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解淀粉芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶的高效表达

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 前言第7-17页
   ·β-葡聚糖概述第7-9页
     ·β-葡聚糖的结构与性质第7-8页
     ·β-葡聚糖在啤酒生产中的影响第8页
     ·β-葡聚糖在饲料生产中的影响第8-9页
   ·β-葡聚糖酶概述第9-11页
     ·β-葡聚糖酶的分类第9页
     ·β-葡聚糖酶的来源第9-10页
     ·β-葡聚糖酶的结构和作用机理第10-11页
     ·β-葡聚糖酶的酶学性质第11页
   ·β-葡聚糖酶的应用第11-13页
     ·β-葡聚糖酶在啤酒工业中的应用第11-12页
     ·β-葡聚糖酶在饲料行业中的应用第12-13页
   ·β-葡聚糖酶的研究进展第13-14页
   ·本课题的立题意义与研究内容第14-17页
第二章 材料与方法第17-27页
   ·菌株与质粒第17页
   ·工具酶与试剂第17-19页
     ·酶与试剂盒第17页
     ·酶活测定试剂第17页
     ·SDS-PAGE 蛋白电泳试剂第17-18页
     ·质粒、染色体DNA 提取与纯化试剂第18-19页
   ·培养基与培养条件第19页
   ·实验方法第19-24页
     ·常见分子克隆操作第19页
     ·解淀粉芽孢杆菌CICIM B4801 染色体DNA 提取第19-20页
     ·枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌质粒DNA 提取第20页
     ·大肠杆菌感受态的制备与转化第20-21页
     ·枯草芽孢杆菌感受态的制备与转化第21页
     ·解淀粉芽孢杆菌转化第21-22页
     ·解淀粉芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因的扩增第22页
     ·发酵试验第22页
     ·表达产物SDS-PAGE 蛋白电泳第22页
     ·重组菌β-葡聚糖酶酶活测定第22-23页
     ·β-葡聚糖酶酶学性质的研究第23页
     ·重组菌摇瓶发酵条件的优化第23-24页
     ·发酵罐发酵实验第24页
     ·重组质粒稳定性分析第24页
   ·主要仪器第24-27页
第三章 结果与讨论第27-41页
   ·解淀粉芽孢杆菌bglA 基因的克隆与鉴定第27-30页
     ·解淀粉芽孢杆菌bglA 基因的克隆第27页
     ·重组表达载体pUB-PQ-bglA 的构建第27-30页
   ·重组质粒pUB-PQ-bglA 在B. amyloliquefaciens 中表达第30-35页
     ·摇瓶发酵条件优化第31-34页
     ·重组菌摇瓶发酵第34-35页
     ·表达产物SDS-PAGE 蛋白电泳分析第35页
   ·重组酶酶学性质分析第35-38页
     ·β-葡聚糖酶最适反应温度及其温度稳定性第35-36页
     ·β-葡聚糖酶最适反应pH 值及其pH 稳定性第36-37页
     ·金属离子及部分化学试剂对β-葡聚糖酶酶活的影响第37-38页
   ·重组菌发酵罐发酵第38-39页
   ·重组质粒稳定性分析第39-41页
主要结论第41-43页
致谢第43-45页
参考文献第45-51页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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