桃树组蛋白H3.3基因(PpH3.3)的克隆及表达特性研究
中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-29页 |
·休眠概述 | 第13-21页 |
·休眠的定义 | 第13-14页 |
·休眠的界定 | 第14页 |
·休眠的分类 | 第14页 |
·休眠与细胞分裂 | 第14-16页 |
·类休眠 | 第16-17页 |
·内休眠 | 第17-20页 |
·生长停止:使内休眠建立 | 第17-19页 |
·内休眠的建立:使分生组织对促进生长的信号不敏感 | 第19页 |
·内休眠的保持 | 第19-20页 |
·内休眠的解除:能够生长 | 第20页 |
·生态休眠 | 第20-21页 |
·组蛋白 | 第21-27页 |
·组蛋白共价修饰 | 第21-25页 |
·组蛋白乙酰化修饰 | 第21-23页 |
·组蛋白的泛素化修饰 | 第23-24页 |
·组蛋白甲基化和去甲基化 | 第24-25页 |
·组蛋白变体 | 第25-27页 |
·H3 变体 H3.3 | 第25-26页 |
·H3.3 在基因组的特定位置富集 | 第26-27页 |
·休眠与表观遗传 | 第27-28页 |
·本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
2 实验材料与方法 | 第29-48页 |
·实验材料与处理 | 第29-31页 |
·植物材料 | 第29页 |
·实验处理 | 第29页 |
·菌株和载体 | 第29页 |
·生化试剂 | 第29页 |
·引物 | 第29-31页 |
·试验方法 | 第31-48页 |
·RNA 提取 | 第31页 |
·改良 CTAB 法 | 第31页 |
·基因组 DNA 去除 | 第31-32页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第32-33页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第33-38页 |
·PpH3.3 中间片段获得 | 第33页 |
·PpH3.33′端序列的获得 | 第33-34页 |
·PpH3.35′端序列的获得 | 第34-37页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第37-38页 |
·PpH3.3 全长基因组序列的获得 | 第38-39页 |
·CTAB 法提取心叶烟基因组总 DNA | 第38页 |
·总 DNA 提取产物的纯化 | 第38-39页 |
·基因组扩增反应 | 第39页 |
·启动子的分离 | 第39-40页 |
·电泳目的片段的回收 | 第40-41页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第41页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第41-42页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第42页 |
·试剂盒质粒微量提取方案 | 第42-43页 |
·定量分析 | 第43-44页 |
·总 RNA 的提取 | 第43页 |
·反转录 cDNA 第一条链的合成 | 第43-44页 |
·植物表达载体的构建与转化 | 第44-46页 |
·杨树表达载体构建 | 第44页 |
·农杆菌 LBA4404 感受态制备 | 第44页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第44-45页 |
·农杆菌介导转化杨树 84K | 第45-46页 |
·PpH3.3 启动子表达载体的构建 | 第46-47页 |
·杨树表达载体构建 | 第46页 |
·拟南芥的转化 | 第46-47页 |
·GUS 组织化学染色 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-61页 |
·PpH3.3 的分离 | 第48-50页 |
·RNA 的提取及反转录 | 第48页 |
·PpH3.33′片段的分离 | 第48-49页 |
·PpH3.35′片段的分离 | 第49页 |
·PpH3.3 全长 cDNA 的分离 | 第49-50页 |
·PpH3.3 的序列分析 | 第50-53页 |
·PpH3.3 的全长 cDNA 分析 | 第50-51页 |
·PpH3.3 编码的蛋白质序列分析 | 第51页 |
·PpH3.3 进化树分析 | 第51-53页 |
·PpH3.3 基因组序列分析 | 第53-54页 |
·PpH3.3 启动子序列分析 | 第54-55页 |
·PpH3.3 基因的表达特性分析 | 第55-57页 |
·自然休眠进程中 PpH3.3 的表达变化 | 第55-56页 |
·高温和单氰胺对 PpH3.3 表达的影响 | 第56-57页 |
·转拟南芥表达载体的构建 | 第57-58页 |
·GUS 染色 | 第58页 |
·转杨树 84K 正义表达载体的构建 | 第58-59页 |
·转基因再生植株的获得 | 第59页 |
·转基因植株的 PCR 鉴定 | 第59-60页 |
·下一步的计划 | 第60-61页 |
讨论 | 第61-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第84页 |