| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第18-39页 |
| 1.1 黄芪研究进展 | 第18-23页 |
| 1.1.1 膜荚黄芪简介 | 第18-19页 |
| 1.1.2 黄芪的主要活性成分 | 第19-21页 |
| 1.1.3 黄芪的主要药理活性 | 第21-23页 |
| 1.2 植物毛状根培养技术研究进展 | 第23-28页 |
| 1.2.1 毛状根的体外诱导机制及特点 | 第24-26页 |
| 1.2.2 毛状根培养体系在生产植物次生代谢活性成分方面的应用 | 第26页 |
| 1.2.3 状根培养体系在阐明植物次生代谢产物生物合成路径方面的应用 | 第26页 |
| 1.2.4 毛状根培养体系在其他发面有潜力的应用 | 第26-28页 |
| 1.3 三萜皂苷类化合物生物合成路径 | 第28-30页 |
| 1.4 黄酮类化合物生物合成路径 | 第30-32页 |
| 1.5 诱导子对植物次生代谢产物生物合成的调控研究进展 | 第32-35页 |
| 1.5.1 诱导子的定义和分类 | 第32-33页 |
| 1.5.2 诱导子的调控作用特点 | 第33页 |
| 1.5.3 诱导子的调控作用机制 | 第33-34页 |
| 1.5.4 诱导子对植物毛状根中次生代谢产物生物合成的调控 | 第34-35页 |
| 1.6 黄芪毛状根培养体系研究进展 | 第35-36页 |
| 1.7 研究的目的意义 | 第36-38页 |
| 1.8 技术路线 | 第38-39页 |
| 2 优化黄芪毛状根培养体系高效生产皂苷和异黄酮类次生代谢活性成分 | 第39-75页 |
| 2.1 实验仪器、材料与试剂 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第41-50页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第41-42页 |
| 2.2.2 黄芪无菌苗的培养 | 第42页 |
| 2.2.3 黄芪毛状根的诱导发生 | 第42-43页 |
| 2.2.4 高产皂苷和异黄酮的黄芪毛状根株系的筛选 | 第43页 |
| 2.2.5 黄芪毛状根株系的分子鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.6 高产皂苷的黄芪毛状根株系培养条件的优化 | 第44-46页 |
| 2.2.7 高产异黄酮的黄芪毛状株系根培养条件的优化 | 第46-48页 |
| 2.2.8 样品溶液的制备 | 第48页 |
| 2.2.9 LC-MS/MS分析检测 | 第48-49页 |
| 2.2.10 黄芪毛状根粗提物的抗氧化活性测定 | 第49-50页 |
| 2.2.11 数理统计分析 | 第50页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第50-73页 |
| 2.3.1 黄芪毛状根诱导条件的优化 | 第50-53页 |
| 2.3.2 高产皂苷和异黄酮的黄芪毛状根株系的筛选 | 第53-55页 |
| 2.3.3 黄芪毛状根的PCR分子验证 | 第55-56页 |
| 2.3.4 高产皂苷的黄芪毛状根株系培养条件的优化 | 第56-61页 |
| 2.3.5 高产异黄酮的黄芪毛状根株系培养条件的优化 | 第61-65页 |
| 2.3.6 黄芪毛状根中皂苷和异黄酮的LC-MS/MS分析检测 | 第65-71页 |
| 2.3.7 黄芪毛状根粗提物的抗氧化活性 | 第71-72页 |
| 2.3.8 黄芪毛状根培养体系的优势 | 第72-73页 |
| 2.4 本章小结 | 第73-75页 |
| 3 茉莉酸甲酯、水杨酸和乙酰水杨酸对黄芪毛状根培养体系中皂苷和异黄酮生物合成的诱导调控 | 第75-103页 |
| 3.1 实验仪器、材料与试剂 | 第76-77页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第77-81页 |
| 3.2.1 黄芪毛状根的培养 | 第77页 |
| 3.2.2 诱导子的制备 | 第77页 |
| 3.2.3 黄芪毛状根的诱导处理过程 | 第77-78页 |
| 3.2.4 黄芪毛状根总RNA提取和cDNA制备 | 第78-79页 |
| 3.2.5 qRT-PCR分析 | 第79-81页 |
| 3.2.6 样品溶液的制备 | 第81页 |
| 3.2.7 LC-MS/MS分析检测 | 第81页 |
| 3.2.8 黄芪毛状根中抗氧化酶活性测定 | 第81页 |
| 3.2.9 黄芪毛状根粗提物的抗氧化活性 | 第81页 |
| 3.2.10 数理统计分析 | 第81页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第81-102页 |
