摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第10-20页 |
1.1 瘤胃结构及其发育 | 第10页 |
1.2 短链脂肪酸 | 第10-12页 |
1.3 平滑肌收缩调节机制 | 第12-18页 |
1.3.1 钙依赖性机制 | 第13-14页 |
1.3.2 钙敏化性机制 | 第14-16页 |
1.3.3 非MLC磷酸化依赖性途径 | 第16-18页 |
1.4 选题意义 | 第18-20页 |
2 实验材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 试验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 试验动物 | 第20页 |
2.1.2 饲料配比 | 第20页 |
2.1.3 主要试验试剂 | 第20-22页 |
2.1.4 主要试验器材 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-33页 |
2.2.1 动物饲养 | 第23页 |
2.2.2 材料采集 | 第23页 |
2.2.3 细胞培养试验 | 第23-25页 |
2.2.4 细胞形态学观察 | 第25页 |
2.2.5 瘤胃平滑肌细胞以及瘤胃上皮细胞免疫荧光鉴定 | 第25-26页 |
2.2.6 瘤胃平滑肌细胞及上皮细胞生长曲线的绘制 | 第26页 |
2.2.7 短链脂肪酸最适浓度测定 | 第26页 |
2.2.8 SCFAs孵育细胞 | 第26-27页 |
2.2.9 基因表达测定 | 第27-30页 |
2.2.10 蛋白表达测定 | 第30-32页 |
2.2.11 数据统计分析 | 第32-33页 |
3 试验结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 细胞形态观察 | 第33-34页 |
3.1.1 山羊瘤胃平滑肌细胞形态 | 第33-34页 |
3.1.2 山羊瘤胃上皮细胞形态 | 第34页 |
3.2 细胞鉴定 | 第34-36页 |
3.2.1 山羊瘤胃平滑肌细胞鉴定 | 第34-35页 |
3.2.2 山羊瘤胃上皮细胞鉴定 | 第35-36页 |
3.3 山羊瘤胃平滑肌细胞及上皮细胞生长曲线 | 第36-37页 |
3.4 短链脂肪酸最适孵育浓度 | 第37页 |
3.5 荧光定量PCR结果 | 第37-41页 |
3.5.1 RNA完整性及纯度检测 | 第37页 |
3.5.2 钙依赖性途径相关基因表达 | 第37-38页 |
3.5.3 ROCK/RhoA途径相关基因表达 | 第38-40页 |
3.5.4 PKC途径相关基因表达 | 第40-41页 |
3.6 Western Blotting检测结果 | 第41-47页 |
3.6.1 肌球蛋白轻链相关蛋白表达 | 第41-43页 |
3.6.2 ROCK/RhoA途径相关蛋白表达 | 第43-45页 |
3.6.3 PKC途径相关蛋白表达 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
4.1 山羊瘤胃平滑肌细胞与上皮细胞原代培养 | 第47页 |
4.2 山羊瘤胃平滑肌细胞与上皮细胞共培养 | 第47-48页 |
4.3 瘤胃平滑肌细胞钙依赖性途径分析 | 第48页 |
4.4 瘤胃平滑肌细胞ROCK/RhoA途径分析 | 第48-49页 |
4.5 瘤胃平滑肌细胞PKC途径分析 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
主要创新点 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录1 主要英文缩略词表及中文对照 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |