| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-28页 |
| 1. 动物药研究概况 | 第15-17页 |
| 1.1 动物药的活性成分研究现状 | 第15-17页 |
| 2. 地龙研究概况 | 第17-21页 |
| 2.1 化学成分 | 第17-19页 |
| 2.2 药理作用 | 第19-21页 |
| 3. 动物药提取新技术 | 第21-22页 |
| 3.1 超临界流体萃取(SFE)技术 | 第21页 |
| 3.2 半仿生提取技术 | 第21-22页 |
| 3.3 酶工程提取技术 | 第22页 |
| 3.5 其他提取技术 | 第22页 |
| 4. 动物药有效成分分离新技术 | 第22-24页 |
| 4.1 色谱分离技术 | 第23页 |
| 4.2 电泳分离技术 | 第23页 |
| 4.3 膜分离技术 | 第23-24页 |
| 5. 立题依据 | 第24-27页 |
| 5.1 本课题的设计依据 | 第24-25页 |
| 5.2 本课题的研究内容 | 第25-27页 |
| 6. 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 地龙湿法超微粉碎提取液与水煎煮提取液的比较研究 | 第28-43页 |
| 第一节 地龙湿法超微粉碎提取液与水煎煮提取液的主要化学成分比较研究 | 第28-37页 |
| 引言 | 第28页 |
| 1. 仪器与试药 | 第28-29页 |
| 1.1 仪器 | 第28-29页 |
| 1.2 试药 | 第29页 |
| 2. 方法 | 第29-31页 |
| 2.1 地龙提取物的制备 | 第29页 |
| 2.2 总蛋白含量测定 | 第29页 |
| 2.3 蛋白组成分析 | 第29-30页 |
| 2.4 氨基酸组成分析 | 第30页 |
| 2.5 指纹图谱分析 | 第30-31页 |
| 3. 结果与讨论 | 第31-37页 |
| 3.1 总蛋白含量测定 | 第31-32页 |
| 3.2 蛋白组成分析 | 第32-34页 |
| 3.3 氨基酸组成分析 | 第34页 |
| 3.4 指纹图谱分析 | 第34-37页 |
| 第二节 地龙湿法超微粉碎提取液与水煎煮提取液的抗血栓药效比较研究 | 第37-42页 |
| 引言 | 第37页 |
| 1. 仪器与试药 | 第37-38页 |
| 1.1 仪器 | 第37页 |
| 1.2 试药 | 第37-38页 |
| 2. 方法 | 第38-39页 |
| 2.1 模型药物制备 | 第38页 |
| 2.2 体外抗凝作用 | 第38页 |
| 2.3 体外溶栓作用 | 第38-39页 |
| 2.4 体内抗血栓作用 | 第39页 |
| 3. 结果与讨论 | 第39-42页 |
| 3.1 体外抗凝作用 | 第39-40页 |
| 3.2 体外溶栓作用 | 第40页 |
| 3.3 体内抗血栓作用 | 第40-42页 |
| 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 地龙湿法超微粉碎提取物在模拟胃肠环境中的降解研究 | 第43-58页 |
| 第一节 地龙小分子成分在模拟胃肠环境中的降解研究 | 第43-48页 |
| 引言 | 第43页 |
| 1. 仪器与试药 | 第43页 |
| 1.1 仪器 | 第43页 |
| 1.2 试药 | 第43页 |
| 2. 方法 | 第43-44页 |
| 2.1 人工胃液/肠液配制 | 第43-44页 |
| 2.2 地龙小分子溶液的制备 | 第44页 |
| 2.3 地龙小分子物质在人工胃液/肠液中降解研究 | 第44页 |
| 2.4 HPLC法测定小分子物质相对浓度变化 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-46页 |
| 3.1 地龙小分子物质在人工胃液的降解程度 | 第44-45页 |
| 3.2 地龙小分子物质在人工肠液的降解程度 | 第45-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-48页 |
| 第二节 地龙蛋白在模拟胃肠环境中的降解研究 | 第48-57页 |
| 1. 仪器与试药 | 第48页 |
| 1.1 仪器 | 第48页 |
| 1.2 试药 | 第48页 |
| 2. 方法 | 第48-50页 |
| 2.1 人工胃液/肠液配制 | 第48页 |
| 2.2 地龙蛋白溶液的制备 | 第48页 |
| 2.3 酶解终止考察 | 第48-49页 |
