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狂犬病病毒街毒株DRV-SX-09犬感染模型的建立

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第11-13页
第1章 文献综述第13-22页
   ·狂犬病概况第13-14页
   ·狂犬病流行概况第14-17页
     ·国外狂犬病流行概况第14-16页
     ·国内狂犬病流行概况第16-17页
   ·狂犬病诊断第17-21页
     ·狂犬病的临床诊断第17-18页
     ·实验室诊断第18-20页
       ·狂犬病抗原检测第18-19页
       ·RABV分子生物学检测第19-20页
     ·血清学诊断第20-21页
   ·小鼠及犬狂犬病的实验动物进展第21页
   ·研究课题的目的与意义第21-22页
第2章 材料与方法第22-41页
   ·实验材料第22-24页
     ·细胞与毒株第22页
     ·试剂及药品第22-23页
     ·培养基的配置第23页
     ·主要缓冲液及相关试剂的配置第23-24页
     ·实验动物第24页
     ·本实验中所用到的引物第24页
   ·实验方法第24-41页
     ·病毒增殖第24-25页
       ·狂犬病病毒街毒株DRV-SX-09扩增第24页
       ·CVS-11细胞毒的扩增第24-25页
     ·病毒滴定第25-27页
       ·小鼠颅内接种DRV-SX-09病毒滴定第25-26页
       ·CVS-11滴度的测定第26-27页
     ·犬唾液的采集及处理第27-28页
     ·唾液总RNA的提取及RT-PCR扩增目的片段第28-30页
       ·总RNA提取第28页
       ·PCR灵敏度分析鉴定第28-29页
       ·RT-PCR第29-30页
     ·N基因全长扩增第30-31页
     ·酶切产物的回收第31-32页
     ·N基因片段与载体pET-42b的连接体反应第32页
     ·连接体系的转化第32页
     ·质粒的小量提取第32-33页
     ·质粒酶切鉴定第33-34页
     ·动物实验及样品采集第34-35页
       ·攻毒前动物预处理第34页
       ·实验分组第34页
       ·犬血液的采集第34页
       ·犬脑脊液的采集第34-35页
       ·比格犬脑组织的获取第35页
       ·唾液腺(舌下腺)的获取第35页
       ·其他器官的获取第35页
     ·病理切片制作第35-37页
       ·取材第35页
       ·犬脑的固定第35-36页
       ·脱水、透明及包埋第36页
       ·切片制备第36页
       ·染色和封片第36-37页
     ·免疫组化第37-38页
     ·荧光抗体中和试验检测犬血清及脑脊液中和抗体第38-39页
     ·本实验所用的仪器设备第39-40页
     ·试验废物的处理第40-41页
第3章 结果与分析第41-59页
   ·阳性质粒的构建及检测引物PCR灵敏度鉴定分析第41-44页
     ·狂犬病病毒街毒株DRV-SX-09 N基因序列的扩增第41-42页
     ·重组质粒的双酶切鉴定第42页
     ·检测引物的鉴定第42-43页
     ·PCR灵敏度检测分析第43-44页
   ·狂犬病病毒街毒株DRV-SX-09小鼠MICLD_(50)的测定第44-45页
   ·比格犬感染RABV的临床表现第45-46页
   ·犬的唾液排毒情况检测第46-49页
   ·犬的血常规检测结果第49页
   ·犬的脑脊液常规检测第49页
   ·犬的脑脊液和血清的中和抗体水平第49-51页
   ·犬体内病毒分布情况第51-52页
   ·犬脑组织的病理检测结果第52-53页
   ·免疫组化法检测病毒的分布第53-59页
第4章 讨论第59-62页
   ·发病犬唾液排毒情况的鉴定分析第59页
   ·病毒在发病犬体内分布情况第59-60页
   ·犬发病前后中和抗体水平分析第60页
   ·发病前后血液和脑脊液生化分析第60-61页
   ·发病犬的脑组织病理学分析第61页
   ·发病犬脑内病毒的分布情况分析第61-62页
第5章 结论第62-63页
参考文献第63-69页
附录第69-75页
致谢第75页

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