| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·链霉菌概述 | 第9页 |
| ·棒酸简介 | 第9-10页 |
| ·棒酸稳定性 | 第10页 |
| ·棒酸合成基因簇及生物合成途径 | 第10-13页 |
| ·氮代谢 | 第13-17页 |
| ·氮代谢同化 | 第13-14页 |
| ·氮代谢调控 | 第14-15页 |
| ·精氨酸代谢 | 第15-17页 |
| ·氮代谢调节抗生素的产生 | 第17-19页 |
| ·氮源对棒酸合成影响 | 第19页 |
| ·高通量检测棒酸 | 第19-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·实验试剂 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·常规培养 | 第25页 |
| ·大肠杆菌质粒提取 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及DNA转化 | 第26页 |
| ·链霉菌基因组DNA的提取 | 第26页 |
| ·接合转移法将质粒导入链霉菌 | 第26-27页 |
| ·脲酶缺失株的构建 | 第27-28页 |
| ·棒酸发酵 | 第28页 |
| ·棒酸高效液相色谱检测 | 第28-29页 |
| ·生物量检测 | 第29页 |
| ·铵离子含量检测 | 第29页 |
| ·脲酶活性及脲含量检测 | 第29页 |
| ·双报告突变株筛选 | 第29页 |
| ·β-内酰胺酶粗酶液制备及酶活测定 | 第29-30页 |
| ·高通量显色法检测棒酸 | 第30页 |
| ·高通量显色法检测棒酸敏感性 | 第30-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-45页 |
| ·脲对棒酸合成影响实验结果 | 第31-38页 |
| ·基础实验 | 第31-33页 |
| ·脲添加对野生菌株S. clavuligerus NRRL 3585合成棒酸影响 | 第33页 |
| ·棒状链霉菌脲酶敲除株构建及发酵 | 第33-37页 |
| ·铵盐添加对棒酸产量影响 | 第37页 |
| ·不同pH对棒酸产量影响 | 第37-38页 |
| ·高通量显色检测棒酸实验结果 | 第38-42页 |
| ·β-内酰胺酶粗酶液酶活性 | 第38-39页 |
| ·高通量显色法检测棒酸标准曲线 | 第39-40页 |
| ·高通量显色法筛选突变株：出发菌株与双报告突变株棒酸产量比较 | 第40-41页 |
| ·高通量显色法检测3株高产株棒酸产量时间曲线 | 第41-42页 |
| ·高通量显色法裸眼检测棒酸 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·脲对棒酸产量影响讨论 | 第42-43页 |
| ·高通量显色法检测棒酸讨论 | 第43-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 5 展望 | 第46-47页 |
| 6 参考文献 | 第47-55页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第55-56页 |
| 8 致谢 | 第56页 |