| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-24页 |
| ·苹果的基本概况 | 第13-15页 |
| ·苹果的种类与分布 | 第13-14页 |
| ·苹果的品质 | 第14页 |
| ·红肉苹果研究进展 | 第14-15页 |
| ·花青素及其衍生物 | 第15-16页 |
| ·MYB 家族转录因子 | 第16-19页 |
| ·转录因子的基本概念 | 第16-17页 |
| ·MYB 家族转录因子 | 第17-19页 |
| ·MdMYB10 的功能研究 | 第19-20页 |
| ·MdMYB10 调控苹果果实颜色 | 第19页 |
| ·MdMYB10 影响苹果果实的其他品质 | 第19-20页 |
| ·RNA-seq | 第20-23页 |
| ·RNA-seq 原理 | 第20页 |
| ·RNA-seq 流程 | 第20-21页 |
| ·RNA-seq 测序文库制备 | 第21-22页 |
| ·RNA-seq 信息分析流程 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24页 |
| ·酶、试剂盒、生化试剂、培养基等 | 第24页 |
| ·仪器与设备 | 第24-25页 |
| ·PCR 引物 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-38页 |
| ·植物总 RNA 的提取 | 第25-27页 |
| ·CTAB 法提取 RNA | 第25-26页 |
| ·RNA-seq 总 RNA 提取 | 第26页 |
| ·总 RNA 提取 | 第26-27页 |
| ·Trizol 试剂盒法提取 RNA | 第27页 |
| ·总 RNA 含量与纯度检测 | 第27页 |
| ·植物 RNA 的纯化（除 DNA）方法 | 第27-28页 |
| ·反转录 | 第28页 |
| ·RT-PCR 实验体系 | 第28-29页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取及纯化 | 第29-30页 |
| ·天根植物基因组 DNA 提取试剂盒提取愈伤组织总 DNA | 第29页 |
| ·植物基因组 DNA 的纯化 | 第29-30页 |
| ·基因组 DNA 含量与纯度检测 | 第30页 |
| ·MdMYB10 基因的克隆 | 第30页 |
| ·PCR 扩增体系 | 第30页 |
| ·目的片段的回收 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第32页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 和 GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第32-33页 |
| ·转基因植物材料的获得 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导的苹果转化 | 第33页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导的番茄转化 | 第34页 |
| ·转基因植株的生物学鉴定分析 | 第34页 |
| ·转基因植株的基因组 DNA 鉴定 | 第34页 |
| ·转基因植株的 RT-PCR | 第34页 |
| ·相关生理指标测定 | 第34-35页 |
| ·气相色谱发乙烯释放速率的测定 | 第34-35页 |
| ·苹果糖酸含量提取液 | 第35页 |
| ·苹果果实硬度脆度的测定 | 第35页 |
| ·苹果果实甜度的计算 | 第35页 |
| ·蛋白技术 | 第35-38页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第35-36页 |
| ·转膜 | 第36-37页 |
| ·Western Blot 技术 | 第37页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-58页 |
| ·红肉苹果与白肉苹果中 MdMYB10 基因的表达差异 | 第38-40页 |
| ·果实不同发育时期，MdMYB10 基因的表达情况 | 第38-39页 |
| ·果实不同发育时期，MdMYB10 蛋白的表达情况 | 第39-40页 |
| ·红肉苹果与白肉苹果果实生理指标的测定 | 第40-43页 |
| ·红肉苹果与白肉苹果果实的单果重、硬度、脆度 | 第40页 |
| ·果实发育过程中红肉苹果与白肉苹果果实乙烯释放速率变化 | 第40-41页 |
| ·红肉苹果与白肉苹果果实乙烯相关基因的表达情况 | 第41-42页 |
| ·红星苹果着色后对红星苹果果实硬度、脆度、乙烯释放速率的影响 | 第42-43页 |
| ·红肉苹果和白肉苹果果实中糖酸含量 | 第43-46页 |
| ·红肉苹果和白肉苹果果实中糖含量 | 第43-44页 |
| ·红肉苹果和白肉苹果果实中酸含量 | 第44-45页 |
| ·红肉苹果和白肉苹果叶片中酸含量差异 | 第45-46页 |
| ·MdMYB10 基因影响果实品质的分子机理 | 第46-58页 |
| ·MdMYB10 转基因王林愈伤的获取 | 第46页 |
| ·野生型王林愈伤与 MdMYB10 转基因愈伤中苹果酸的含量 | 第46页 |
| ·野生型王林愈伤与 MdMYB10 转基因愈伤中酸相关基因的表达 | 第46-48页 |
| ·野生型王林愈伤与 MdMYB10 转基因愈伤 RNA 的提取 | 第48页 |
| ·野生型王林愈伤与 MdMYB10 转基因愈伤 RNA-seq 结果分析 | 第48-58页 |
| ·RNA-seq 测序数据质量评估 | 第49-50页 |
| ·RNA-seq 数据分析 | 第50-56页 |
| ·参考基因组选择 | 第50-51页 |
| ·读长比对 | 第51页 |
| ·表达差异基因分析 | 第51-53页 |
| ·表达差异基因的生物学功能分析 | 第53-56页 |
| ·表达差异显著基因功能注释 | 第56页 |
| ·表达差异显著基因定量 PCR 验证 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录 | 第67-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表和形成的学术论文 | 第84页 |
