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杨树转录因子ERF76基因耐盐功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 绪论第14-25页
    1.1 前言第14页
    1.2 植物应答盐胁迫机制第14-16页
        1.2.1 植物应答盐胁迫的信号转导途径第14-15页
        1.2.2 植物盐胁迫应激反应第15-16页
    1.3 植物基因启动子第16-20页
        1.3.1 植物基因启动子的结构第16-17页
        1.3.2 植物基因启动子的分类第17-19页
        1.3.3 植物基因启动子鉴定第19-20页
        1.3.4 植物基因5’端非翻译区第20页
    1.4 植物转录因子第20-22页
        1.4.1 植物转录因子的功能和结构第20-21页
        1.4.2 植物AP2/ERF家族转录因子第21页
        1.4.3 植物ERF转录因子第21-22页
    1.5 RNA测序的研究进展第22-23页
    1.6 本文主要研究内容与目的第23-24页
    1.7 本文技术路线第24-25页
2 杨树应答盐胁迫ERF转录因子家族基因分析第25-35页
    2.1 实验材料与方法第25-27页
        2.1.1 实验材料第25页
        2.1.2 实验方法第25-27页
    2.2 结果与分析第27-34页
        2.2.1 DEGs聚类分析第27-29页
        2.2.2 DEGs的GO富集分析第29-30页
        2.2.3 DEGs的Pathway分析第30页
        2.2.4 AP2/ERF家族基因表达变化分析第30-33页
        2.2.5 杨树ERF76基因盐胁迫条件下时空表达模式分析第33-34页
    2.3 本章小结第34-35页
3 小黑杨ERF76基因启动子的克隆与功能分析第35-61页
    3.1 材料与方法第35-49页
        3.1.1 实验材料第35-37页
        3.1.2 相关引物设计第37-38页
        3.1.3 ERF76基因启动子序列克隆第38-40页
        3.1.4 ERF76基因启动子载体构建及农杆菌转化第40-43页
        3.1.5 ERF76基因启动子序列分析第43页
        3.1.6 ERF76基因启动子功能验证第43-45页
        3.1.7 酵母单杂交第45-49页
    3.2 结果与分析第49-59页
        3.2.1 ERF76基因启动子片段载体构建第49-51页
        3.2.2 ERF76基因启动子序列分析第51-52页
        3.2.3 ERF76基因启动子功能验证第52-57页
        3.2.4 酵母单杂交结果分析第57-59页
    3.3 讨论第59-60页
    3.4 本章小结第60-61页
4 杨树转录因子ERF76基因属性分析第61-73页
    4.1 实验材料与方法第61-65页
        4.1.1 实验材料第61页
        4.1.2 ERF76基因克隆第61-62页
        4.1.3 ERF76序列分析第62页
        4.1.4 ERF76基因载体构建及农杆菌转化第62-63页
        4.1.5 ERF76亚细胞定位分析第63-65页
    4.2 结果与分析第65-71页
        4.2.1 杨树ERF76基因克隆第65-66页
        4.2.2 ERF76基因的植物表达载体构建第66-67页
        4.2.3 ERF76序列分析第67-70页
        4.2.4 ERF76亚细胞定位分析第70-71页
    4.3 本章小结第71-73页
5 ERF76基因过表达转基因烟草耐盐胁迫分析第73-86页
    5.1 实验材料第73-75页
        5.1.1 植物材料第73页
        5.1.2 常用培养基第73页
        5.1.3 主要试剂第73页
        5.1.4 主要溶液配制第73-75页
    5.2 试验方法第75-78页
        5.2.1 转ERF76基因烟草的培育第75-76页
        5.2.2 转基因烟草耐盐分析及形态指标的测定第76页
        5.2.3 转基因株系生理指标的测定及生化指标分析第76-78页
    5.3 结果与分析第78-84页
        5.3.1 转基因烟草鉴定第78-80页
        5.3.2 转基因烟草耐盐能力分析第80-81页
        5.3.3 转基因烟草形态指标测定第81-82页
        5.3.4 转基因烟草生理和生化指标测定第82-84页
    5.4 讨论第84-85页
    5.5 本章小结第85-86页
6 ERF76基因过表达转基因杨树耐盐胁迫分析第86-101页
    6.1 实验材料第86页
        6.1.1 植物材料第86页
        6.1.2 常用培养基第86页
        6.1.3 主要试剂及溶液配制第86页
    6.2 试验方法第86-89页
        6.2.1 转ERF76基因杨树的培育第86-87页
        6.2.2 转基因杨树耐盐测试及形态指标的测定第87页
        6.2.3 转基因杨树ABA和GA相对含量的测定第87-88页
        6.2.4 转基因杨树生理指标的测定第88页
        6.2.5 实时荧光定量PCR检测第88-89页
    6.3 结果与分析第89-99页
        6.3.1 转基因杨树的鉴定第89-92页
        6.3.2 转基因杨树耐盐能力检测第92-94页
        6.3.3 转基因杨树形态指标测定第94-95页
        6.3.4 转基因杨树ABA和GA相对含量测定第95-96页
        6.3.5 转基因杨树生理指标测定第96-97页
        6.3.6 RT-PCR检测第97-99页
    6.4 讨论第99-100页
    6.5 本章小结第100-101页
7 转基因杨树RNA测序分析第101-110页
    7.1 实验材料与方法第101页
        7.1.1 实验材料第101页
        7.1.2 RNA测序数据处理与分析方法第101页
        7.1.3 RT-qPCR检测第101页
    7.2 结果与分析第101-108页
        7.2.1 不同样本间DEGs分析第101-105页
        7.2.2 DEGs功能分析第105-108页
        7.2.3 RT-qPCR第108页
    7.3 讨论第108-109页
    7.4 本章小结第109-110页
讨论第110-113页
结论第113-114页
参考文献第114-124页
附录第124-129页
攻读学位期间发表的学术论文第129-130页
致谢第130-132页
附件第132-133页

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