| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 研究概述 | 第12-27页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的异源表达 | 第12-19页 |
| ·比较常见的几种融合蛋白标签的介绍 | 第12-16页 |
| ·E.coli表达系统 | 第16-19页 |
| ·RI-SBPASE和CY-SBPASE/FBPASE的研究背景 | 第19-26页 |
| ·Ri-SBPase的研究背景 | 第19-23页 |
| ·Cy-SBPase/FBPase的研究背景 | 第23-26页 |
| ·本文立题思想 | 第26-27页 |
| 第二章 水稻景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶的表达纯化研究 | 第27-45页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·主要实验仪器 | 第27-28页 |
| ·主要实验药品 | 第28-29页 |
| ·实验用到的质粒和菌株 | 第29页 |
| ·实验溶液的配制 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·质粒的提取与序列鉴定 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第31页 |
| ·质粒的转化 | 第31页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE的分析 | 第31-32页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第32-33页 |
| ·GST-RISBPASE的构建及表达纯化 | 第33-35页 |
| ·pGEX-5X-RiSBPase的构建及表达纯化 | 第33-34页 |
| ·pGEX-6P-RiSBPase/BL-21构建及表达纯化 | 第34-35页 |
| ·HIS-RISBPASE表达系统的构建及表达纯化 | 第35-36页 |
| ·pET-30a-RiSBPase/BL-21的表达系统的构建及表达纯化 | 第35页 |
| ·pET-30a-RiSBPase/BL-21的表达 | 第35页 |
| ·pET-30a-RiSBPase/BL-21的纯化 | 第35-36页 |
| ·PMAL-C_2X-RISBPASE/TB 1构建和表达纯化 | 第36-37页 |
| ·pMAL-C_2X-RiSBPase/TB 1的构建 | 第36页 |
| ·pMAL-C_2X-RiSBPase/TB 1的表达 | 第36页 |
| ·pMAL-C_2X-RiSBPase/TB 1的纯化 | 第36-37页 |
| ·PCOLD Ⅱ-RISBPASE/PG-TF_2/BL 21的构建和表达纯化 | 第37-38页 |
| ·pCold Ⅱ-RiSBPase/PG-TF_2/BL 21构建 | 第37页 |
| ·pCold Ⅱ-RiSBPase/PG-TF_2/BL 21的表达 | 第37页 |
| ·pCold Ⅱ-RiSBPase/PG-TF_2/BL 21的纯化 | 第37-38页 |
| ·实验结果与讨论 | 第38-44页 |
| ·pGEX-5X-RiSBPase/BL-21,pGEX-6P-RiSBPase/BL-21构建 | 第38-40页 |
| ·pGEX-5X-RiSBPase/BL-21,pGEX-6P-RiSBPase/BL-21的蛋白表达 | 第40页 |
| ·pET-30a-RiSBPase/BL-21的构建和表达纯化 | 第40-41页 |
| ·pMAL C_2X-RiSBPase/TB 1的构建和表达纯化 | 第41-42页 |
| ·pCold Ⅱ-RiSBPase/PG-TF_2/BL 21的构建和蛋白表达纯化 | 第42-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 水稻SBPASE酶动力学性质的研究 | 第45-57页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-50页 |
| ·蛋白含量测定 | 第46-47页 |
| ·酶活性的测定 | 第47页 |
| ·Ri-SBPase最适pH的研究 | 第47页 |
| ·Ri-SBPase最适反应温度的研究 | 第47-48页 |
| ·Ri-SBPase镁离子Ka的研究以及其他金属离子对其活性的影响 | 第48-49页 |
| ·Ri-SBPase最适DTT浓度的研究 | 第49页 |
| ·Ri-SBPase底物Km的研究 | 第49页 |
| ·Ri-SBPase底物选择性 | 第49-50页 |
| ·实验结果与讨论 | 第50-56页 |
| ·重组水稻景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶的表达纯化 | 第50-51页 |
| ·Ri-SBPase酶学性质的研究 | 第51-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 以RI-SBPASE为靶酶的抑制剂筛选 | 第57-64页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·试验材料 | 第57-58页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·试验方法 | 第58-59页 |
| ·抑制剂的初步筛选 | 第58页 |
| ·高抑制率化合物对Ri-SBPase的IC_(50)的测定 | 第58-59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-63页 |
| ·化合物初筛结果 | 第59-62页 |
| ·高抑制率化合物的IC_(50)的测定结果 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 以蓝藻FBP/SBPASE为靶酶的抑制剂筛选 | 第64-77页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·试验材料 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·试验方法 | 第64-65页 |
| ·化合物初筛 | 第64页 |
| ·高抑制率化合物对水稻SBPase的IC_(50)的测定 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-76页 |
| ·高抑制率化合物的IC_(50)的测定结果 | 第69-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 全文总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 在校期间发表的论文、科研成果等 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
