摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 绪论 | 第14-25页 |
1.1 前言 | 第14页 |
1.2 植物应答盐胁迫机制 | 第14-16页 |
1.2.1 植物应答盐胁迫的信号转导途径 | 第14-15页 |
1.2.2 植物盐胁迫应激反应 | 第15-16页 |
1.3 植物基因启动子 | 第16-20页 |
1.3.1 植物基因启动子的结构 | 第16-17页 |
1.3.2 植物基因启动子的分类 | 第17-19页 |
1.3.3 植物基因启动子鉴定 | 第19-20页 |
1.3.4 植物基因5’端非翻译区 | 第20页 |
1.4 植物转录因子 | 第20-22页 |
1.4.1 植物转录因子的功能和结构 | 第20-21页 |
1.4.2 植物AP2/ERF家族转录因子 | 第21页 |
1.4.3 植物ERF转录因子 | 第21-22页 |
1.5 RNA测序的研究进展 | 第22-23页 |
1.6 本文主要研究内容与目的 | 第23-24页 |
1.7 本文技术路线 | 第24-25页 |
2 杨树应答盐胁迫ERF转录因子家族基因分析 | 第25-35页 |
2.1 实验材料与方法 | 第25-27页 |
2.1.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.2 实验方法 | 第25-27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-34页 |
2.2.1 DEGs聚类分析 | 第27-29页 |
2.2.2 DEGs的GO富集分析 | 第29-30页 |
2.2.3 DEGs的Pathway分析 | 第30页 |
2.2.4 AP2/ERF家族基因表达变化分析 | 第30-33页 |
2.2.5 杨树ERF76基因盐胁迫条件下时空表达模式分析 | 第33-34页 |
2.3 本章小结 | 第34-35页 |
3 小黑杨ERF76基因启动子的克隆与功能分析 | 第35-61页 |
3.1 材料与方法 | 第35-49页 |
3.1.1 实验材料 | 第35-37页 |
3.1.2 相关引物设计 | 第37-38页 |
3.1.3 ERF76基因启动子序列克隆 | 第38-40页 |
3.1.4 ERF76基因启动子载体构建及农杆菌转化 | 第40-43页 |
3.1.5 ERF76基因启动子序列分析 | 第43页 |
3.1.6 ERF76基因启动子功能验证 | 第43-45页 |
3.1.7 酵母单杂交 | 第45-49页 |
3.2 结果与分析 | 第49-59页 |
3.2.1 ERF76基因启动子片段载体构建 | 第49-51页 |
3.2.2 ERF76基因启动子序列分析 | 第51-52页 |
3.2.3 ERF76基因启动子功能验证 | 第52-57页 |
3.2.4 酵母单杂交结果分析 | 第57-59页 |
3.3 讨论 | 第59-60页 |
3.4 本章小结 | 第60-61页 |
4 杨树转录因子ERF76基因属性分析 | 第61-73页 |
4.1 实验材料与方法 | 第61-65页 |
4.1.1 实验材料 | 第61页 |
4.1.2 ERF76基因克隆 | 第61-62页 |
4.1.3 ERF76序列分析 | 第62页 |
4.1.4 ERF76基因载体构建及农杆菌转化 | 第62-63页 |
4.1.5 ERF76亚细胞定位分析 | 第63-65页 |
4.2 结果与分析 | 第65-71页 |
4.2.1 杨树ERF76基因克隆 | 第65-66页 |
4.2.2 ERF76基因的植物表达载体构建 | 第66-67页 |
4.2.3 ERF76序列分析 | 第67-70页 |
4.2.4 ERF76亚细胞定位分析 | 第70-71页 |
4.3 本章小结 | 第71-73页 |
5 ERF76基因过表达转基因烟草耐盐胁迫分析 | 第73-86页 |
5.1 实验材料 | 第73-75页 |
5.1.1 植物材料 | 第73页 |
5.1.2 常用培养基 | 第73页 |
5.1.3 主要试剂 | 第73页 |
5.1.4 主要溶液配制 | 第73-75页 |
5.2 试验方法 | 第75-78页 |
5.2.1 转ERF76基因烟草的培育 | 第75-76页 |
5.2.2 转基因烟草耐盐分析及形态指标的测定 | 第76页 |
5.2.3 转基因株系生理指标的测定及生化指标分析 | 第76-78页 |
5.3 结果与分析 | 第78-84页 |
5.3.1 转基因烟草鉴定 | 第78-80页 |
5.3.2 转基因烟草耐盐能力分析 | 第80-81页 |
5.3.3 转基因烟草形态指标测定 | 第81-82页 |
5.3.4 转基因烟草生理和生化指标测定 | 第82-84页 |
5.4 讨论 | 第84-85页 |
5.5 本章小结 | 第85-86页 |
6 ERF76基因过表达转基因杨树耐盐胁迫分析 | 第86-101页 |
6.1 实验材料 | 第86页 |
6.1.1 植物材料 | 第86页 |
6.1.2 常用培养基 | 第86页 |
6.1.3 主要试剂及溶液配制 | 第86页 |
6.2 试验方法 | 第86-89页 |
6.2.1 转ERF76基因杨树的培育 | 第86-87页 |
6.2.2 转基因杨树耐盐测试及形态指标的测定 | 第87页 |
6.2.3 转基因杨树ABA和GA相对含量的测定 | 第87-88页 |
6.2.4 转基因杨树生理指标的测定 | 第88页 |
6.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第88-89页 |
6.3 结果与分析 | 第89-99页 |
6.3.1 转基因杨树的鉴定 | 第89-92页 |
6.3.2 转基因杨树耐盐能力检测 | 第92-94页 |
6.3.3 转基因杨树形态指标测定 | 第94-95页 |
6.3.4 转基因杨树ABA和GA相对含量测定 | 第95-96页 |
6.3.5 转基因杨树生理指标测定 | 第96-97页 |
6.3.6 RT-PCR检测 | 第97-99页 |
6.4 讨论 | 第99-100页 |
6.5 本章小结 | 第100-101页 |
7 转基因杨树RNA测序分析 | 第101-110页 |
7.1 实验材料与方法 | 第101页 |
7.1.1 实验材料 | 第101页 |
7.1.2 RNA测序数据处理与分析方法 | 第101页 |
7.1.3 RT-qPCR检测 | 第101页 |
7.2 结果与分析 | 第101-108页 |
7.2.1 不同样本间DEGs分析 | 第101-105页 |
7.2.2 DEGs功能分析 | 第105-108页 |
7.2.3 RT-qPCR | 第108页 |
7.3 讨论 | 第108-109页 |
7.4 本章小结 | 第109-110页 |
讨论 | 第110-113页 |
结论 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-124页 |
附录 | 第124-129页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第129-130页 |
致谢 | 第130-132页 |
附件 | 第132-133页 |