| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-24页 |
| 1.1 坦布苏病毒概述 | 第13-14页 |
| 1.2 鸭坦布苏病毒的形态结构 | 第14-16页 |
| 1.3 坦布苏病毒在细胞内的复制 | 第16-17页 |
| 1.4 坦布苏病毒的培养特性 | 第17页 |
| 1.5 坦布苏病毒的流行病学 | 第17页 |
| 1.6 坦布苏病毒病的临床症状和剖检变化 | 第17-18页 |
| 1.6.1 坦布苏病毒病的临床症状 | 第17-18页 |
| 1.6.2 坦布苏病毒病的剖检变化 | 第18页 |
| 1.7 坦布苏病毒病的组织病理学变化 | 第18页 |
| 1.8 鸭坦布苏病毒的诊断 | 第18-23页 |
| 1.8.1 病毒分离鉴定 | 第19页 |
| 1.8.2 血清学检测 | 第19-20页 |
| 1.8.3 分子生物学诊断方法 | 第20-23页 |
| 1.8.3.1 RT-PCR | 第20页 |
| 1.8.3.2 套式RT-PCR | 第20-21页 |
| 1.8.3.3 实时荧光定量PCR方法 | 第21页 |
| 1.8.3.4 RT-LAMP | 第21页 |
| 1.8.3.5 核酸探针 | 第21-22页 |
| 1.8.3.6 电镜法 | 第22-23页 |
| 1.9 鸭坦布苏病毒的综合防控 | 第23页 |
| 1.10 本研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-37页 |
| 2.1 实验地点 | 第24页 |
| 2.2 实验动物 | 第24页 |
| 2.3 病毒 | 第24页 |
| 2.4 细胞 | 第24页 |
| 2.5 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.6 方法 | 第25-36页 |
| 2.6.1 CEF的制备 | 第25-26页 |
| 2.6.2 病毒的增殖 | 第26页 |
| 2.6.3 病毒TCID50的测定 | 第26页 |
| 2.6.4 动物模型的建立 | 第26-27页 |
| 2.6.5 临床症状及剖检病变观察 | 第27页 |
| 2.6.6 病理组织学观察 | 第27-28页 |
| 2.6.7 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.6.8 各组织病毒含量检测 | 第29-30页 |
| 2.6.8.1 病毒RNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.6.9 DTMUV检测引物的合成和检测 | 第30页 |
| 2.6.9.1 引物的合成： | 第30页 |
| 2.6.9.2 DTMUV RNA的RT-PCR检测 | 第30页 |
| 2.6.10 荧光定量RT-PCR检测组织病毒含量 | 第30页 |
| 2.6.10.1 DTMUV E基因和组织内参基因GAPDH的引物设计 | 第30页 |
| 2.6.11 标准品阳性质粒的制备 | 第30-31页 |
| 2.6.12 RT-PCR产物的回收纯化 | 第31-32页 |
| 2.6.13 PCR产物的连接 | 第32页 |
| 2.6.14 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第32-33页 |
| 2.6.15 重组质粒的转化 | 第33页 |
| 2.6.16 质粒DNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.6.17 重组质粒的双酶切鉴定和测序分析 | 第34页 |
| 2.6.18 荧光定量RT-PCR标准曲线的建立 | 第34-35页 |
| 2.6.19 实验采集样品的检测 | 第35-36页 |
| 2.7 血清中和抗体的检测 | 第36-37页 |
| 2.8 血清中IFN-γ和IL-2 的检测 | 第37页 |
| 2.9 数据处理及分析 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-44页 |
| 3.1 临床症状及剖检病变 | 第37-39页 |
| 3.2 病理组织学变化 | 第39-41页 |
| 3.3 中和抗体检测结果 | 第41-42页 |
| 3.4 血清中IFN-γ和IL-2 的检测结果 | 第42-43页 |
| 3.5 不同日龄鸭各组织病毒的检测结果 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 4.1 坦布苏病毒对不同日龄鸭的临床症状、剖检病变的比较 | 第45页 |
| 4.2 坦布苏病毒对不同日龄鸭组织病理学病变比较 | 第45-46页 |
| 4.3 坦布苏病毒在不同日龄鸭组织中病毒含量比较 | 第46-47页 |
| 4.4 坦布苏病毒接种不同日龄鸭后血清中和抗体的比较 | 第47页 |
| 4.5 坦布苏病毒接种不同日龄鸭血清IFN-γ和IL-2 含量比较 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 6 参考文献 | 第49-57页 |
| 7 附录 | 第57-58页 |
| 8 致谢 | 第58-60页 |
| 9 攻读学位期间发表的目录及对应章节 | 第60页 |
