| 符号说明 | 第5-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 1 引言 | 第15-22页 |
| 1.1 ALV-A病原学 | 第15-16页 |
| 1.2 ALV-A流行病学 | 第16-17页 |
| 1.3 ALV-A致病性 | 第17-18页 |
| 1.4 ALV-A的诊断检测方法 | 第18-21页 |
| 1.4.1 病毒分离和鉴定 | 第18-19页 |
| 1.4.2 血清学检测方法 | 第19-20页 |
| 1.4.2.1 琼脂扩散试验 | 第19页 |
| 1.4.2.2 病毒中和试验 | 第19页 |
| 1.4.2.3 ELISA法 | 第19-20页 |
| 1.4.2.4 IFA法 | 第20页 |
| 1.4.3 分子生物学法 | 第20-21页 |
| 1.5 ALV-A的防治现状 | 第21页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 病毒和细胞来源 | 第22页 |
| 2.1.2 菌种和载体质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.6 实验地点 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 山东地方鸡肿瘤样品中ALV-A的分离鉴定和变异分析 | 第23-27页 |
| 2.2.1.1 病料及处理 | 第23-24页 |
| 2.2.1.2 引物设计与合成 | 第24-26页 |
| 2.2.1.3 病理组织学观察 | 第26页 |
| 2.2.1.4 组织PCR鉴定 | 第26页 |
| 2.2.1.5 组织IFA检测 | 第26页 |
| 2.2.1.6 病毒分离与检测 | 第26-27页 |
| 2.2.1.7 病毒全基因序列的扩增、克隆与测序 | 第27页 |
| 2.2.1.8 病毒全基因序列的分析 | 第27页 |
| 2.2.2 ALV-A对鸡、鹌鹑和鸽子的致病性比较 | 第27-29页 |
| 2.2.2.1 病毒培养及病毒滴度的测定 | 第27页 |
| 2.2.2.2 试验设计 | 第27-28页 |
| 2.2.2.3 检测指标 | 第28-29页 |
| 2.2.2.3.1 病毒血症 | 第28页 |
| 2.2.2.3.2 泄殖腔棉拭子p27检测 | 第28页 |
| 2.2.2.3.3 组织中病毒IFA检测 | 第28页 |
| 2.2.2.3.4 病理学组织检查 | 第28页 |
| 2.2.2.3.5 数据处理 | 第28-29页 |
| 2.2.3 ALV-A亚单位疫苗接种种鸡和种鹌鹑对后代免疫保护效果的观察 | 第29-34页 |
| 2.2.3.1 A亚群gp85重组蛋白的表达 | 第29-31页 |
| 2.2.3.2 A亚群gp85重组蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.3.3 gp85重组蛋白对鹌鹑和鸡免疫保护性试验 | 第32-34页 |
| 2.2.3.3.1 动物试验设计 | 第32页 |
| 2.2.3.3.2 免疫原的制备 | 第32页 |
| 2.2.3.3.3 检测指标 | 第32-34页 |
| 2.2.3.3.3.1 血清抗体的动态监测 | 第32-33页 |
| 2.2.3.3.3.2 攻毒后的病毒血症检测 | 第33页 |
| 2.2.3.3.3.3 泄殖腔棉拭子p27检测 | 第33页 |
| 2.2.3.3.3.4 攻毒后雏鹌鹑和鸡只致病性与死亡率的检测 | 第33页 |
| 2.2.3.3.3.5 攻毒后的健康指标和致病性的检测 | 第33页 |
| 2.2.3.3.3.6 鹌鹑血清与ALV-A SDAU09C1毒株体外中和试验 | 第33-34页 |
| 2.2.3.3.3.7 数据处理 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-56页 |
| 3.1 山东地方鸡肿瘤样品中ALV-A的分离鉴定及变异分析 | 第34-44页 |
| 3.1.1 病理组织学观察 | 第34页 |
| 3.1.2 PCR鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.1.3 组织IFA结果 | 第35-36页 |
| 3.1.4 病毒全基因PCR结果 | 第36页 |
| 3.1.5 病毒全基因序列的分析 | 第36-44页 |
| 3.2 ALV-A对鸡、鹌鹑和鸽子的致病性比较 | 第44-50页 |
| 3.2.1 雏鹌鹑病毒血症与泄殖腔排毒变化 | 第44-46页 |
| 3.2.2 鸽子、鹌鹑与鸡病毒血症变化 | 第46-47页 |
| 3.2.3 鸽子、鹌鹑与鸡泄殖腔排毒的动态变化 | 第47-48页 |
| 3.2.4 组织IFA检测 | 第48-49页 |
| 3.2.5 组织病理学检测 | 第49-50页 |
| 3.3 ALV-A亚单位疫苗接种种鸡和种鹌鹑对后代免疫保护效果的观察 | 第50-56页 |
| 3.3.1 gp85蛋白的诱导表达、纯化及鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3.2 gp85重组蛋白对鸡和鹌鹑免疫保护性试验 | 第51-56页 |
| 3.3.2.1 免疫接种后鹌鹑和鸡只血清抗体的动态变化 | 第51-52页 |
| 3.3.2.2 重组蛋白诱导鹌鹑和鸡只产生阳性抗体比例的变化 | 第52页 |
| 3.3.2.3 雏鸡和雏鹌鹑攻毒后病毒血症变化 | 第52-54页 |
| 3.3.2.4 鹌鹑血清抗体与ALV-A SDAU09C1毒株体外中和试验 | 第54-55页 |
| 3.3.2.5 攻毒后健康状况检测 | 第55页 |
| 3.3.2.6 疫苗安全性评估 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-61页 |
| 4.1 山东地方鸡肿瘤样品中ALV-A的分离鉴定和变异分析 | 第56-58页 |
| 4.2 ALV-A对鸡、鹌鹑和鸽子的致病性比较 | 第58-59页 |
| 4.3 ALV-A亚单位疫苗接种种鸡和种鹌鹑对后代免疫保护效果的观察 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61页 |
| 6 创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第73页 |
