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真菌果胶酶性质分析及分子改良

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
英文缩略表第9-15页
第一章 引言第15-23页
   ·果胶的结构第15-16页
   ·果胶酶的概述第16-18页
     ·果胶酶的分类及性质第16-17页
     ·果胶酶的来源和分布第17-18页
   ·果胶酶性质概况第18-19页
     ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)的性质第18-19页
     ·果胶酯酶(PE)的性质第19页
     ·果胶裂解酶(PL)的性质第19页
   ·果胶酶的晶体结构及催化第19-20页
     ·聚半乳糖醛酸酶的晶体结构及催化第19-20页
     ·果胶裂解酶的晶体结构第20页
     ·果胶酯酶的晶体结构第20页
   ·果胶酶的应用第20-22页
     ·果胶酶应用于食品工业第21页
     ·果胶酶应用于纺织业第21页
     ·果胶酶应用于造纸业第21页
     ·果胶酶应用于饲料行业第21页
     ·果胶酶应用于其他工业第21-22页
   ·本研究的目的与意义第22-23页
第二章 果胶酶基因的克隆与性质研究第23-56页
   ·本章引言第23页
   ·实验材料第23-24页
     ·菌种和质粒第23页
     ·引物合成及 DNA 测序第23页
     ·试剂盒、工具酶和生化试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·培养基组分第24页
     ·常用溶液第24页
     ·底物的配制第24页
   ·实验方法第24-36页
     ·菌株发酵活性的评估第24-25页
     ·基因组的提取第25页
     ·cDNA 的获得第25-28页
     ·基因全长的获得第28-29页
     ·表达载体的构建第29-32页
     ·重组质粒在毕赤酵母中的表达第32-34页
     ·果胶酶的浓缩及纯化第34页
     ·果胶酶的性质测定第34-35页
     ·应用实验第35-36页
   ·结果与分析第36-52页
     ·果胶酶基因的克隆第36-41页
     ·重组果胶甲酯酶 PE8F46 的异源表达,纯化及性质测定第41-44页
     ·来源于 N. fischeri P1 的果胶酶的纯化及性质测定第44-52页
   ·讨论第52-54页
 本章小结第54-56页
第三章 聚半乳糖醛酸酶 PG I 的改良第56-71页
   ·本章引言第56页
   ·实验材料第56-57页
     ·菌株、质粒第56页
     ·仪器试剂第56页
     ·培养基及溶液第56页
     ·引物合成及测序第56页
     ·序列及结构分析第56-57页
   ·实验方法第57-65页
     ·突变体位点的设计第57-64页
     ·突变体基因的构建及表达第64-65页
     ·突变体的性质测定第65页
   ·结果与分析第65-67页
     ·突变体的表达及纯化第65-66页
     ·突变体的性质测定第66-67页
   ·讨论第67-70页
     ·PG I 的 Loop 区关键位点突变体的酶学性质第68-69页
     ·通道附近突变体 A132C 和 N136D 对酶性质的影响第69页
     ·远离活性位点的突变体对酶的性质影响第69-70页
 本章小结第70-71页
全文结论第71-72页
参考文献第72-78页
致谢第78-79页
作者简历第79页

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