| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 第一章 疟疾研究进展 | 第14-43页 |
| 1.1 疟疾 | 第14-16页 |
| 1.2 疟原虫生活史 | 第16-17页 |
| 1.3 疟原虫基因组概况 | 第17-18页 |
| 1.4 疟原虫结构 | 第18-23页 |
| 1.4.1 顶体 | 第19-21页 |
| 1.4.2 线粒体 | 第21-23页 |
| 1.5 硫辛酸(LA) | 第23-31页 |
| 1.5.1 硫辛酸的抗氧化功能 | 第24页 |
| 1.5.2 硫辛酸作为多酶复合物的重要辅因子 | 第24-27页 |
| 1.5.3 硫辛酸代谢 | 第27-29页 |
| 1.5.4 顶复门生物硫辛酸代谢 | 第29-31页 |
| 1.6 己糖转运体1(Hexose Transporter 1) | 第31-32页 |
| 1.7 鼠疟P.berghei基因打靶技术研究进展 | 第32-37页 |
| 1.7.1 条件性基因敲除技术在顶体微生物的应用 | 第33-34页 |
| 1.7.2 位点特异性重组酶系统(Cre/loxP或者Flp/FRT系统) | 第34-35页 |
| 1.7.3 蛋白稳定性调控系统(Dead domain FKBP系统) | 第35-36页 |
| 1.7.4 四环素诱导调控系统 | 第36-37页 |
| 1.8 疟疾免疫学与疟疾疫苗 | 第37-41页 |
| 1.8.1 减毒疟原虫是疟疾疫苗研发的"金标准" | 第40页 |
| 1.8.2 转基因全虫疫苗是一种新的疫苗策略 | 第40-41页 |
| 1.9 结语 | 第41-43页 |
| 第二章 条件性敲除系统的建立及全虫疟疾疫苗的研究 | 第43-85页 |
| 2.1 引言 | 第43-44页 |
| 2.2 实验材料 | 第44-46页 |
| 2.3 实验引物及2A序列 | 第46-47页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第47页 |
| 2.5 溶液配制 | 第47-48页 |
| 2.6 实验方法 | 第48-67页 |
| 2.7 实验结果 | 第67-80页 |
| 2.7.1 0.2mg/ml ATc饮用水是小鼠最佳给药方式 | 第67页 |
| 2.7.2 获得CTL质粒及pATcon45-GFP质粒转染的转基因疟原虫 | 第67-69页 |
| 2.7.3 5'Race和巢氏PCR方法确定转录起始位点 | 第69-71页 |
| 2.7.4 在-184和-163位点同时插入TetO,ATc的调控效率最高 | 第71-72页 |
| 2.7.5 成功获得稳定表达GFP的GFP-cKO转基因疟原虫单克隆 | 第72-73页 |
| 2.7.6 成功获得受ATc调控的HT1-cKO转基因疟原虫克隆A8 | 第73-74页 |
| 2.7.7 转基因疟原虫克隆A8的基因型鉴定 | 第74-75页 |
| 2.7.8 转基因疟原虫克隆A8的表型鉴定及基因功能研究 | 第75-77页 |
| 2.7.9 转基因疟原虫克隆A8的小鼠体内生长存活率及作为全虫疟疾疫苗研究 | 第77-79页 |
| 2.7.10 Tet-on系统在疟原虫基因组上是遗传稳定的 | 第79-80页 |
| 2.8 讨论与结论 | 第80-85页 |
| 第三章 红内期P.berghei线粒体硫辛酸拯救代偿途径 | 第85-98页 |
| 3.1 引言 | 第85-86页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第86页 |
| 3.3 实验所用引物及2A序列 | 第86-87页 |
| 3.4 实验方法 | 第87-88页 |
| 3.5 实验结果 | 第88-94页 |
| 3.5.1 构建条件性基因敲除质粒pATcon-LplA1-cKO及对照质粒pCTL-LplA1 | 第88-89页 |
| 3.5.2 LplA1-cKO单克隆基因型鉴定 | 第89-91页 |
| 3.5.3 LplA1-cKO转基因疟原虫表型鉴定 | 第91-93页 |
| 3.5.4 LplA2补偿LplA1基因功能的丢失 | 第93-94页 |
| 3.6 讨论与结论 | 第94-98页 |
| 第四章 夏氏疟原虫P.chabaudi建立条件性基因敲除系统 | 第98-104页 |
| 4.1 引言 | 第98页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第98-99页 |
| 4.2.1 载体构建 | 第98-99页 |
| 4.2.2 实验引物 | 第99页 |
| 4.3 实验结果 | 第99-102页 |
| 4.3.1 体外培养,成功获得红内期P.chabaudi裂殖体期疟原虫 | 第99-100页 |
| 4.3.2 构建HT1、Rab11A、TrxR条件性基因敲除质粒 | 第100页 |
| 4.3.3 获得耐药转基因疟原虫 | 第100-101页 |
| 4.3.4 转基因P.chabaudi单克隆化策略探索 | 第101-102页 |
| 4.4 讨论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-115页 |
| 附录 | 第115-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第121页 |