| 2.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第49-50页 |
| 2.5 地龙蛋白在人工胃液/肠液中降解研究 | 第50页 |
| 2.6 不同pH值下地龙蛋白、胃蛋白酶、胰蛋白酶纤溶蛋白活性 | 第50页 |
| 2.7 地龙蛋白在人工胃液/肠液降解后纤溶蛋白活性 | 第50页 |
| 3. 结果 | 第50-56页 |
| 3.1 胃蛋白酶酶解终止考察 | 第50-51页 |
| 3.2 胰蛋白酶酶解终止考察 | 第51页 |
| 3.3 Bradford法检测地龙蛋白在人工胃、肠液降解程度 | 第51-52页 |
| 3.4 SDS-PAGE法检测地龙蛋白在人工胃液降解程度 | 第52-53页 |
| 3.5 SDS-PAGE法检测地龙蛋白在人工肠液降解程度 | 第53-54页 |
| 3.6 不同pH值下地龙蛋白、胃蛋白酶、胰蛋白酶纤溶蛋白活性 | 第54-55页 |
| 3.7 地龙蛋白在人工胃液/肠液降解后纤溶蛋白活性 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-57页 |
| 本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 地龙湿法超微粉碎与常规匀浆的"粉碎-溶出"动力学比较研究 | 第58-66页 |
| 引言 | 第58页 |
| 1. 仪器与试药 | 第58页 |
| 1.1 仪器 | 第58页 |
| 1.2 试药 | 第58页 |
| 2. 方法 | 第58-59页 |
| 2.1 地龙提取操作 | 第58-59页 |
| 2.2 粉碎动力学分析 | 第59页 |
| 2.3 电镜分析 | 第59页 |
| 2.4 蛋白质溶出动力学过程 | 第59页 |
| 2.5 化学成分指纹图谱分析 | 第59页 |
| 3. 结果 | 第59-63页 |
| 3.1 粉碎动力学分析 | 第59-60页 |
| 3.2 电镜分析比较结果 | 第60-61页 |
| 3.3 蛋白质溶出动力学过程 | 第61-62页 |
| 3.4 化学成分指纹图谱比较结果 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 响应面分析法优化湿法超微粉碎提取地龙蛋白的工艺研究 | 第66-77页 |
| 引言 | 第66页 |
| 1. 仪器与试药 | 第66页 |
| 1.1 仪器 | 第66页 |
| 1.2 试药 | 第66页 |
| 2. 方法 | 第66-67页 |
| 2.1 蛋白质含量测定 | 第66-67页 |
| 2.2 蛋白质得率计算 | 第67页 |
| 3. 结果 | 第67-75页 |
| 3.1 单因素试验结果 | 第67-70页 |
| 3.2 利用响应面分析法确定最优工艺条件 | 第70-71页 |
| 3.3 回归模型的方差分析 | 第71-72页 |
| 3.4 响应面工艺优化分析 | 第72-75页 |
| 3.5 蛋白质得率最优条件的确定 | 第75页 |
| 3.6 验证实验 | 第75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 本章小结 | 第76-77页 |
| 第六章 膜与凝胶耦合纯化地龙湿法超微粉碎提取液中纤溶活性蛋白 | 第77-88页 |
| 引言 | 第77-78页 |
| 1. 仪器与试药 | 第78页 |
| 1.1 仪器 | 第78页 |
| 1.2 试药 | 第78页 |
| 2. 方法 | 第78-81页 |
| 2.1 膜孔径选择 | 第78页 |
| 2.2 膜与凝胶耦合纯化纤溶活性蛋白 | 第78-79页 |
| 2.3 酶活力测定 | 第79-80页 |
| 2.4 纯化蛋白组分纯度的鉴定及分子量确定 | 第80页 |
| 2.5 纤溶蛋白(LK1)氨基酸序列测定 | 第80-81页 |
| 3. 结果 | 第81-86页 |
| 3.1 膜孔径选择 | 第81-82页 |
| 3.2 膜与凝胶耦合纯化纤溶活性蛋白 | 第82-83页 |
| 3.3 酶活力测定 | 第83-85页 |
| 3.4 纯化蛋白分子量确定 | 第85页 |
| 3.5 纤溶蛋白(LK1)氨基酸序列测定 | 第85-86页 |
| 4. 讨论 | 第86-87页 |
| 本章小结 | 第87-88页 |
| 第七章 结论与展望 | 第88-90页 |
| 1. 结论 | 第88-89页 |
| 2. 展望 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
