摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
图目录 | 第12-14页 |
表目录 | 第14-15页 |
英文缩略表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-25页 |
·双组分系统在碳代谢调控中的作用机制 | 第16页 |
·CbrB 蛋白的结构特征у功能分析 | 第16-17页 |
·CbrB 在代谢调控中的功能 | 第17-19页 |
·CbrB 调节多种碳氮源的利用 | 第17-18页 |
·CbrB 参у细胞泳动、生物膜的形成 | 第18页 |
·CbrB 改变体内金属离子的平衡 | 第18-19页 |
·CbrB у NtrC 存在功能т的偶联 | 第19页 |
·CbrB 在碳代谢抑制中的调控机制 | 第19-23页 |
·假单胞菌碳代谢抑制研究背景 | 第20页 |
·CbrB 对靶基因的转录调控机制 | 第20-21页 |
·假单胞菌属中 CbrAB-CrcZ/CrcY-Crc 参у碳代谢抑制调控模式 | 第21-23页 |
·立题依据和技术路线 | 第23-25页 |
·立题依据 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第24-25页 |
第二章 P.stutzeri A1501 CbrB 的功能鉴定 | 第25-57页 |
·材料 | 第25-28页 |
·菌株和质粒 | 第25-26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·抗生素 | 第27页 |
·酶类、生化试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·方法 | 第28-39页 |
·细菌基因组 DNA 的提取方法 | 第28页 |
·细菌质粒 DNA 的提取方法 | 第28页 |
·PCR 反应 | 第28-32页 |
·PCR 产物纯化 | 第32页 |
·PCR 产物у载体连接用于测序 | 第32-33页 |
·酶切及连接反应 | 第33-34页 |
·三亲结合 | 第34页 |
·生长曲线测定 | 第34-35页 |
·Biolog 分析突变株对碳源的利用情况 | 第35页 |
·固氮酶活的测定 | 第35-36页 |
·RNA 的提取 | 第36-37页 |
·RNA 反转成 cDNA | 第37页 |
·实时荧光定量 PCR | 第37-38页 |
·反硝化实验 | 第38-39页 |
·趋化实验 | 第39页 |
·数据库 | 第39页 |
·应用软件 | 第39页 |
·实验结果 | 第39-55页 |
·CbrB 蛋白结构和序列分析 | 第39-41页 |
·cbrB 启动子表达特性分析 | 第41-43页 |
·cbrB 缺失突变株和回补株的构建 | 第43-47页 |
·cbrB 突变株生理生化表型测定 | 第47-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第三章 P.stutzeri A1501 CbrB 参у的调控机制研究 | 第57-73页 |
·材料 | 第57-59页 |
·菌株和质粒 | 第57页 |
·培养基和溶液 | 第57-59页 |
·试剂盒及仪器设备 | 第59页 |
·方法 | 第59-65页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第59-60页 |
·几й质标签蛋白表达载体的构建 | 第60页 |
·CbrB 蛋白的表达у纯化 | 第60-62页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第62-63页 |
·凝胶阻滞实验方法 | 第63-65页 |
·结果 | 第65-71页 |
·cbrB 突变对 crcZ 和 crcY 表达的影响 | 第65-66页 |
·CbrB 蛋白表达载体的构建 | 第66-67页 |
·CbrB 蛋白的诱导у纯化 | 第67-68页 |
·CbrB 蛋白靶基因启动子区结合位点分析 | 第68-69页 |
·凝胶阻滞实验 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
第四章 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简历 | 第80-81页 |