| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第12-17页 |
| 1.1 我国葡萄栽培情况概况 | 第12-13页 |
| 1.1.1 我国葡萄栽培情况及问题 | 第12页 |
| 1.1.2 提高葡萄抗寒性的研究进展及意义 | 第12-13页 |
| 1.2 葡萄抗寒机制的研究概况 | 第13-15页 |
| 1.3 本课题的研究目的和意义 | 第15-17页 |
| 第2章 葡萄抗寒基因的挖掘和分子克隆 | 第17-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2 实验仪器及试剂 | 第17页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第17页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-24页 |
| 2.3.1 总RNA的提取和cDNA的生成 | 第17-19页 |
| 2.3.2 VvCOR27基因的克隆 | 第19-20页 |
| 2.3.3 PCR产物的回收及载体的连接 | 第20-21页 |
| 2.3.4 DH5α感受态的制备及连接产物的转化 | 第21-22页 |
| 2.3.5 菌液检测及测序 | 第22页 |
| 2.3.6 生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 2.3.7 定量RT-PCR分析 | 第23-24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-31页 |
| 2.4.1 总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.4.2 VvCOR27基因的编码区全长克隆 | 第24-25页 |
| 2.4.3 VvCOR27基因的cDNA克隆 | 第25页 |
| 2.4.4 VvCOR27基因的同源比对分析 | 第25-29页 |
| 2.4.5 冷处理下VvCOR27基因的表达模式分析 | 第29-30页 |
| 2.4.6 VvCOR27启动子调控元件分析 | 第30-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-32页 |
| 第3章 VvCOR27表达载体的构建及超表达拟南芥的鉴定 | 第32-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 菌种及载体 | 第32页 |
| 3.1.2 试剂及仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 3.2.1 野生型拟南芥的培育 | 第32-33页 |
| 3.2.2 质粒的提取 | 第33-34页 |
| 3.2.3 表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.4 转化大肠杆菌及表达载体的验证 | 第35页 |
| 3.2.5 农杆菌感受态的制备及转化 | 第35-36页 |
| 3.2.6 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第36-37页 |
| 3.2.7 超表达VvCOR27拟南芥的获得及鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.8 超表达VvCOR27拟南芥抗寒表型的鉴定 | 第38页 |
| 3.2.9 超表达VvCOR27拟南芥生理指标的测定 | 第38-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-45页 |
| 3.3.1. 超表达VvCOR27拟南芥潮霉素抗性基因检测 | 第41-42页 |
| 3.3.2 超表达VvCOR27拟南芥PCR检测 | 第42-43页 |
| 3.3.3 超表达VvCOR27拟南芥抗寒性鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.4 超表达VvCOR27拟南芥生理指标测定结果 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 结论与展望 | 第47-49页 |
| 4.1 研究结论 | 第47-48页 |
| 4.2 研究展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 缩略词及中英文全称 | 第58页 |
