摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第11-28页 |
1.1 microRNA | 第11-14页 |
1.1.1 miRNA的发现历程 | 第11页 |
1.1.2 miRNA的主要特征 | 第11-12页 |
1.1.3 miRNA的发生与生物活性 | 第12-13页 |
1.1.4 miRNA的生物学功能 | 第13-14页 |
1.1.5 miRNA的研究进展 | 第14页 |
1.2 果蝇的免疫 | 第14-20页 |
1.2.1 果蝇免疫概况 | 第14-15页 |
1.2.2 果蝇的细胞免疫 | 第15-16页 |
1.2.3 果蝇的体液免疫 | 第16-19页 |
1.2.4 果蝇体液免疫的模式识别受体 | 第19-20页 |
1.3. miRNA与果蝇免疫 | 第20-22页 |
1.4 GAL4-UAS体系与果蝇免疫 | 第22-25页 |
1.4.1 GAL4-UAS体系的简介 | 第22-24页 |
1.4.2 GAL4-UAS系统的应用及常用的GAL4 | 第24-25页 |
1.5 本论文研究意义及创新 | 第25-27页 |
1.6 技术路线 | 第27-28页 |
1.6.1 黑腹果蝇GAL4-UAS高表达miRNA果蝇体系的构建及免疫miRNA的筛选 | 第27-28页 |
第二章 构建UAS-GAL4果蝇体系的探索 | 第28-39页 |
2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第28-29页 |
2.1.1 果蝇的获得、培养与杂交 | 第28-29页 |
2.1.2 实验试剂和仪器 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-34页 |
2.2.1 UAS-miRNA/Gal4果蝇体系的构建 | 第29-32页 |
2.2.2 果蝇miRNA的提取与实时荧光定量PCR | 第32-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-38页 |
2.3.1 基因型为UAS-miRNA的果蝇与不同Gal4果蝇株杂交情况 | 第34-35页 |
2.3.2 基因型为UAS-miRNA的果蝇与ppl-Gal4的果蝇杂交子代定量检测 | 第35-36页 |
2.3.3 基因型为UAS-miRNA的果蝇与基因型为+/Tub-Gal80ts;+/Tub-Gal4的果蝇杂交子代定量检测 | 第36-38页 |
2.4 讨论 | 第38-39页 |
第三章 Tub-Gal80ts;UAS-miRNA/Tub-Gal4系统的验证 | 第39-46页 |
3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第39-40页 |
3.1.1 实验材料 | 第39页 |
3.1.2 实验试剂与仪器 | 第39-40页 |
3.2 实验方法 | 第40-42页 |
3.2.1 高表达miR-8和miR-let-7果蝇株的构建 | 第40-41页 |
3.2.2. 果蝇RNA的提取与实时荧光定量PCR | 第41-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-45页 |
3.3.1 miRNA的实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
3.3.2 Drosomycin和Dptericin的实时荧光定量PCR | 第43-45页 |
3.4 讨论 | 第45-46页 |
第四章 生物信息学预测免疫相关的miRNAs | 第46-51页 |
4.1 实验仪器及生物软件 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-47页 |
4.2.1 果蝇miRNA的靶基因预测 | 第46-47页 |
4.3 结果与分析 | 第47-49页 |
4.3.1 预测结果初步分析 | 第47页 |
4.3.2 miRNA与靶标关系 | 第47页 |
4.3.3 筛选可能与免疫相关的miRNA | 第47-49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
第五章 预测的免疫miRNA的初步验证 | 第51-58页 |
5.1 实验材料、试剂与仪器 | 第51-52页 |
5.1.1 实验材料 | 第51页 |
5.1.2 实验试剂与仪器 | 第51-52页 |
5.2 实验方法 | 第52-53页 |
5.2.1 高表达miRNA果蝇株的构建 | 第52页 |
5.2.2 果蝇RNA的提取与实时荧光定量PCR | 第52-53页 |
5.3 结果与分析 | 第53-56页 |
5.3.1 miRNA的实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
5.3.2 Drosomycin和Diptericin的实时荧光定量PCR | 第54-56页 |
5.4 讨论 | 第56-58页 |
总结与展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
附录 | 第70-82页 |
在读期间发表的学术论文及研究成就 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |