌MaChy 基因cDNA 的克隆第37-38页
   ·绿僵菌MaChy 基因DNA 的克隆第38-39页
   ·载体构建的结果第39-40页
   ·生物信息学分析结果第40-42页
     ·蛋白质一级结构分析第40-41页
     ·蛋白质二级结构分析及同源建模第41-42页
   ·MaChy 基因蛋白与其他蛋白同源性分析第42-43页
   ·绿僵菌MaChy 基因干扰突变株的获得第43-44页
   ·干扰突变株的表型分析第44-45页
     ·毒力测定第44页
     ·附着胞的观察第44-45页
   ·绿僵菌MaChy 基因表达分析第45-46页
4 讨论第46-49页
   ·绿僵菌氰化物水合酶基因的cDNA 序列和DNA 序列克隆的方法第46页
   ·绿僵菌氰化物水合酶基因的编码产物第46-47页
   ·绿僵菌氰化物水合酶基因干扰突变株的表型分析第47-48页
   ·绿僵菌氰化物水合酶基因的表达分析第48-49页
5 结论与后续工作第49-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-61页
附录第61页

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