| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-20页 |
| 1.1 栝楼 | 第15-16页 |
| 1.1.1 栝楼的简介 | 第15页 |
| 1.1.2 栝楼的药用价值 | 第15页 |
| 1.1.3 栝楼抗肿瘤活性的研究 | 第15-16页 |
| 1.2 大肠癌 | 第16-17页 |
| 1.3 抗肿瘤分子机制简介 | 第17-19页 |
| 1.3.1 肿瘤发生机制 | 第17页 |
| 1.3.2 细胞凋亡 | 第17-19页 |
| 1.3.3 植物蛋白诱导细胞凋亡机制 | 第19页 |
| 1.4 本课题研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 栝楼抗肿瘤活性蛋白的分离纯化 | 第20-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
| 2.2 研究方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 细胞的复苏、培养及冻存 | 第20-21页 |
| 2.2.2 栝楼果实粗蛋白的提取 | 第21页 |
| 2.2.3 蛋白浓度的测定 | 第21页 |
| 2.2.4 细胞存活测定(MTT法) | 第21-22页 |
| 2.2.5 栝楼抗肿瘤活性蛋白(TKP)的纯化 | 第22页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE凝胶电泳分析蛋白 | 第22页 |
| 2.2.7 TKP质谱鉴定及酶活测定 | 第22-23页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-25页 |
| 2.3.1 栝楼果实粗蛋白的提取及抗肿瘤活性鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.2 栝楼果实抗肿瘤活性蛋白TKP的分离纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.3 栝楼果实抗肿瘤活性蛋白TKP质谱鉴定 | 第25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 TKP通过线粒体介导的途径诱导大肠癌细胞凋亡 | 第27-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第27页 |
| 3.1.2 实验试剂及抗体 | 第27页 |
| 3.2 研究方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第27页 |
| 3.2.2 细胞存活的测定 | 第27-28页 |
| 3.2.3 细胞克隆形成实验 | 第28页 |
| 3.2.4 DAPI染色 | 第28页 |
| 3.2.5 流式细胞仪分析 | 第28页 |
| 3.2.6 线粒体膜电位检测 | 第28页 |
| 3.2.7 蛋白免疫印迹 | 第28页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第28-29页 |
| 3.3 结果 | 第29-32页 |
| 3.3.1 TKP抑制人大肠癌细胞增殖 | 第29-30页 |
| 3.3.2 TKP诱导人大肠癌细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 3.3.3 TKP通过线粒体途径诱导人大肠癌细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 TKP通过PI3K/AKT信号通路诱导的人大肠癌细胞凋亡 | 第33-40页 |
| 4.1 实验材料 | 第33页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第33页 |
| 4.1.2 实验试剂及抗体 | 第33页 |
| 4.2 研究方法 | 第33页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第33页 |
| 4.2.2 细胞存活的测定 | 第33页 |
| 4.2.3 流式细胞仪分析 | 第33页 |
| 4.2.4 线粒体膜电位检测 | 第33页 |
| 4.2.5 蛋白免疫印迹 | 第33页 |
| 4.2.6 统计学分析 | 第33页 |
| 4.3 结果 | 第33-38页 |
| 4.3.1 TKP对大肠癌细胞MAPK和PI3K/AKT信号通路的影响 | 第33-34页 |
| 4.3.2 MAPK/ERK信号通路抑制剂对TKP诱导的人大肠癌细胞凋亡的影响 | 第34-37页 |
| 4.3.3 PI3K/AKT信号通路抑制剂和激活剂对TKP诱导的人大肠癌细胞凋亡的影响 | 第37-38页 |
| 4.4 讨论 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录1 主要试剂配方 | 第45-47页 |
| 附录2 实验主要仪器设备 | 第47-48页 |
| 附录3 英文缩略语表 | 第48-49页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-52页 |
| 个人简况及联系方式 | 第52-54页 |
