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叶绿体AtRabF1蛋白耐盐胁迫和衰老及体外吸收磷脂酰胆碱的机理研究

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略词第15-17页
第一部分 文献综述第17-41页
    第一章 植物Rab蛋白和脂质转运研究进展第17-41页
        1 植物Rab蛋白第17-30页
            1.1 Rab类小G蛋白第18-19页
            1.2 植物Rab小G蛋白结构特点第19-20页
            1.3 Rab蛋白的作用机制第20-21页
            1.4 Rab蛋白在植物体内的功能第21-30页
                1.4.1 Rab蛋白调节的囊泡转运功能第22-23页
                1.4.2 Rab蛋白调节不同细胞器之间的囊泡转运第23-27页
                1.4.3 Rab蛋白调控非生物和生物胁迫第27-28页
                1.4.4 Rab蛋白参与生长发育第28-30页
        2 基于叶绿素荧光对植物逆境下光合系统(PSⅡ)的研究第30-33页
            2.1 温度胁迫对植物PSⅡ的影响第31页
            2.2 光照胁迫对植物PSⅡ的影响第31-32页
            2.3 盐胁迫对植物PSⅡ的影响第32-33页
            2.4 干旱胁迫对植物PSⅡ的影响第33页
        3 脂质在内质网和叶绿体间的转运模式研究第33-39页
            3.1 叶绿体膜系统组成第33-34页
            3.2 叶绿体脂质组成第34页
            3.3 脂质在叶绿体上的合成第34-36页
            3.4 内质网至叶绿体的脂质转运机制第36-39页
                3.4.1 单体扩散第36-37页
                3.4.2 囊泡转运第37-38页
                3.4.3 内质网-叶绿体膜接触点第38-39页
        4 本研究的目的和意义第39-41页
第二部分 研究报告第41-107页
    第一章 叶绿体AtRabF1抗盐胁迫和衰老的机理第41-91页
        1 材料和方法第42-55页
            1.1 植物材料第42页
            1.2 幼苗培养第42页
            1.3 叶片基因组DNA提取第42-43页
            1.4 总RNA提取第43-44页
            1.5 cDNA第一链的合成第44页
            1.6 拟南芥总蛋白提取第44页
            1.7 蛋白质浓度测定第44-45页
            1.8 Western blot反应第45-46页
            1.9 AtRabF1及其点突变克隆第46-48页
                1.9.1 AtRabF1入门载体构建第46-47页
                1.9.2 AtRabF1点突变载体构建第47页
                1.9.3 目的载体构建第47-48页
            1.10 拟南芥转基因植株的转化第48-50页
                1.10.1 目的质粒的农杆菌转化第48-49页
                1.10.2 拟南芥转化第49-50页
            1.11 叶绿体分离第50-51页
            1.12 叶绿体各组分分离第51-52页
            1.13 叶绿素含量测定第52-53页
            1.14 脯氨酸含量测定第53页
            1.15 拟南芥幼苗盐胁迫和ABA处理第53-54页
            1.16 暗诱导衰老和电导率测定第54页
                1.16.1 暗诱导衰老后叶绿素测定第54页
                1.16.2 暗诱导后的电导率测定第54页
            1.17 拟南芥叶绿素荧光测定第54-55页
            1.18 荧光数据处理第55页
        2 结果与分析第55-82页
            2.1 AtRabF1突变体的分子鉴定和表型观察第55-57页
                2.1.1 AtRabF1突变体分子鉴定第55-56页
                2.1.2 AtRabF1突变体表型观察第56-57页
            2.2 AtRabF1的亚细胞定位第57-61页
                2.2.1 AtRabF1蛋白亚细胞定位第58-59页
                2.2.2 AtRabF1定点突变蛋白定位分析第59-61页
            2.3 AtRabF1耐盐性分析第61-64页
                2.3.1 过表达转基因株系耐盐性鉴定第61-63页
                2.3.2 NaCl胁迫下过表达转基因株系叶绿素和脯氨酸含量第63-64页
            2.4 ABA对AtRabF1的影响第64-65页
            2.5 过表达转基因株系抗暗诱导衰老第65-71页
                2.5.1 拟南芥中AtRabF1的表达模式第65-66页
                2.5.2 AtRabF1对暗诱导衰老的影响第66-69页
                2.5.3 过表达CA-AtRabF1和DN-AtRabF1突变体对暗诱导衰老的影响第69-71页
            2.6 atrabF1-1/atrabA5e双突变体在抗盐胁迫和暗诱导衰老中作用第71-75页
                2.6.1 AttrabF1-1/atrabA5e双突变体构建和表型分析第71-72页
                2.6.2 atrabF1-1/atrabA5e双突变体盐和ABA处理分析第72-74页
                2.6.3 atrabF1-1/atrabA5e双突变体暗诱导衰老分析第74-75页
            2.7 AtRabF1对拟南芥光系统Ⅱ的影响第75-82页
                2.7.1 AtRabF1对光能转换和电子传递效率的影响第75-76页
                2.7.2 AtRabF1对拟南芥叶片反应中心的影响第76-79页
                2.7.3 AtRabF1对拟南芥叶片反应中心比活性参数的影响第79-81页
                2.7.4 AtRabF1对拟南芥性能指数(PI,Perfomance Index)的影响第81-82页
        3 讨论第82-91页
            3.1 AtRabF1蛋白位于叶绿体被膜和类囊体上第82-84页
            3.2 AtRabF1在盐胁迫中的作用第84-86页
            3.3 AtRabF1在暗诱导衰老中的作用第86-87页
            3.4 AtRabA5e对AtRabF1的影响第87-88页
            3.5 AtRabF1影响拟南芥光系统Ⅱ第88-91页
    第二章 叶绿体体外吸收脂质体中磷脂酰胆碱的机理第91-107页
        1 材料和方法第91-97页
            1.1 植物材料生长条件第91-92页
            1.2 叶绿体的分离第92页
            1.3 总磷脂提取第92-93页
            1.4 磷脂酰胆碱提取第93-95页
            1.5 脂质体制备第95页
            1.6 叶绿体体外吸收脂质体第95-96页
            1.7 嗜热菌蛋白酶处理叶绿体第96页
            1.8 核苷酸依赖性实验第96-97页
        2 结果和分析第97-103页
            2.1 时间和温度对离体叶绿体吸收脂质体上磷脂酰胆碱的影响第97-99页
            2.2 叶绿体外膜上的蛋白对于磷脂酰胆碱的有效吸收具有重要作用第99-100页
            2.3 脂质体体积对叶绿体吸收磷脂酰胆碱的影响第100-101页
            2.4 叶绿体对植物自然合成磷脂酰胆碱的体外吸收具有更高效率第101-103页
        3 讨论第103-107页
全文结论第107-109页
全文创新点第109-111页
参考文献第111-133页
附录第133-139页
攻读博士期间发表的论文第139-141页
致谢第141页

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