| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·氨基甲酸乙酯简介 | 第7-11页 |
| ·氨基甲酸乙酯的理化性质 | 第7页 |
| ·氨基甲酸乙酯的研究进程 | 第7-8页 |
| ·发酵食品中氨基甲酸乙酯的形成途径 | 第8页 |
| ·食品中氨基甲酸乙酯的危害和限量标准 | 第8-9页 |
| ·发酵食品中氨基甲酸乙酯的控制和消除策略 | 第9页 |
| ·氨基甲酸乙酯水解酶的研究进展 | 第9-11页 |
| ·氨基甲酸乙酯水解酶的异源表达 | 第11页 |
| ·酶的应用特性改善 | 第11-13页 |
| ·分子手段 | 第11-12页 |
| ·物理化学方法 | 第12-13页 |
| ·立题意义与研究内容 | 第13-15页 |
| ·立题意义 | 第13-14页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·实验菌株与质粒 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·分子克隆操作 | 第16-21页 |
| ·目的基因的扩增 | 第16-17页 |
| ·基因组及质粒的提取 | 第17页 |
| ·目的片段及载体的纯化 | 第17-18页 |
| ·酶切及连接 | 第18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第18页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第18-19页 |
| ·乳酸乳球菌感受态细胞的制备与转化 | 第19-20页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第20-21页 |
| ·培养方法 | 第21页 |
| ·分析方法 | 第21-23页 |
| ·粗酶液的制备 | 第21页 |
| ·酶活的测定 | 第21-22页 |
| ·菌体生物量测定 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-43页 |
| ·UH基因的异源表达 | 第23-29页 |
| ·UH基因在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第23-28页 |
| ·UH基因在乳酸乳球菌中的表达 | 第28-29页 |
| ·重组菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-uh摇瓶发酵优化 | 第29-38页 |
| ·单因素实验 | 第29-34页 |
| ·Plackett-Burman实验 | 第34-35页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第35页 |
| ·Central Composite实验 | 第35-37页 |
| ·3L发酵罐发酵产UH | 第37-38页 |
| ·稳定剂的选择及优化 | 第38-43页 |
| ·不同稳定剂对酶的保护作用 | 第38-40页 |
| ·复合稳定剂正交实验 | 第40-41页 |
| ·复合稳定剂对酶稳定性的影响 | 第41-43页 |
| 结论与展望 | 第43-44页 |
| 主要结论 | 第43页 |
| 展望 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |