摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
1. 前言 | 第10-20页 |
·蛋白质组学介绍 | 第10-13页 |
·蛋白质定量 | 第10-11页 |
·精子蛋白质组学研究进展 | 第11-13页 |
·质谱综述 | 第13-14页 |
·质谱技术综述 | 第13页 |
·LTQ Orbitrap XL 质谱仪介绍 | 第13-14页 |
·iTRAQ技术介绍 | 第14-15页 |
·Wolbachia与细胞质不亲和 | 第15-17页 |
·雄附腺蛋白综述 | 第17-18页 |
·本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
2. 材料和方法 | 第20-31页 |
·实验材料 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第21-22页 |
·载体和菌株 | 第22页 |
·常用的试剂及培养基 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
·果蝇饲养 | 第23页 |
·果蝇基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
·果蝇中Wolbachia基因的检测 | 第24页 |
·果蝇精子蛋白提取 | 第24页 |
·iTRAQ labeling | 第24-25页 |
·在LTQ-Orbitrap XL质谱仪上进行LC-MS/MS分析 | 第25-26页 |
·蛋白质谱数据分析 | 第26页 |
·果蝇精巢RNA的提取及cDNA的合成 | 第26-28页 |
·抗体制作方法 | 第28-31页 |
3. 结果与讨论 | 第31-46页 |
·果蝇体内Wolbachia的检测 | 第31页 |
·iTRAQ的标记效率 | 第31-32页 |
·对蛋白质组总体分析 | 第32-34页 |
·定量蛋白分析 | 第34-36页 |
·差异表达蛋白分析 | 第36-41页 |
·GO分析差异表达蛋白 | 第36-38页 |
·string分析差异表达蛋白 | 第38-41页 |
·抗体制备 | 第41-44页 |
·扩增目的片段 | 第42页 |
·双酶切构建重组载体 | 第42-43页 |
·诱导表达目的蛋白 | 第43页 |
·获取抗体并效价 | 第43-44页 |
·利用Western Blot,验证质谱实验结果 | 第44-46页 |
4. 小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |