| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 犬瘟热研究进展 | 第14-32页 |
| 1 概述 | 第14-15页 |
| 2 病原学 | 第15-19页 |
| ·主要特性 | 第15页 |
| ·培养特性 | 第15-16页 |
| ·基因组结构与功能 | 第16-19页 |
| 3 诊断 | 第19-22页 |
| ·病毒的分离 | 第19页 |
| ·包涵体检查 | 第19页 |
| ·电镜诊断 | 第19-20页 |
| ·免疫学检测方法 | 第20-21页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第21-22页 |
| 4 防控 | 第22-25页 |
| ·免疫预防 | 第22-24页 |
| ·治疗 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-32页 |
| 第二篇 试验研究 | 第32-90页 |
| 第一章 犬瘟热病毒的分离及其核衣壳蛋白基因序列分析 | 第32-48页 |
| 摘要 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-37页 |
| ·细胞和毒株 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·病料采集与处理 | 第33-34页 |
| ·病毒分离培养 | 第34页 |
| ·病毒电镜检查 | 第34页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第34页 |
| ·N基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·N基因的克隆 | 第35-36页 |
| ·N基因序列分析 | 第36页 |
| ·N基因原核表达质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·原核表达质粒的诱导表达 | 第37页 |
| ·重组N蛋白的抗原性分析 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-42页 |
| ·病毒分离培养 | 第37-38页 |
| ·病毒电镜检查 | 第38页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第38-39页 |
| ·N基因的扩增与克隆 | 第39-40页 |
| ·N基因的序列分析 | 第40-41页 |
| ·N基因原核表达质粒的构建 | 第41页 |
| ·原核表达质粒的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·重组N蛋白的抗原性分析 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| Abstract | 第46-48页 |
| 第二章 分泌犬瘟热病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第48-62页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| 1 材料与方法 | 第49-53页 |
| ·细胞、病毒和动物 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·CDV抗原的制备 | 第49-50页 |
| ·动物免疫 | 第50页 |
| ·细胞融合 | 第50页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第50页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的克隆化 | 第50-51页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第51页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数 | 第51页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定与效价测定 | 第51-52页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第52页 |
| ·单克隆抗体的中和活性测定 | 第52页 |
| ·单克隆抗体抗原识别位点的差异性分析 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·CDV抗原的制备 | 第53页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第53-54页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数 | 第54页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定与效价测定 | 第54-55页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第55-56页 |
| ·单克隆抗体的中和活性测定 | 第56页 |
| ·单克隆抗体抗原识别位点的差异性分析 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| Abstract | 第60-62页 |
| 第三章 犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第62-74页 |
| 摘要 | 第62-63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·病毒与抗体 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第63页 |
| ·单克隆抗体的标记 | 第63-64页 |
| ·单克隆抗体配对试验 | 第64页 |
| ·包被抗体和酶标抗体工作浓度的优化 | 第64页 |
| ·包被条件的优化 | 第64页 |
| ·封闭液的优化 | 第64页 |
| ·酶标抗体作用时间的优化 | 第64-65页 |
| ·特异性试验 | 第65页 |
| ·敏感性试验 | 第65页 |
| ·重复性试验 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-70页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第65-66页 |
| ·单克隆抗体配对试验 | 第66页 |
| ·包被单抗和酶标单抗工作浓度的优化 | 第66-67页 |
| ·包被条件的优化 | 第67页 |
| ·封闭液的优化 | 第67-68页 |
| ·酶标单抗反应时间的优化 | 第68页 |
| ·特异性试验 | 第68-69页 |
| ·敏感性试验 | 第69页 |
| ·重复性试验 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| Abstract | 第73-74页 |
| 第四章 犬瘟热病毒单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的制备 | 第74-84页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| 1 材料和方法 | 第75-78页 |
| ·主要试剂 | 第75页 |
| ·主要材料 | 第75页 |
| ·单克隆抗体纯化 | 第75页 |
| ·胶体金溶液的制备 | 第75-76页 |
| ·胶体金标记抗体的制备 | 第76页 |
| ·金标抗体玻璃纤维素膜的制备 | 第76页 |
| ·包被抗体硝酸纤维素膜的制备 | 第76-77页 |
| ·胶体金免疫层析检测试纸条的组装 | 第77页 |
| ·试纸条的特异性 | 第77页 |
| ·试纸条的敏感性 | 第77-78页 |
| ·试纸条的重复性 | 第78页 |
| 2 结果 | 第78-80页 |
| ·单克隆抗体腹水纯化 | 第78页 |
| ·胶体金溶液的制备 | 第78页 |
| ·胶体金标记抗体的制备 | 第78-79页 |
| ·金标抗体玻璃纤维素膜的制备 | 第79页 |
| ·包被抗体硝酸纤维素膜的制备 | 第79页 |
| ·胶体金免疫层析检测试纸条的组装 | 第79页 |
| ·试纸条的特异性 | 第79-80页 |
| ·试纸条的敏感性 | 第80页 |
| ·试纸条的重复性 | 第80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-83页 |
| Abstract | 第83-84页 |
| 第五章 犬瘟热单克隆抗体治疗剂的制备 | 第84-90页 |
| 摘要 | 第84页 |
| 1 材料与方法 | 第84-86页 |
| ·细胞与试验动物 | 第84页 |
| ·单克隆抗体小鼠腹水的制备 | 第84-85页 |
| ·单克隆抗体中和活性测定 | 第85页 |
| ·单克隆抗体治疗剂的制备 | 第85页 |
| ·单克隆抗体治疗剂的临床治疗试验 | 第85-86页 |
| 2 结果 | 第86页 |
| ·单克隆抗体中和活性测定 | 第86页 |
| ·CD患病犬的治疗 | 第86页 |
| 3 讨论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-89页 |
| Abstract | 第89-90页 |
| 全文总结 | 第90-92页 |
| 附录 | 第92-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第98页 |
