| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 文献综述 | 第14-36页 |
| 1 汞对植物的毒害作用 | 第14-19页 |
| ·汞的存在形式及在植物中的吸收与转运 | 第14-15页 |
| ·植物对Hg毒害的反应 | 第15-19页 |
| ·光合作用 | 第15页 |
| ·细胞膜透性 | 第15-16页 |
| ·相关基因和(酶)蛋白的反应 | 第16页 |
| ·植物螯合素 | 第16-17页 |
| ·氧化胁迫反应 | 第17-19页 |
| 2 水杨酸与胁迫响应 | 第19-23页 |
| ·植物中水杨酸对胁迫的调节作用 | 第19-21页 |
| ·植物中水杨酸调节胁迫的机理 | 第21-23页 |
| ·ROS可能介导了SA调节胁迫的过程 | 第21-22页 |
| ·与Ca~(2+)信使系统有关 | 第22页 |
| ·与蛋白质的磷酸化与去磷酸化反应有关 | 第22-23页 |
| 3 microRNAs | 第23-32页 |
| ·microRNAs的生物合成 | 第24-25页 |
| ·microRNAs作用靶基因的机制 | 第25-26页 |
| ·miRNA、siRNA和piRNA的关系 | 第26页 |
| ·miRNAs研究的技术和方法 | 第26-30页 |
| ·miRNAs生物功能 | 第30-32页 |
| ·miRNAs与植物生长发育 | 第30-31页 |
| ·miRNAs与逆境胁迫 | 第31-32页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第32-36页 |
| 第一章 紫花苜蓿根中汞诱导的氧化胁迫及响应机制 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·材料培养与处理 | 第36页 |
| ·生理指标测定 | 第36-37页 |
| ·生理反应组织染色 | 第37-38页 |
| ·酶活性测定 | 第38-39页 |
| ·同工酶电泳 | 第39-40页 |
| ·统计分析 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-48页 |
| ·汞对紫花苜蓿根生长和脂质过氧化的影响 | 第40-43页 |
| ·汞对紫花苜蓿根中H_2O_2水平和NADH氧化酶活性的影响 | 第43-44页 |
| ·汞对紫花苜蓿根中抗氧化酶活性的影响 | 第44-46页 |
| ·汞对紫花苜蓿根中抗氧化物含量的影响 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第二章 紫花苜蓿叶片中汞诱导的氧化胁迫及响应机制 | 第50-64页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料培养与处理 | 第50页 |
| ·生理指标测定 | 第50页 |
| ·生理反应组织染色 | 第50-51页 |
| ·酶活性的测定 | 第51页 |
| ·同工酶电泳 | 第51-52页 |
| ·统计分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-60页 |
| ·汞对紫花苜蓿叶中O_2~-,H_2O_2水平和NADH氧化酶活性的影响 | 第52-55页 |
| ·汞对紫花苜蓿叶中脂质过氧化的影响 | 第55-56页 |
| ·汞对紫花苜蓿叶中抗氧化酶活性的影响 | 第56-59页 |
| ·汞对紫花苜蓿叶中ASC和GSH含量的影响 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-64页 |
| 第三章 外源SA缓解紫花苜蓿根中汞诱导的氧化胁迫 | 第64-76页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·实验培养与处理 | 第64页 |
| ·生理指标测定 | 第64-65页 |
| ·生理反应组织染色 | 第65页 |
| ·酶活性的测定 | 第65页 |
| ·同工酶电泳 | 第65-66页 |
| ·统计分析 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-73页 |
| ·SA对紫花苜蓿根中汞诱导的氧化胁迫的影响 | 第66-70页 |
| ·SA对紫花苜蓿在汞胁迫下根中抗氧化酶活性的影响 | 第70-72页 |
| ·SA对紫花苜蓿在汞胁迫下根中抗氧化剂含量的影响 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| 第四章 蒺藜苜蓿miRNAs及其靶基因的生物信息学预测和验证 | 第76-96页 |
| 1 材料与方法 | 第76-85页 |
| ·材料培养与处理 | 第76页 |
| ·生物信息学方法 | 第76-79页 |
| ·相关数据库 | 第76页 |
| ·应用软件 | 第76-77页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs的预测 | 第77-78页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs靶基因预测 | 第78-79页 |
| ·分子生物学方法验证miRAs | 第79-85页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第79-81页 |
| ·miRNAs克隆 | 第81-85页 |
| ·总RNA提取与质量检测 | 第81页 |
| ·RNA 3'末端加ploy(A) | 第81-82页 |
| ·cDNA合成及miRNAs扩增 | 第82-83页 |
| ·miRNAs目的片段回收 | 第83页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第83-84页 |
| ·目的片段转化及鉴定 | 第84-85页 |
| 2 结果与讨论 | 第85-96页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs的预测 | 第85-90页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs的筛选依据 | 第85-87页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs的多样性 | 第87-90页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs靶基因的预测和主要功能分析 | 第90-91页 |
| ·蒺藜苜蓿miRNAs的实验验证和表达 | 第91-96页 |
| ·实验验证 | 第91-92页 |
| ·miRNAs表达结果与分析 | 第92-96页 |
| 第五章 蒺藜苜蓿miRNAs的分子克隆 | 第96-106页 |
| 1 材料与方法 | 第96-100页 |
| ·材料培养与处理 | 第96页 |
| ·直接克隆法分离和鉴定miRNAs | 第96-100页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第96-97页 |
| ·miRNAs克隆 | 第97-100页 |
| ·总RNA提取 | 第97-98页 |
| ·小片段RNA的纯化和回收 | 第98页 |
| ·小RNA克隆 | 第98页 |
| ·目的片段与载体连接及转化 | 第98-99页 |
| ·目的片段鉴定 | 第99-100页 |
| ·生物信息学分析miRNAs | 第100页 |
| ·相关数据库 | 第100页 |
| ·应用软件 | 第100页 |
| ·miRNAs鉴定 | 第100页 |
| 2 结果与讨论 | 第100-104页 |
| 3 工作展望 | 第104-106页 |
| 全文小结 | 第106-108页 |
| 创新点 | 第108-110页 |
| 存在问题及工作展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-132页 |
| 附录 | 第132-140页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
