| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-26页 |
| ·糖苷水解酶的概述 | 第16-17页 |
| ·糖苷水解酶的分类 | 第16页 |
| ·糖苷水解酶的催化机制 | 第16-17页 |
| ·纤维素及其降解酶的研究进展 | 第17-22页 |
| ·纤维素 | 第17-18页 |
| ·纤维素酶 | 第18-19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 | 第19-21页 |
| ·β-葡萄糖苷酶降解大豆异黄酮的研究进展 | 第21-22页 |
| ·半纤维素及其降解酶的研究进展 | 第22-24页 |
| ·半纤维素 | 第22页 |
| ·半纤维素降解酶 | 第22-23页 |
| ·β-木糖苷酶 | 第23页 |
| ·双功能酶及酶的协同作用 | 第23-24页 |
| ·嗜热微生物及嗜热酶研究进展 | 第24-25页 |
| ·嗜热微生物 | 第24页 |
| ·嗜热酶 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 Neosartorya fischeri P1 β-葡萄糖苷酶基因的高效表达及应用研究 | 第26-47页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·仪器、商业酶和试剂盒 | 第26页 |
| ·培养基及溶剂配制 | 第26-27页 |
| ·底物配制 | 第27-28页 |
| ·引物合成与测序 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第28页 |
| ·bgl3P1 基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·序列的相似性比较与序列分析 | 第30页 |
| ·真核表达载体 pPIC9-bgl3P1 的构建 | 第30-31页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因 bgl3P1 在毕赤酵母中的表达 | 第31-34页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3P1 发酵罐水平产酶研究 | 第34页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3P1 的酶学性质分析 | 第34-37页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3P1 降解天然大豆异黄酮 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-45页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因 bgl3P1 的序列分析 | 第37-38页 |
| ·重组表达载体 pPIC9-bgl3P1 的构建 | 第38页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因 bgl3P1 的表达及纯化 | 第38-39页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3P1 发酵水平分析 | 第39-40页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3P1 的酶学性质分析 | 第40-44页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3P1 降解大豆异黄酮 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 Alicyclobacillus sp.A4 β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达及双功能研究 | 第47-60页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·菌株与质粒 | 第47页 |
| ·仪器和试剂 | 第47页 |
| ·培养基与溶液配制 | 第47页 |
| ·底物配制 | 第47页 |
| ·引物合成、测序 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·Alicyclobacillus sp. A4 基因组的提取 | 第47-48页 |
| ·bgl3A4 基因及其截短酶基因 bgl3A4-670 的克隆 | 第48-49页 |
| ·原核表达载体 pET28a(+)-bgl3A4、pET28a(+)-bgl3A4-670 的构建 | 第49-50页 |
| ·bgl3A4 及 bgl3A4-670 在大肠杆菌中表达及纯化 | 第50-51页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3A4 的酶学性质分析 | 第51页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3A4 与截短酶 Bgl3A4-670 的底物双功能分析 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-58页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因 bgl3A4 的序列比对 | 第51-52页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因 bgl3A4 的同源建模与序列分析 | 第52-54页 |
| ·重组表达载体 pET28a(+)-bgl3A4 与 pET28a(+)-bgl3A4-670 的构建 | 第54页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因 bgl3A4 的异源表达及纯化 | 第54页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3A4 的酶学性质分析 | 第54-57页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 Bgl3A4 的底物双功能研究 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 Humicola insolens Y1 双功能木糖苷酶基因的表达及协同作用研究 | 第60-72页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·菌株与质粒 | 第60页 |
| ·仪器、工具酶和试剂盒 | 第60页 |
| ·培养基及溶剂配制 | 第60页 |
| ·底物配制 | 第60页 |
| ·引物合成、测序 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第60页 |
| ·木糖苷酶基因的克隆 | 第60-61页 |
| ·表达载体 pET-28a(+)-xyl43A 和 pET-28a(+)-xyl43B 的构建 | 第61页 |
| ·双功能木糖苷酶基因 xyl43A 和 xyl43B 的表达纯化 | 第61页 |
| ·Xyl43A 和 Xyl43B 的酶学性质分析 | 第61-62页 |
| ·双功能木糖苷酶与木聚糖酶的协同作用 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-70页 |
| ·双功能木糖苷酶基因 xyl43A 和 xyl43B 的序列分析 | 第63-64页 |
| ·双功能木糖苷酶基因 xyl43A 和 xyl43B 的表达及纯化 | 第64页 |
| ·双功能木糖苷酶的酶学性质分析 | 第64-67页 |
| ·双功能木糖苷酶与木聚糖酶的协同作用分析 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70页 |
| 本章小结 | 第70-72页 |
| 第五章 全文结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
