摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-25页 |
·水产业养殖现状 | 第11页 |
·迟钝爱德华氏菌的研究 | 第11-15页 |
·迟钝爱德华氏菌及危害 | 第11-12页 |
·迟钝爱德华氏菌的致病机理 | 第12-14页 |
·迟钝爱德华氏菌的防治 | 第14-15页 |
·保护性抗原蛋白GAPDH | 第15-20页 |
·GAPDH蛋白 | 第15-16页 |
·GAPDH蛋白的功能 | 第16-18页 |
·GAPDH的免疫学研究 | 第18-20页 |
·鱼类免疫系统 | 第20-24页 |
·鱼类免疫系统组成 | 第20-22页 |
·鱼非特异性免疫 | 第22-23页 |
·鱼特异性免疫 | 第23-24页 |
·课题的研究内容及意义 | 第24-25页 |
第2章 重组GAPDH免疫大菱鲆保护效果分析 | 第25-46页 |
·前言 | 第25页 |
·实验材料 | 第25-30页 |
·实验试剂 | 第25-27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·菌株、质粒及培养基 | 第27-29页 |
·引物与软件 | 第29页 |
·实验动物 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-38页 |
·重组质粒的构建 | 第30-33页 |
·GAPDH蛋白的表达与纯化 | 第33-35页 |
·Western blot | 第35-36页 |
·免疫与攻毒 | 第36页 |
·采血 | 第36页 |
·ELISA检测血清中抗体效价 | 第36-37页 |
·血清中杀菌活力的测定 | 第37页 |
·GAPDH蛋白的交叉保护性分析 | 第37-38页 |
·结果与讨论 | 第38-44页 |
·GAPDH重组表达质粒的构建 | 第38-39页 |
·GAPDH蛋白的表达与纯化 | 第39-40页 |
·纯化的GAPDH蛋白的特异性分析 | 第40-41页 |
·GAPDH蛋白的保护力分析 | 第41-42页 |
·血清中的抗体效价 | 第42-43页 |
·杀菌活性分析 | 第43-44页 |
·GAPDH的免疫交叉保护作用 | 第44页 |
·本章小结 | 第44-46页 |
第3章 重组GAPDH蛋白免疫大菱鲆相关免疫因子应答分析 | 第46-55页 |
·前言 | 第46页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·实验试剂 | 第46页 |
·实验仪器 | 第46页 |
·引物与软件 | 第46-47页 |
·实验动物 | 第47页 |
·组织 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·RNA的抽提 | 第47-48页 |
·cDNA的合成 | 第48页 |
·荧光定量PCR | 第48-49页 |
·结果与讨论 | 第49-54页 |
·组织取样 | 第49页 |
·各免疫组织RNA抽提结果 | 第49页 |
·GAPDH免疫后大菱鲆肝脏的免疫应答 | 第49-52页 |
·GAPDH免疫后大菱鲆脾脏的免疫应答 | 第52-53页 |
·GAPDH免疫后大菱鲆肾脏的免疫应答 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-55页 |
第4章 抗原蛋白GAPDH免疫保护关键区段的筛选 | 第55-67页 |
·前言 | 第55页 |
·实验材料 | 第55-57页 |
·实验试剂 | 第55页 |
·实验仪器 | 第55-56页 |
·菌株、质粒及培养基 | 第56页 |
·引物与软件 | 第56页 |
·实验动物 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-60页 |
·实验方案 | 第57-58页 |
·构建包含△gapA的重组质粒 | 第58-59页 |
·overlap PCR | 第58-59页 |
·AgapA连接至表达载体 | 第59页 |
·片段GAPDH蛋白的表达与纯化 | 第59页 |
·斑马鱼免疫与攻毒 | 第59页 |
·片段GAPDH免疫保护率分析 | 第59-60页 |
·结果与讨论 | 第60-66页 |
·含AgapA的重组质粒构建 | 第60-63页 |
·片段GAPDH蛋白的表达 | 第63-64页 |
·片段GAPDH免疫保护率分析 | 第64-66页 |
·本章小结 | 第66-67页 |
第5章 结论与展望 | 第67-68页 |
·结论 | 第67页 |
·展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73页 |