| 3.3.1 选择合适的外源植物信号分子诱导策略 | 第81-85页 |
| 3.3.2 不同诱导子对黄芪毛状根中皂苷和异黄酮生物合成的影响 | 第85-88页 |
| 3.3.3 MJ对黄芪毛状根中皂苷和异黄酮生物合成诱导条件的优化 | 第88-89页 |
| 3.3.4 MJ对黄芪毛状根中不同皂苷和异黄酮单体成分的诱导效果 | 第89-92页 |
| 3.3.5 MJ诱导对皂苷生物合成酶基因的转录表达调控 | 第92-96页 |
| 3.3.6 MJ诱导对异黄酮生物合成酶基因的转录表达调控 | 第96-99页 |
| 3.3.7 黄芪毛状根对MJ诱导的氧化应激防御响应 | 第99-102页 |
| 3.4 本章小结 | 第102-103页 |
| 4 UV-A、UV-B和UV-C对黄芪毛状根培养体系中皂苷和异黄酮生物合成的诱导调控 | 第103-123页 |
| 4.1 实验仪器、材料与试剂 | 第104页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第104-105页 |
| 4.2.1 黄芪毛状根的培养 | 第104页 |
| 4.2.2 黄芪毛状根的UV辐射处理过程 | 第104-105页 |
| 4.2.3 黄芪毛状根总RNA提取和cDNA制备 | 第105页 |
| 4.2.4 qRT-PCR分析 | 第105页 |
| 4.2.5 样品溶液的制备 | 第105页 |
| 4.2.6 LC-MS/MS分析检测 | 第105页 |
| 4.2.7 黄芪毛状根中抗氧化酶活性测定 | 第105页 |
| 4.2.8 黄芪毛状根粗提物的抗氧化活性 | 第105页 |
| 4.2.9 数理统计分析 | 第105页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第105-121页 |
| 4.3.1 UV辐射对不同日龄的黄芪毛状根中皂苷和异黄酮生物合成的影响 | 第105-107页 |
| 4.3.2 UV辐射剂量对黄芪毛状根中皂苷和异黄酮生物合成的影响 | 第107-112页 |
| 4.3.3 UV-B对黄芪毛状根中不同皂苷和异黄酮单体成分的诱导效果 | 第112-115页 |
| 4.3.4 UV-B对皂苷生物合成酶基因的转录表达调控 | 第115-117页 |
| 4.3.5 UV-B对异黄酮生物合成酶基因的转录表达调控 | 第117-119页 |
| 4.3.6 黄芪毛状根对UV-B诱导的氧化应激响应 | 第119-121页 |
| 4.4 本章小结 | 第121-123页 |
| 5 固定化Penicillium canescens孢子脱乙酰生物转化和生物诱导双重作用促进黄芪毛状根培养体系中黄芪甲苷的富集 | 第123-139页 |
| 5.1 实验仪器、材料与试剂 | 第125页 |
| 5.2 实验方法与步骤 | 第125-127页 |
| 5.2.1 黄芪毛状根的培养 | 第125页 |
| 5.2.2 真菌P.canescens的来源 | 第125-126页 |
| 5.2.3 IPC的制备 | 第126页 |
| 5.2.4 IPC和黄芪毛状根的共培养 | 第126-127页 |
| 5.2.5 黄芪毛状根总RNA提取和cDNA制备 | 第127页 |
| 5.2.6 qRT-PCR分析 | 第127页 |
| 5.2.7 样品溶液的制备 | 第127页 |
| 5.2.8 LC-MS/MS分析检测 | 第127页 |
| 5.2.9 数理统计分析 | 第127页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第127-137页 |
| 5.3.1 IPC在黄芪毛状根培养体系中生物转化应用的可行性 | 第127-128页 |
| 5.3.2 固定化孢子量、共培养温度和pH对IPC生物转化效果的影响 | 第128-130页 |
| 5.3.3 IPC生物转化过程中不同皂苷单体成分含量变化的动力学研究 | 第130-131页 |
| 5.3.4 IPC处理对黄芪毛状根中黄芪甲苷的富集效果 | 第131-133页 |
| 5.3.5 IPC处理对皂苷生物合成酶基因的转录表达调控 | 第133-134页 |
| 5.3.6 IPC处理对黄芪毛状根中异黄酮生物合成的影响 | 第134-136页 |
| 5.3.7 IPC的稳定性和重复使用性 | 第136-137页 |
| 5.4 本章小结 | 第137-139页 |
| 结论 | 第139-142页 |
| 参考文献 | 第142-162页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第162-164页 |
| 致谢 | 第164-166页 |
| 附件 | 第166-167页 |
