| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第9-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-36页 |
| ·细胞老化的发现与特征 | 第16-25页 |
| ·细胞老化的发现 | 第16-17页 |
| ·细胞老化的特征与判别标准 | 第17-20页 |
| ·细胞周期阻滞 | 第17页 |
| ·细胞形态改变 | 第17页 |
| ·老化相关β半乳糖苷酶活性染色 | 第17-18页 |
| ·老化相关异染色质集落形成 | 第18页 |
| ·肿瘤抑制分子网络激活 | 第18-19页 |
| ·细胞老化的判别标准 | 第19-20页 |
| ·与细胞老化特征相关的一些问题 | 第20-25页 |
| ·细胞老化真的是不可逆的吗? | 第20-21页 |
| ·如何把细胞老化与终末分化、细胞休眠加以区分? | 第21-22页 |
| ·SAHF形成的分子机制及其生物学意义是什么? | 第22-25页 |
| ·c-Myc与细胞老化 | 第25-31页 |
| ·c-Myc蛋白的结构与它的转录因子活性 | 第26-28页 |
| ·c-Myc蛋白质的结构 | 第26页 |
| ·c-Myc转录激活作用的分子机制 | 第26-27页 |
| ·c-Myc转录抑制作用的分子机制 | 第27-28页 |
| ·c-Myc对癌基因诱发细胞老化的抑制作用机制 | 第28-30页 |
| ·c-Myc表达异常诱发细胞老化的作用机制 | 第30-31页 |
| ·c-Myc表达水平下调诱发的细胞老化 | 第30页 |
| ·c-Myc异常高表达诱发的细胞老化 | 第30-31页 |
| ·Bcl-2相关抗死亡基因2(BAG2)的研究现状及其参与c-Myc相关细胞老化的可能性分析 | 第31-36页 |
| ·BAG家族功能简介及其在肿瘤中的分布 | 第31-33页 |
| ·BAG2功能的研究现况 | 第33-34页 |
| ·BAG2参与c-Myc相关细胞老化的可能性分析 | 第34-36页 |
| 第二章 c-Myc RNAi引发细胞老化前后差异表达蛋白谱的鉴定与验证 | 第36-66页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-46页 |
| ·试验结果 | 第46-64页 |
| ·c-Myc RNAi诱发细胞老化模型的建立 | 第46-49页 |
| ·人c-Myc基因shRNA质粒的构建 | 第46-47页 |
| ·c-Myc基因knockdown稳定细胞株的筛选 | 第47-48页 |
| ·c-Myc基因knockdown诱导细胞老化 | 第48页 |
| ·c-Myc基因knockdown在TRE293细胞中激活p53/p21~(CIP1)老化通路 | 第48-49页 |
| ·c-Myc RNAi诱发细胞老化前后差异表达蛋白谱的鉴定 | 第49-52页 |
| ·差异蛋白质谱的鉴定与分析 | 第50-51页 |
| ·在mRNA水平对比分析差异蛋白的丰度 | 第51-52页 |
| ·c-Myc负向调控BAG2的表达丰度 | 第52-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第三章 c-Myc调控BAG2表达丰度的机制研究 | 第66-84页 |
| ·引言 | 第66页 |
| ·材料与方法 | 第66-73页 |
| ·试验结果 | 第73-81页 |
| ·BAG2启动子区上c-Myc结合区域的确定 | 第73-75页 |
| ·BAG2启动子区c-Myc/SP-1转录复合物的鉴定 | 第75-77页 |
| ·c-Myc在细胞内结合SP1 | 第75页 |
| ·SP1识别与c-Myc相同的BAG2启动子片段 | 第75-76页 |
| ·BAG2启动子区上SP1结合位点的确认 | 第76-77页 |
| ·c-Myc/SP-1转录复合物对BAG2转录的调节作用 | 第77-80页 |
| ·人SP1真核表达质粒的构建 | 第78页 |
| ·SP1调控BAG2的表达水平 | 第78-79页 |
