摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第13-25页 |
1.1 引言 | 第13-21页 |
1.1.1 光周期途径 | 第13-16页 |
1.1.2 春化途径 | 第16-18页 |
1.1.3 赤霉素途径 | 第18-20页 |
1.1.4 自主途径 | 第20-21页 |
1.2 FLC与SVP简介 | 第21-23页 |
1.2.1 FLC | 第21-22页 |
1.2.2 SVP | 第22-23页 |
1.3 研究目的及意义 | 第23-24页 |
1.4 技术路线 | 第24-25页 |
2 白桦BpFLC的功能分析 | 第25-54页 |
2.1 材料与方法 | 第25-35页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 BpFLC的应答检测 | 第25-27页 |
2.1.3 BpFLC启动子的功能验证 | 第27-33页 |
2.1.4 拟南芥flc突变体的功能恢复验证 | 第33-35页 |
2.1.5 BpFLC在拟南芥中的过表达验证 | 第35页 |
2.2 结果与分析 | 第35-52页 |
2.2.1 白桦BpFLC在不同组织对春化的应答分析 | 第35页 |
2.2.2 白桦BpFLC随全年温度变化的表达分析 | 第35-36页 |
2.2.3 白桦BpFLC启动子的功能分析 | 第36-45页 |
2.2.4 BpFLC恢复拟南芥flc突变体的功能验证 | 第45-49页 |
2.2.5 BpFLC在拟南芥中的异源表达分析 | 第49-52页 |
2.3 本章小结 | 第52-54页 |
3 白桦BpFLC转拟南芥晚花植株的转录组分析 | 第54-75页 |
3.1 材料与方法 | 第54-56页 |
3.1.1 植物材料 | 第54页 |
3.1.2 样品处理与收集 | 第54页 |
3.1.3 样品总RNA提取及质量检测 | 第54页 |
3.1.4 cDNA文库构建与上机测序 | 第54页 |
3.1.5 样品测序与数据分析 | 第54-55页 |
3.1.6 qRT-PCR验证 | 第55-56页 |
3.2 结果与分析 | 第56-73页 |
3.2.1 RNA提取与质量分析 | 第56页 |
3.2.2 测序数据质量评估 | 第56-60页 |
3.2.3 转基因植株的差异基因分析 | 第60-61页 |
3.2.4 no-flowering组差异基因的GO富集 | 第61-67页 |
3.2.5 flowering组差异基因的GO富集 | 第67-73页 |
3.2.6 实时荧光定量验证相关基因的表达 | 第73页 |
3.3 本章小结 | 第73-75页 |
4 白桦BpSVP基因的克隆及功能分析 | 第75-102页 |
4.1 材料与方法 | 第75-79页 |
4.1.1 植物材料 | 第75页 |
4.1.2 BpSVP基因的生物信息学预测 | 第75页 |
4.1.3 BpSVP的组织特异性与应答检测 | 第75-76页 |
4.1.4 BpSVP的亚细胞定位 | 第76-77页 |
4.1.5 BpSVP启动子功能验证 | 第77页 |
4.1.6 BpSVP在拟南芥中的过表达验证 | 第77-79页 |
4.2 结果与分析 | 第79-100页 |
4.2.1 白桦BpSVP基因的生物信息学分析 | 第79-80页 |
4.2.2 白桦BpSVP在不同年份不同组织中的表达分析 | 第80-82页 |
4.2.3 白桦BpSVP对春化的应答分析 | 第82-83页 |
4.2.4 白桦BpSVP对光照的应答分析 | 第83页 |
4.2.5 白桦BpSVP随全年日照变化的表达分析 | 第83-84页 |
4.2.6 白桦BpSVP基因的亚细胞定位分析 | 第84-86页 |
4.2.7 白桦BpSVP启动子的功能分析 | 第86-92页 |
4.2.8 BpSVP在拟南芥中的异源表达分析 | 第92-100页 |
4.3 本章小结 | 第100-102页 |
5 白桦BpFLC与BpSVP的蛋白互作分析 | 第102-120页 |
5.1 材料与方法 | 第102-107页 |
5.1.1 实验材料 | 第102页 |
5.1.2 酵母Bait载体的构建 | 第102-103页 |
5.1.3 酵母Prey载体的构建 | 第103页 |
5.1.4 自激活检测 | 第103-104页 |
5.1.5 毒性检测 | 第104页 |
5.1.6 BpFLC和BpSVP的蛋白互作验证 | 第104-105页 |
5.1.7 BpFLC截短体的构建 | 第105页 |
5.1.8 BpSVP截短体的构建 | 第105-106页 |
5.1.9 BpFLC和BpSVP的蛋白同源互作域验证 | 第106页 |
5.1.10 BpFLC和BpSVP的蛋白异源互作域验证 | 第106页 |
5.1.11 BpFLC和AtFLC、AtSVP的蛋白互作验证 | 第106-107页 |
5.2 结果与分析 | 第107-119页 |
5.2.1 酵母Bait载体pGBKT7-BpFLC和pGBKT7-BpSVP的构建 | 第107页 |
5.2.2 酵母Prey载体pGADT7-BpFLC和pGADT7-BpSVP的构建 | 第107-108页 |
5.2.3 酵母载体pGBKT7-BpFLC和pGBKT7-BpSVP的自激活验证 | 第108页 |
5.2.4 酵母载体pGBKT7-BpFLC和pGBKT7-BpSVP的毒性验证 | 第108-109页 |
5.2.5 BpFLC和BpSVP的蛋白互作验证 | 第109-110页 |
5.2.6 酵母Bait载体pGBKT7-BpFLC1-6的构建 | 第110-111页 |
5.2.7 酵母Prey载体pGADT7-BpSVP1-6的构建 | 第111-112页 |
5.2.8 BpFLC和BpSVP的蛋白同源互作域验证 | 第112-114页 |
5.2.9 BpFLC和BpSVP的蛋白异源互作域验证 | 第114-117页 |
5.2.10 酵母Bait载体pGBKT7-AtFLC和pGBKT7-AtSVP的构建 | 第117页 |
5.2.11 BpFLC和AtFLC、AtSVP的蛋白互作验证 | 第117-119页 |
5.3 本章小结 | 第119-120页 |
6 讨论与结论 | 第120-127页 |
6.1 讨论 | 第120-125页 |
6.1.1 BpFLC参与春化途径调控植物开花 | 第120-121页 |
6.1.2 BpSVP参与光周期途径调控植物开花 | 第121-122页 |
6.1.3 SVP与FLC互作对开花时间和基因表达的影响 | 第122-124页 |
6.1.4 FLC和SVP在进化上的关系 | 第124页 |
6.1.5 多年生植物对冬季低温的响应 | 第124-125页 |
6.2 结论 | 第125-126页 |
6.3 工作展望 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-142页 |
附录 | 第142-147页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第147-148页 |
致谢 | 第148-151页 |
附件 | 第151-152页 |