摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略表 | 第9-15页 |
第一章 引言 | 第15-23页 |
·果胶的结构 | 第15-16页 |
·果胶酶的概述 | 第16-18页 |
·果胶酶的分类及性质 | 第16-17页 |
·果胶酶的来源和分布 | 第17-18页 |
·果胶酶性质概况 | 第18-19页 |
·多聚半乳糖醛酸酶(PG)的性质 | 第18-19页 |
·果胶酯酶(PE)的性质 | 第19页 |
·果胶裂解酶(PL)的性质 | 第19页 |
·果胶酶的晶体结构及催化 | 第19-20页 |
·聚半乳糖醛酸酶的晶体结构及催化 | 第19-20页 |
·果胶裂解酶的晶体结构 | 第20页 |
·果胶酯酶的晶体结构 | 第20页 |
·果胶酶的应用 | 第20-22页 |
·果胶酶应用于食品工业 | 第21页 |
·果胶酶应用于纺织业 | 第21页 |
·果胶酶应用于造纸业 | 第21页 |
·果胶酶应用于饲料行业 | 第21页 |
·果胶酶应用于其他工业 | 第21-22页 |
·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 果胶酶基因的克隆与性质研究 | 第23-56页 |
·本章引言 | 第23页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·菌种和质粒 | 第23页 |
·引物合成及 DNA 测序 | 第23页 |
·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·培养基组分 | 第24页 |
·常用溶液 | 第24页 |
·底物的配制 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-36页 |
·菌株发酵活性的评估 | 第24-25页 |
·基因组的提取 | 第25页 |
·cDNA 的获得 | 第25-28页 |
·基因全长的获得 | 第28-29页 |
·表达载体的构建 | 第29-32页 |
·重组质粒在毕赤酵母中的表达 | 第32-34页 |
·果胶酶的浓缩及纯化 | 第34页 |
·果胶酶的性质测定 | 第34-35页 |
·应用实验 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-52页 |
·果胶酶基因的克隆 | 第36-41页 |
·重组果胶甲酯酶 PE8F46 的异源表达,纯化及性质测定 | 第41-44页 |
·来源于 N. fischeri P1 的果胶酶的纯化及性质测定 | 第44-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
本章小结 | 第54-56页 |
第三章 聚半乳糖醛酸酶 PG I 的改良 | 第56-71页 |
·本章引言 | 第56页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·菌株、质粒 | 第56页 |
·仪器试剂 | 第56页 |
·培养基及溶液 | 第56页 |
·引物合成及测序 | 第56页 |
·序列及结构分析 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-65页 |
·突变体位点的设计 | 第57-64页 |
·突变体基因的构建及表达 | 第64-65页 |
·突变体的性质测定 | 第65页 |
·结果与分析 | 第65-67页 |
·突变体的表达及纯化 | 第65-66页 |
·突变体的性质测定 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
·PG I 的 Loop 区关键位点突变体的酶学性质 | 第68-69页 |
·通道附近突变体 A132C 和 N136D 对酶性质的影响 | 第69页 |
·远离活性位点的突变体对酶的性质影响 | 第69-70页 |
本章小结 | 第70-71页 |
全文结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
作者简历 | 第79页 |