| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-31页 |
| ·引言 | 第9-11页 |
| ·秀丽隐杆线虫概述 | 第11-12页 |
| ·RNA干扰通路 | 第12-22页 |
| ·RNA干扰概述 | 第12-15页 |
| ·线虫中的细胞核内RNA干扰通路 | 第15-18页 |
| ·RNA干扰的遗传 | 第18-20页 |
| ·piRNA介导的表观修饰遗传 | 第20-22页 |
| ·组蛋白H3赖氨酸K27的甲基化修饰 | 第22-24页 |
| ·RNA干扰与组蛋白修饰 | 第24-27页 |
| ·RNA干扰与组蛋白修饰概况 | 第24-26页 |
| ·RNA干扰与H3K27me3 | 第26-27页 |
| ·RNA干扰与组蛋白修饰遗传的相互影响 | 第27-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-57页 |
| ·实验材料 | 第31-38页 |
| ·实验所需线虫品系 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31-33页 |
| ·实验常规试剂 | 第33-38页 |
| ·实验方法 | 第38-57页 |
| ·线虫生长固体培养基 | 第38页 |
| ·线虫RNAi固体培养基 | 第38-39页 |
| ·线虫液体培养 | 第39-40页 |
| ·线虫基因组DNA提取 | 第40页 |
| ·线虫冻存和复苏 | 第40-41页 |
| ·线虫同步化处理 | 第41页 |
| ·线虫RNA干扰处理 | 第41-43页 |
| ·线虫显微注射筛选整合品系 | 第43-44页 |
| ·线虫总RNA提取及反转录合成cDNA | 第44-46页 |
| ·质粒构建 | 第46-49页 |
| ·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第49-51页 |
| ·RNA免疫共沉淀(RIP) | 第51-53页 |
| ·蛋白质体外结合实验(Pull Down) | 第53-54页 |
| ·蛋白质印迹实验(Western Blot) | 第54-57页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第57-82页 |
| ·外源性RNA干扰指导序列特异性的H3K27三甲基化修饰 | 第57-62页 |
| ·遗传筛选发现细胞核内RNA干扰必须因子mes-2 | 第57-59页 |
| ·小RNA分子可以指导序列特异性的H3K27me3 | 第59-60页 |
| ·细胞核内RNA干扰通路对于H3K27的三甲基化是必须的 | 第60-61页 |
| ·双链RNA可以诱导亚基因水平的染色质修饰 | 第61-62页 |
| ·Nrde结合的内源性小RNA分子可以指导序列特异性的H3K27三甲基化修饰 | 第62-68页 |
| ·利用ChIP-seq进一步确定基因组范围内Nrde结合的内源性22G siRNA与H3K27me3表达之间的关系 | 第64-65页 |
| ·piRNA和WAGO-1结合的22G内源性siRNA可以诱导H3K27的三甲基化修饰 | 第65-67页 |
| ·CSR-1内源性靶标位置可以产生外源性RNAi介导产生的依赖于Nrde通路的H3K27三甲基化修饰 | 第67-68页 |
| ·RNA干扰诱导产生的H3K27me3可以多代遗传 | 第68-69页 |
| ·小RNA诱导的H3K9me3和H3K27me3需要不同的遗传因子 | 第69-71页 |
| ·set-25和met-2对于H3K9me3表达是必须的,mes-2对于H3K27me3表达是必须的 | 第69-70页 |
| ·mes-4和mes-6对于H3K27me3表达也有影响 | 第70-71页 |
| ·H3K27的三甲基化修饰对于细胞核内RNA干扰是必须的 | 第71-73页 |
| ·MES-2被Nrde通路募集到靶标位置完成染色质修饰的具体分子机制还不清楚 | 第73-77页 |
| ·结果分析与讨论 | 第77-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 附录实时荧光定量PCR引物 | 第88-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第98页 |
