| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-25页 |
| 1 结直肠癌的相关介绍 | 第12-15页 |
| ·结直肠癌的组织学分类 | 第12-13页 |
| ·结直肠癌的病理分期 | 第13-15页 |
| 2 结直肠癌发生与转移的相关研究 | 第15-19页 |
| ·结直肠癌发生的相关机制 | 第15-16页 |
| ·肿瘤转移的基本过程 | 第16-17页 |
| ·影响肿瘤转移的主要因素 | 第17-19页 |
| ·肿瘤转移相关的基因 | 第19页 |
| 3 ZNF238蛋白简介 | 第19-20页 |
| 4 SUMO化修饰的研究现状 | 第20-25页 |
| ·SUMO蛋白的结构及底物特点 | 第20-21页 |
| ·SUMO的可逆性修饰途径 | 第21-22页 |
| ·SUMO化修饰的生物学功能 | 第22-23页 |
| ·SUMO化修饰与疾病 | 第23-25页 |
| 第2章 ZNF238基因对结直肠癌细胞侵袭与迁移的影响及ZNF238蛋白SUMO化修饰的研究 | 第25-46页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| ·细胞系 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25-26页 |
| ·抗体 | 第26-27页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第27页 |
| ·常用溶液及配制 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-35页 |
| ·引物设计 | 第27-29页 |
| ·载体构建 | 第29-30页 |
| ·脂质体细胞转染实验 | 第30-31页 |
| ·慢病毒包装及转染 | 第31-32页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第32页 |
| ·cDNA的制备(RT反应) | 第32页 |
| ·半定量PCR | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| ·Transwell细胞侵袭及迁移实验 | 第33页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第33-34页 |
| ·免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-43页 |
| ·结直肠癌中ZNF238表达数据分析结果 | 第35-36页 |
| ·ZNF238在转移能力不同的结直肠癌细胞系中的表达水平 | 第36-37页 |
| ·shRNA对ZNF238表达量的沉默结果 | 第37-38页 |
| ·ZNF238沉默后对结直肠癌细胞侵袭与迁移的影响 | 第38页 |
| ·ZNF238蛋白核定位信号分析结果 | 第38-39页 |
| ·ZNF238蛋白SUMO化修饰位点的预测结果 | 第39-40页 |
| ·ZNF238-GFP和SUMO1-FLAG质粒构建测序结果 | 第40-41页 |
| ·免疫荧光观察外源性ZNF238在细胞中的定位 | 第41-42页 |
| ·免疫共沉淀实验(Co-IP)检测ZNF238受到SUMO1修饰 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·利用慢病毒筛选稳定沉默ZNF238表达的细胞系 | 第43-44页 |
| ·肿瘤细胞侵袭与迁移实验设计 | 第44页 |
| ·ZNF238蛋白SUMO化修饰位点的预测分析 | 第44页 |
| ·ZNF238蛋白的SUMO化修饰与其作为转录因子的关系 | 第44-45页 |
| ·免疫共沉淀实验显示ZNF238可被SUMO化修饰 | 第45-46页 |
| 结论与计划 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第55页 |
