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桃树组蛋白H3.3基因(PpH3.3)的克隆及表达特性研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-29页
   ·休眠概述第13-21页
     ·休眠的定义第13-14页
     ·休眠的界定第14页
     ·休眠的分类第14页
     ·休眠与细胞分裂第14-16页
     ·类休眠第16-17页
     ·内休眠第17-20页
       ·生长停止:使内休眠建立第17-19页
       ·内休眠的建立:使分生组织对促进生长的信号不敏感第19页
       ·内休眠的保持第19-20页
       ·内休眠的解除:能够生长第20页
     ·生态休眠第20-21页
   ·组蛋白第21-27页
     ·组蛋白共价修饰第21-25页
       ·组蛋白乙酰化修饰第21-23页
       ·组蛋白的泛素化修饰第23-24页
       ·组蛋白甲基化和去甲基化第24-25页
     ·组蛋白变体第25-27页
       ·H3 变体 H3.3第25-26页
       ·H3.3 在基因组的特定位置富集第26-27页
   ·休眠与表观遗传第27-28页
   ·本研究的目的及意义第28-29页
2 实验材料与方法第29-48页
   ·实验材料与处理第29-31页
     ·植物材料第29页
     ·实验处理第29页
     ·菌株和载体第29页
     ·生化试剂第29页
     ·引物第29-31页
   ·试验方法第31-48页
     ·RNA 提取第31页
       ·改良 CTAB 法第31页
     ·基因组 DNA 去除第31-32页
     ·cDNA 第一条链的合成第32-33页
     ·cDNA 全长序列的获得第33-38页
       ·PpH3.3 中间片段获得第33页
       ·PpH3.33′端序列的获得第33-34页
       ·PpH3.35′端序列的获得第34-37页
       ·cDNA 全长序列的获得第37-38页
     ·PpH3.3 全长基因组序列的获得第38-39页
       ·CTAB 法提取心叶烟基因组总 DNA第38页
       ·总 DNA 提取产物的纯化第38-39页
       ·基因组扩增反应第39页
     ·启动子的分离第39-40页
     ·电泳目的片段的回收第40-41页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第41页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第41-42页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第42页
     ·试剂盒质粒微量提取方案第42-43页
     ·定量分析第43-44页
       ·总 RNA 的提取第43页
       ·反转录 cDNA 第一条链的合成第43-44页
     ·植物表达载体的构建与转化第44-46页
       ·杨树表达载体构建第44页
       ·农杆菌 LBA4404 感受态制备第44页
       ·冻融法转化农杆菌第44-45页
       ·农杆菌介导转化杨树 84K第45-46页
     ·PpH3.3 启动子表达载体的构建第46-47页
       ·杨树表达载体构建第46页
       ·拟南芥的转化第46-47页
     ·GUS 组织化学染色第47-48页
3 结果与分析第48-61页
   ·PpH3.3 的分离第48-50页
     ·RNA 的提取及反转录第48页
     ·PpH3.33′片段的分离第48-49页
     ·PpH3.35′片段的分离第49页
     ·PpH3.3 全长 cDNA 的分离第49-50页
   ·PpH3.3 的序列分析第50-53页
     ·PpH3.3 的全长 cDNA 分析第50-51页
     ·PpH3.3 编码的蛋白质序列分析第51页
     ·PpH3.3 进化树分析第51-53页
   ·PpH3.3 基因组序列分析第53-54页
   ·PpH3.3 启动子序列分析第54-55页
   ·PpH3.3 基因的表达特性分析第55-57页
     ·自然休眠进程中 PpH3.3 的表达变化第55-56页
     ·高温和单氰胺对 PpH3.3 表达的影响第56-57页
   ·转拟南芥表达载体的构建第57-58页
   ·GUS 染色第58页
   ·转杨树 84K 正义表达载体的构建第58-59页
   ·转基因再生植株的获得第59页
   ·转基因植株的 PCR 鉴定第59-60页
   ·下一步的计划第60-61页
讨论第61-63页
结论第63-64页
参考文献第64-83页
致谢第83-84页
攻读学位期间发表的学术论文第84页

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