| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 第一篇 前言 | 第6-15页 |
| 1.1.氮素对植物的生长发育的影响 | 第6页 |
| 1.2.我国玉米氮肥利用效率概况 | 第6-9页 |
| 1.2.1.我国玉米的氮肥施用现状 | 第6-7页 |
| 1.2.2.提高玉米氮素利用效率的途径及研究进展 | 第7-9页 |
| 1.3. DOF转录因子的研究进展 | 第9-14页 |
| 1.3.1.植物Dof转录因子的发现 | 第9页 |
| 1.3.2.Dof转录因子的结构特点 | 第9-10页 |
| 1.3.3.Dof转录因子的功能 | 第10-14页 |
| 1.4.研究目的及意义 | 第14-15页 |
| 第二篇 研究内容 | 第15-26页 |
| 第一章 材料和方法 | 第15-26页 |
| 2.1.材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1.植物材料、菌株和质粒 | 第15页 |
| 2.1.2.主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.3.生化和分子生物学试剂 | 第16页 |
| 2.1.4.常用培养基和溶液 | 第16-18页 |
| 2.1.5.实验所用引物 | 第18页 |
| 2.2.实验方法 | 第18-26页 |
| 2.2.1.AtDOF1基因的克隆 | 第18-19页 |
| 2.2.2.植物表达载体的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.3.转化农杆菌的获得 | 第20页 |
| 2.2.4.玉米的遗传转化 | 第20-22页 |
| 2.2.5.植物DNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.6.PEPC和PK酶活性测定 | 第22-23页 |
| 2.2.7.总游离氨基酸含量的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.8.叶绿素含量测定 | 第24页 |
| 2.2.9.植株全氮含量测定 | 第24页 |
| 2.2.10.氮胁迫盆栽实验 | 第24-26页 |
| 第三篇 结果与分析 | 第26-38页 |
| 3.1.拟南芥AtDOF1基因的克隆 | 第26-27页 |
| 3.1.1. AtDOF1基因的获得 | 第26页 |
| 3.1.2. 载体构建 | 第26-27页 |
| 3.2.植物表达载体构建 | 第27-28页 |
| 3.3.玉米的遗传转化 | 第28-29页 |
| 3.4.转基因玉米的分子生物学检测 | 第29-31页 |
| 3.4.1.转基因植株的PCR检测 | 第29页 |
| 3.4.2.反转录RT-PCR | 第29-30页 |
| 3.4.3.PAT蛋白表达分析 | 第30-31页 |
| 3.4.4.RealTime-PCR检测PEPC和PK基因的表达 | 第31页 |
| 3.5.磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）和 丙酮酸激酶（PK）活性测定 | 第31-32页 |
| 3.6.氮胁迫盆栽实验 | 第32-35页 |
| 3.6.1.叶绿素含量测定 | 第32-33页 |
| 3.6.3.比生长率测定 | 第33-34页 |
| 3.6.4.氮胁迫表型 | 第34-35页 |
| 3.7.总游离氨基酸含量测定 | 第35-36页 |
| 3.8.田间指标的测定 | 第36-38页 |
| 3.8.1.田间叶绿素含量测定 | 第36页 |
| 3.8.2.田间植株全氮含量测定 | 第36-38页 |
| 第四篇 讨论 | 第38-39页 |
| 4.1.转AtDOF1基因玉米的获得及酶活性的调节 | 第38页 |
| 4.2.转AtDOF1基因玉米的氮素营养吸收代谢特性 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