| ·c-Myc抑制SP1对BAG2的转录活性 | 第79页 |
| ·c-Myc抑制SP1报告基因系统的活性 | 第79-80页 |
| ·c-Myc逆转SP1外源表达引起的BAG2 mRNA丰度升高 | 第80页 |
| ·c-Myc/SP-1复合物在H520细胞中调控BAG2的转录 | 第80-81页 |
| ·小结 | 第81-84页 |
| 第四章 BAG2在c-Myc RNAi引发细胞老化中的作用 | 第84-98页 |
| ·引言 | 第84页 |
| ·材料与方法 | 第84-87页 |
| ·试验结果 | 第87-97页 |
| ·可诱导BAG2高表达细胞模型的建立 | 第87-89页 |
| ·人BAG2真核表达质粒的构建 | 第87页 |
| ·BAG2可诱导高表达稳定细胞株的筛选 | 第87-89页 |
| ·高表达BAG2减慢细胞生长速度 | 第89-90页 |
| ·高表达BAG2减慢细胞增殖 | 第90页 |
| ·高表达BAG2诱发细胞老化 | 第90-93页 |
| ·高表达BAG2促进SA-β-gal染色 | 第91-92页 |
| ·高表达BAG2促进老化相关异染色体形成 | 第92-93页 |
| ·抑制BAG2表达水平升高部分逆转c-Myc RNAi诱发的细胞老化 | 第93-94页 |
| ·BAG2在体内通过细胞老化降低癌症细胞的致瘤性 | 第94-97页 |
| ·BAG2高表达稳定肺癌细胞株的筛选 | 第94页 |
| ·高表达BAG2通过诱发细胞老化影响H520细胞的生长 | 第94-95页 |
| ·高表达BAG2降低肿瘤细胞的克隆形成能力 | 第95-96页 |
| ·高表达BAG2降低肿瘤细胞的致瘤性 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第五章 BAG2诱发细胞老化作用机制的探索 | 第98-116页 |
| ·引言 | 第98页 |
| ·材料与方法 | 第98-102页 |
| ·试验结果 | 第102-114页 |
| ·BAG2通过p21~(CIP1)影响细胞老化 | 第102-104页 |
| ·BAG2正向调节p21~(CIP1)的蛋白丰度 | 第102-103页 |
| ·抑制p21~(CIP1)表达水平升高可以逆转BAG2高表达诱发的细胞老化 | 第103页 |
| ·抑制BAG2表达水平升高可以逆转c-Myc RNAi引发的p21~(CIP1)表达丰度升高 | 第103-104页 |
| ·BAG2在mRNA水平对p21CIP1进行调控 | 第104-107页 |
| ·BAG2不影响节p21CIP1的蛋白质降解 | 第105页 |
| ·BAG2高表达增加p21~(CIP1)的mRNA丰度 | 第105-107页 |
| ·高表达BAG2上调p53对p21~(CIP1)的转录活性 | 第107页 |
| ·BAG2可通过p53非依赖的方式调控p21~(CIP1) | 第107-109页 |
| ·BAG2相互作用蛋白质复合物的鉴定 | 第109-114页 |
| ·BAG2的原核表达及纯化 | 第109页 |
| ·BAG2相互作用蛋白的富集、鉴定与验证 | 第109-112页 |
| ·BAG2高表达促进CLTC、p53的核转位 | 第112-114页 |
| ·小结 | 第114-116页 |
| 第六章 讨论 | 第116-122页 |
| ·c-Myc和SP1协同调控细胞老化相关基因的表达 | 第116-117页 |
| ·BAG2-p21~(CIP1)在c-Myc表达水平下调诱发细胞老化中发挥重要功能 | 第117-119页 |
| ·c-Myc在多个层次对p21~(CIP1)的表达水平进行调控 | 第119-120页 |
| ·BAG2通过依赖/不依赖p53分子机制调控p21~(CIP1)的表达水平 | 第120-122页 |
| 基本结论 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-142页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第142-144页 |
| 附录 | 第144-152页 |
