宏基因组文库中Ⅰ型聚酮合酶基因的克隆及分析
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 土壤宏基因组 | 第11-14页 |
| 1.2 天然产物多样性 | 第14-16页 |
| 1.3 聚酮合酶 | 第16-21页 |
| 1.3.1 聚酮化合物简介 | 第16-18页 |
| 1.3.2 PKS分类 | 第18-21页 |
| 1.4 非核糖体多肽合成酶及杂合PKS/NRPS | 第21-25页 |
| 1.4.1 NRPS简介 | 第21-23页 |
| 1.4.2 PKS、NRPS杂合 | 第23-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 土壤样品 | 第25页 |
| 2.1.2 PCR简并引物及特异性引物序列 | 第25-28页 |
| 2.2 实验主要试剂和仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.1 菌种 | 第28页 |
| 2.2.2 质粒 | 第28页 |
| 2.2.3 试剂与酶 | 第28页 |
| 2.2.4 工具酶及试剂盒 | 第28-29页 |
| 2.2.5 实验仪器 | 第29页 |
| 2.2.6 培养基 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-35页 |
| 2.3.1 直接法提取土壤微生物总DNA | 第29-30页 |
| 2.3.2 士壤宏基因组的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.3 简并引物PCR扩增 | 第31页 |
| 2.3.4 大肠杆菌感受态DH5α | 第31页 |
| 2.3.5 DNA连接及蓝白斑筛选 | 第31-32页 |
| 2.3.6 96孔法特异性引物筛选阳性克隆 | 第32-35页 |
| 3 实验结果及讨论 | 第35-49页 |
| 3.1 土壤中总DNA的提取结果及分析 | 第35-36页 |
| 3.2 PCR扩增 | 第36-38页 |
| 3.2.1 PCR扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.2.2 PCR扩增讨论 | 第37-38页 |
| 3.3 简并引物KS扩增序列 | 第38-44页 |
| 3.3.1 简并引物KS扩增序列结果 | 第38-43页 |
| 3.3.2 简并引物KS扩增序列讨论 | 第43-44页 |
| 3.4 1051克隆序列的部分分析 | 第44-48页 |
| 3.4.1 1051单克隆序列分析结果 | 第44-47页 |
| 3.4.2 1051单克隆序列分析讨论 | 第47-48页 |
| 3.5 小结 | 第48-49页 |
| 4 结论与展望 | 第49-51页 |
| 4.1 结论 | 第49页 |
| 4.2 创新点 | 第49页 |
| 4.3 展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-65页 |
| 附录1 | 第57-62页 |
| 附录2 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67页 |
