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盐胁迫下番茄LeENH1基因的功能分析

符号说明第1-10页
中文摘要第10-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-27页
   ·盐胁迫对植物生长发育的影响第13-19页
     ·盐胁迫对植物的危害第13-14页
     ·植物细胞中 Na~+、K~(+)稳态的建立第14-17页
       ·植物细胞中 Na~+、K~(+)分布和生物功能第15-16页
       ·Na~+的吸收和跨膜转运途径第16页
       ·Na~+的外排和区域化第16-17页
       ·K~(+)的吸收和跨膜转运途径第17页
     ·离子平衡的重建和调节第17-19页
   ·盐胁迫对植物光合作用的影响第19页
     ·盐胁迫对光能吸收与转换的影响第19页
     ·盐胁迫对光合同化物的影响第19页
   ·活性氧的产生和清除系统第19-26页
     ·叶绿体产生活性氧的途径第20-22页
     ·活性氧的清除机制第22-24页
     ·植物叶绿体中的 ROS 清除第24-26页
   ·本实验的目的意义第26-27页
2 材料与方法第27-43页
   ·实验材料第27-28页
     ·植物材料与处理第27页
     ·菌株与质粒第27页
     ·酶与各种生化试剂第27-28页
     ·引物第28页
   ·实验方法第28-43页
     ·总 RNA 的提取第28-29页
     ·反转录 cDNA 第一条链的合成第29-30页
     ·番茄 LeENH1 基因的克隆第30页
     ·Real-Time PCR 体系及反应条件第30-31页
     ·植物基因组的提取第31-32页
     ·植物基因组的纯化第32页
     ·真核表达载体的构建第32-35页
       ·正义表达载体构建第32页
       ·连接反应第32-33页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第33页
       ·转化及克隆筛选第33-34页
       ·碱法小量提取质粒 DNA第34页
       ·质粒 DNA 的酶切鉴定第34-35页
       ·回收第35页
       ·DNA 序列测定第35页
     ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化第35-36页
     ·利用农杆菌介导转化烟草第36页
     ·转基因烟草植株的 PCR 检测第36-37页
       ·CTAB 微量法提取基因组 DNA第36-37页
       ·转基因植株的 PCR 筛选第37页
     ·LeENH1 的叶绿体定位第37-40页
       ·定位表达载体的构建第37-38页
       ·原生质体的分离步骤第38-39页
       ·转化原生质体的步骤第39-40页
     ·转基因植物生理指标的测定第40-43页
       ·转基因烟草的半定量 PCR 分析第40页
       ·NaCl 处理下番茄 LeENH1 表达 qRT-PCR 分析第40页
       ·番茄不同组织中 LeENH1 表达的 qRT-PCR 分析第40页
       ·光合气体交换参数的测定第40页
       ·叶绿素荧光参数的测定第40-41页
       ·电解质外渗量、H_2O_2的测定第41页
       ·膜脂过氧化程度分析第41页
       ·tAPX 酶活性测定第41页
       ·H_2O_2与 O_2~(·-)染色分析第41-42页
       ·叶绿素含量的测定第42页
       ·盐处理烟草种子发芽率和生长量测定第42页
       ·透射电镜样品的制作与离子浓度的微区区分第42页
       ·数据统计分析第42-43页
3 结果与分析第43-54页
   ·番茄 LeENH1 基因的分离第43页
   ·LeENH1 全长 cDNA 分析第43页
   ·LeENH1 的亚细胞定位第43-44页
   ·LeENH1 在番茄中的表达分析第44-45页
   ·LeENH1 基因在烟草中的遗传转化第45-47页
     ·表达载体的构建第45-46页
     ·转 LeENH1 基因植株的鉴定第46-47页
   ·LeENH1 调节烟草盐胁迫耐性及其机理第47-54页
4 讨论第54-57页
   ·LeENH1 基因编码一个叶绿体蛋白与 SOS2 蛋白一起调节盐胁迫响应第54页
   ·LeENH1 基因增强了植物对盐胁迫的耐性第54-56页
   ·LeENH1 基因过表达降低了植物盐胁迫的产生的 ROS 水平第56-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间发表论文情况第67页

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