| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·产油微藻 | 第14-15页 |
| ·微藻 | 第14-15页 |
| ·产油微藻 | 第15页 |
| ·微藻与生物柴油 | 第15-16页 |
| ·微藻与多不饱和脂肪酸 | 第16-18页 |
| ·多不饱和脂肪酸的结构及分类 | 第16-17页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生理功能 | 第17页 |
| ·微藻生产 PUFAs | 第17-18页 |
| ·微藻中油脂合成途径 | 第18-20页 |
| ·微藻的光合作用与油脂合成 | 第18-19页 |
| ·脂肪酸的合成 | 第19-20页 |
| ·甘油三酯的合成 | 第20页 |
| ·长链脂肪酰基 CoA 合成酶简介 | 第20-23页 |
| ·长链脂肪酰基 CoA 合成酶的研究进展 | 第23-27页 |
| ·大肠杆菌脂肪酰基 CoA 合成酶的研究进展 | 第23-24页 |
| ·酿酒酵母脂肪酰基 CoA 合成酶的研究进展 | 第24-27页 |
| ·本课题的研究意义和内容 | 第27-28页 |
| 第二章 三角褐指藻 LACS 蛋白家族编码基因的克隆和功能验证 | 第28-53页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验仪器和材料 | 第28-31页 |
| ·菌种及相关载体 | 第28页 |
| ·试剂及耗材 | 第28页 |
| ·培养基及溶液 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·引物序列 | 第29-30页 |
| ·所用质粒 | 第30页 |
| ·所用酵母菌种 | 第30-31页 |
| ·方法和步骤 | 第31-40页 |
| ·三角褐指藻的培养和收集 | 第31页 |
| ·三角褐指藻总 RNA 的提取 | 第31页 |
| ·RNA 反转录合成 cDNA 链 | 第31-32页 |
| ·长链脂肪酰基 CoA 合成酶编码基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·长链脂肪酰基 CoA 合成酶在缺陷型酿酒酵母中表达 | 第34-36页 |
| ·平板互补实验 | 第36-37页 |
| ·C1-BODIPY-C12 的吸收 | 第37-38页 |
| ·尼罗红染色 | 第38页 |
| ·酶活的测定 | 第38-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-51页 |
| ·三角褐指藻长链脂肪酰基 CoA 合成酶 LACS 家族编码基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·PtACSL 蛋白家族氨基酸序列分析 | 第41-43页 |
| ·跨膜区预测 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·阳性转基因酿酒酵母 YB525 的鉴定 | 第45-46页 |
| ·PtACSL 蛋白表达检测 | 第46页 |
| ·平板互补实验结果 | 第46-47页 |
| ·C1-BODIPY-C12 的吸收 | 第47-48页 |
| ·尼罗红染色 | 第48-49页 |
| ·酶活的测定 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 三角褐指藻 LACS 蛋白家族编码基因的表达模式 | 第53-64页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验仪器和材料 | 第53-54页 |
| ·试剂和仪器 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53页 |
| ·引物序列 | 第53-54页 |
| ·方法和步骤 | 第54-56页 |
| ·三角褐指藻的培养收集 | 第54页 |
| ·RNA 的提取 | 第54页 |
| ·RNA 反转录合成 cDNA 链 | 第54-55页 |
| ·引物效率的检测 | 第55页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 | 第55-56页 |
| ·实验结果 | 第56-62页 |
| ·引物效率的测定 | 第56-57页 |
| ·不同培养条件对 ptacsl 转录水平的影响 | 第57-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 PtACSL5 在 faa4Δ酿酒酵母突变株中的表达 | 第64-73页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·实验仪器和材料 | 第64-65页 |
| ·菌种及相关载体 | 第64页 |
| ·试剂及耗材 | 第64页 |
| ·培养基及溶液 | 第64-65页 |
| ·仪器设备 | 第65页 |
| ·引物序列 | 第65页 |
| ·方法和步骤 | 第65-68页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第65页 |
| ·pYTACS5 及 pYES2/CT 转化 Y00833 | 第65页 |
| ·阳性转基因酵母的筛选 | 第65页 |
| ·阳性转基因酵母的诱导表达 | 第65-66页 |
| ·分析转基因 Y00833 中 DHA 在 TAG 中的含量 | 第66-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-71页 |
| ·ptacsl5 基因的克隆及表达载体的构建 | 第68页 |
| ·阳性转基因 Y00833 的筛选 | 第68-69页 |
| ·总脂薄层层析结果 | 第69-70页 |
| ·分析 DHA 在 TAG 中的含量 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 全文总结及创新点 | 第73-75页 |
| ·全文总结 | 第73-74页 |
| ·创新点 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
