| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| ·课题背景及研究的目的和意义 | 第11页 |
| ·国内外研究现状 | 第11-13页 |
| ·1,3-丙二醇的生物合成途径 | 第13-14页 |
| ·1,3-丙二醇生物合成途径中关键酶介绍 | 第14-15页 |
| ·甘油脱氢酶 | 第14-15页 |
| ·二羟基丙酮激酶 | 第15页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶 | 第15页 |
| ·甘油脱水酶 | 第15页 |
| ·酶促反应动力学 | 第15-20页 |
| ·酶促反应动力学的特点 | 第16页 |
| ·酶的抑制作用模型 | 第16-18页 |
| ·双底物酶促反应动力学 | 第18-19页 |
| ·酶促反应动力学参数测定方法 | 第19-20页 |
| ·选题目的及研究内容 | 第20-22页 |
| ·选题目的 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-22页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第22-27页 |
| ·实验药品与仪器 | 第22-23页 |
| ·实验药品 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·提取总基因组方法 | 第23-24页 |
| ·PCR 产物的回收方法 | 第24页 |
| ·PCR 产物与带有多克隆位点的 pMD18-T 载体连接方法 | 第24-25页 |
| ·无细胞粗提液制备方法 | 第25页 |
| ·酶活分析方法 | 第25页 |
| ·蛋白质的测定 | 第25-165页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第165-26页 |
| ·测定 NADH 含量的方法 | 第26-27页 |
| 第3章 质粒 PDK6-DHAK、PDK6-GDHt 的构建 | 第27-33页 |
| ·概述 | 第27-28页 |
| ·简介 | 第27-28页 |
| ·目的酶基因片段的 PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·DHAKI、DHAKII PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·GDHt PCR 扩增 | 第29页 |
| ·表达质粒的构建 | 第29-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 第4章 甘油脱水酶的纯化与性质研究 | 第33-41页 |
| ·概述 | 第33-34页 |
| ·蛋白纯化理论 | 第33页 |
| ·常用的纯化方法 | 第33-34页 |
| ·不同浓度诱导剂对 GDH 的表达量的影响 | 第34页 |
| ·不同诱导时间对 GDH 酶活的影响 | 第34-35页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第35-36页 |
| ·SephdexepG-200 纯化 | 第36-37页 |
| ·DE-23 离子交换层析 | 第37-38页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第38-39页 |
| ·不同 pH 缓冲液中甘油脱氢酶酶活的变化 | 第39-40页 |
| ·温度对甘油脱氢酶酶活性的影响 | 第40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第5章 GDH 动力学研究 | 第41-49页 |
| ·概述 | 第41页 |
| ·GDH 动力学模型建立 | 第41-42页 |
| ·GDH 动力学模型求解方法 | 第42-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-48页 |
| ·酶浓度对正逆反应速度的影响 | 第44页 |
| ·正反应底物抑制作用 | 第44页 |
| ·逆反应底物抑制作用 | 第44-45页 |
| ·动力学模型的验证 | 第45-48页 |
| ·本章结论 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 攻读硕士学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |