| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 前言 | 第11-26页 |
| ·小麦抗纹枯病研究进展 | 第11-14页 |
| ·小麦纹枯病病原种类及致病力 | 第12页 |
| ·小麦纹枯病害发生的症状、规律及影响因素 | 第12-13页 |
| ·小麦纹枯病的症状与发病规律 | 第12-13页 |
| ·影响因素 | 第13页 |
| ·小麦对纹枯病的抗病机理与抗病遗传 | 第13-14页 |
| ·抗病机理 | 第13-14页 |
| ·抗性遗传 | 第14页 |
| ·植物分子的抗病机制 | 第14-18页 |
| ·植物抗病反应 | 第14-15页 |
| ·抗病(Resistance,R)基因及其利用 | 第15页 |
| ·R基因的抗病的作用模式 | 第15-16页 |
| ·R基因的结构特点 | 第16页 |
| ·R基因与持久、广谱抗病基因工程 | 第16-18页 |
| ·防卫基因 | 第18-20页 |
| ·脂质转移蛋白质及其在抗真菌基因工程中的应用 | 第18页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白及其在抗真菌基因工程中的应用 | 第18-19页 |
| ·抗菌肽SN1在抗真菌基因工程中的应用 | 第19-20页 |
| ·转因基小麦抗病的国内外研究现状 | 第20-24页 |
| ·小麦转基因技术的发展及主要技术方法 | 第20-22页 |
| ·PEG法 | 第20页 |
| ·电激法 | 第20页 |
| ·脂质体转化法 | 第20-21页 |
| ·基因枪法 | 第21页 |
| ·农杆菌法 | 第21页 |
| ·花粉管通道法 | 第21-22页 |
| ·植物基因克隆的研究进展 | 第22-23页 |
| ·植物抗病基因的分离克隆 | 第22页 |
| ·抗病基因的结构特点及其抗病分子机制 | 第22页 |
| ·抗病性改良 | 第22-23页 |
| ·小麦抗纹枯病基因研究进展 | 第23-24页 |
| ·乙烯响应因子的应用 | 第23-24页 |
| ·转Rs-AFP2基因小麦的分子分析及其纹枯病抗性 | 第24页 |
| ·本研究意义、研究内容、预期目标 | 第24-26页 |
| 2. 材料与方法 | 第26-46页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·病菌材料 | 第26页 |
| ·菌种和表达载体 | 第26页 |
| ·酶、主要试剂及试剂盒 | 第26页 |
| ·引物及测序 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-46页 |
| ·植物总RNA的提取及纯化 | 第27-28页 |
| ·器材处理 | 第27页 |
| ·试剂准备 | 第27页 |
| ·总RNA提取具体步骤 | 第27-28页 |
| ·RNA的纯化步骤 | 第28页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第28-29页 |
| ·植物防卫基因PvPGIP2, SN1的克隆 | 第29-30页 |
| ·PvPGIP2基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·SN1基因的克隆 | 第30页 |
| ·琼脂糖电泳法 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的回收 | 第31-32页 |
| ·转基因表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·SN1基因的植物表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·PvPGIP2基因克隆及植物表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·转化 | 第35-36页 |
| ·基因表达载体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·PvPGIP2表达载体PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·SN1表达载体PCR鉴定 | 第37页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第37-38页 |
| ·幼胚(成熟胚)基因枪转化方法 | 第38-39页 |
| ·基因总DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·转PvPGIP2、SN1基因小麦PCR检测 | 第40-42页 |
| ·转PvPGIP2基因PCR检测 | 第40-41页 |
| ·转SN1基因小麦PCR检测 | 第41-42页 |
| ·T2代转SN1小麦基因Southern分析 | 第42-44页 |
| ·Q-RT-PCR扩增方法 | 第44-45页 |
| ·小麦纹枯病培养、接种与鉴定 | 第45-46页 |
| ·小麦纹枯菌的牙签培养法 | 第45页 |
| ·小麦纹枯菌的麦粒培养法 | 第45页 |
| ·小麦纹枯病的接种与鉴定 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-55页 |
| ·植物表达载体的构建与转基因小麦的获得 | 第46-47页 |
| ·SNI基因转化载体的构建与转基因小麦的获得 | 第46页 |
| ·PVPGIP2基因转化载体的构建与转基因小麦的获得 | 第46-47页 |
| ·转基因小麦的分子检测 | 第47-49页 |
| ·转SN1基因小麦的分子检测 | 第47-48页 |
| ·转PvPGIP2基因小麦的分子检测 | 第48-49页 |
| ·转SN1基因小麦的Southern blot分析 | 第49-50页 |
| ·小麦的转录水平 | 第50-52页 |
| ·转SN1基因小麦中SN1的转录水平 | 第50-51页 |
| ·转PvPGIP2基因小麦中PvPGIP2的转录水平 | 第51-52页 |
| ·转基因小麦的纹枯病抗性 | 第52-54页 |
| ·转SN1基因小麦的纹枯病与根腐病抗性 | 第52-53页 |
| ·转PvPGIP2基因小麦的纹枯病抗性 | 第53-54页 |
| ·基因小麦的农艺性状调查 | 第54-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-59页 |
| ·PVPGIP2基因的表达量分析与抗病性关系 | 第55页 |
| ·SN1基因的表达量分析与抗病性关系 | 第55-56页 |
| ·转基因表达载体的构建与转基因植株的检测 | 第56-57页 |
| ·转SN1基因的拷贝数分析与抗病性关系 | 第57-59页 |
| 5. 结论 | 第59-60页 |
| ·转PVPGIP2基因小麦的获得与抗病性分析 | 第59页 |
| ·转SN1基因小麦的获得与抗病性分析 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录1. 本研究所使用引物名称及序列 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间发论文表情况 | 第71页 |
