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薯蓣皂甙元酶联免疫吸附(ELISA)定量分析方法的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRCT第6-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·薯蓣皂甙元简介第12-13页
   ·薯蓣资源概况第13-15页
   ·薯蓣皂甙元定量分析方法第15-17页
   ·酶联免疫吸附法第17-22页
     ·酶联免疫测定的基本原理第17页
     ·酶联免疫测定的类型第17-18页
     ·ELISA的应用第18-19页
     ·小分子物质的ELISA检测第19-22页
   ·本课题的研究意义第22页
   ·本研究的主要内容第22-23页
第二章 薯蓣皂甙元的衍生化—薯蓣皂甙元丁二酸单酯的制备第23-40页
   ·前言第23-24页
   ·实验部分第24-29页
     ·主要仪器与试剂第24-25页
     ·实验方法第25-29页
       ·产物的合成第25页
       ·以TLC定性检测反应进程第25-26页
       ·以HPLC检测甙元转化率第26页
       ·反应条件的优化第26-27页
       ·产物的分离、纯化—制备液相法第27-28页
       ·产物的分离纯化—硫酸析出法第28-29页
       ·产物Ⅱ的液相检测第29页
       ·薯蓣皂甙元及产物的谱图测定第29页
   ·结果与讨论第29-38页
     ·不同合成条件的比较第29-30页
     ·薯蓣皂甙元转化率的测定第30页
     ·反应条件的优化第30-32页
     ·产物Ⅰ的鉴定第32-34页
     ·产物Ⅱ的鉴定第34-38页
   ·本章小结第38-40页
第三章 薯蓣皂甙元丁二酸单酯与蛋白的连接第40-51页
   ·前言第40页
   ·实验部分第40-45页
     ·主要试剂与仪器第40-41页
     ·实验方法第41-45页
       ·薯蓣皂甙元与BSA结合物(DG-HS-BSA)的制备第41-43页
       ·薯蓣皂甙元与OVA结合物(DG-HS-OVA)的制备第43-44页
       ·结合物中薯蓣皂甙元连接数的测定—紫外分光光度法第44页
       ·结合物中薯蓣皂甙元连接数的测定—TNBS法第44-45页
   ·结果第45-48页
     ·紫外分光光度法测定3.2.1.1(1)反应结合率第45-46页
     ·BSA中游离氨基的标准曲线第46-47页
     ·OVA中游离氨基的标准曲线第47-48页
     ·结合物中薯蓣皂甙元连接数的测定结果第48页
   ·讨论第48-50页
   ·本章小结第50-51页
第四章 抗薯蓣皂甙元抗体的制备第51-58页
   ·前言第51页
   ·实验部分第51-55页
     ·试剂与仪器第51-52页
     ·实验方法第52-55页
       ·免疫动物和取血第52-54页
       ·免疫印迹法定性检测抗体第54-55页
   ·结果与讨论第55-57页
     ·两种乳化方法的比较第55-56页
     ·免疫印迹法检测结果第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第五章 薯蓣皂甙元ELISA检测实验条件的建立第58-69页
   ·前言第58页
   ·实验部分第58-62页
     ·试剂与仪器第58-59页
     ·实验方法第59-62页
       ·溶液的配制第59-60页
       ·二抗与板的非特异性吸附研究第60页
       ·血清与板的非特异性吸附研究第60页
       ·不同的包被条件对空白OD值的影响第60页
       ·方阵滴定法确定包被原浓度第60-61页
       ·血样2-1、3-1抗体效价的测定第61页
       ·薯蓣皂甙元ELISA检测的线性关系考察第61-62页
       ·细胞中薯蓣皂甙元含量的ELISA检测第62页
   ·结果与讨论第62-68页
     ·二抗与板的非特异性吸附测定结果第62-63页
     ·血清与板的非特异性吸附测定结果第63页
     ·不同的包被条件对空白OD值的影响第63-64页
     ·方阵滴定法确定包被原工作浓度第64-65页
     ·血样2-1、3-1效价测定结果第65-66页
     ·薯蓣皂甙元标准曲线的绘制第66-67页
     ·细胞中薯蓣皂甙元含量的ELISA检测结果第67-68页
   ·本章小结第68-69页
第六章 结论与展望第69-71页
   ·本研究主要结论第69-70页
   ·今后工作展望第70-71页
参考文献第71-76页
附表第76-79页
附录第79-80页
致谢第80页

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