摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
文献综述 | 第12-22页 |
第一章 microRNA 研究进展 | 第12-18页 |
·miRNA 基因组学 | 第12-13页 |
·miRNA 的生物起源 | 第13页 |
·miRNA 与siRNA 的区别 | 第13-15页 |
·miRNA 靶标预测的种子序列 | 第15页 |
·Supplement 和 Compensatory 位点 | 第15-18页 |
第二章 miRNA 与病毒 | 第18-22页 |
·病毒miRNA 及其靶标 | 第18页 |
·细胞miRNA 及其病毒靶标 | 第18页 |
·病毒miRNA 的多种功能 | 第18-20页 |
·干扰宿主细胞的基因表达 | 第20页 |
·细胞miRNA 在病毒感染中的作用 | 第20-22页 |
·细胞miRNA 能够影响哺乳动物病毒的复制 | 第20-21页 |
·MiRNA 介导的抗病毒活性 | 第21页 |
·病毒对RNA 干扰的回应 | 第21-22页 |
试验研究 | 第22-46页 |
第三章 猪脐静脉血管内皮细胞microRNA 库的建立 | 第22-30页 |
·材料 | 第22-23页 |
·细胞 | 第22页 |
·细胞培养试剂及其配置 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·方法与步骤 | 第23-25页 |
·细胞的准备 | 第23页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第23页 |
·总RNA 的完整性鉴定 | 第23-24页 |
·Illumina Solexa 测序 | 第24-25页 |
·结果 | 第25-28页 |
·提取细胞总RNA 完整性鉴定 | 第25页 |
·测序分析结果 | 第25-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
·小结 | 第29-30页 |
第四章 猪瘟病毒相关的miRNA 的筛选 | 第30-36页 |
·材料 | 第30页 |
·细胞与病毒 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·仪器与设备 | 第30页 |
·方法与步骤 | 第30-32页 |
·病毒材料的准备 | 第30-31页 |
·样品的准备RNA | 第31页 |
·荧光标记miRNA 的制备 | 第31页 |
·杂交反应 | 第31-32页 |
·数据采集与分析 | 第32页 |
·结果 | 第32-34页 |
·RNA 完整性鉴定 | 第32-33页 |
·芯片杂交图谱 | 第33页 |
·miRNA 差异表达分析 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第五章 miRNA 在CSFV 感染中作用的研究 | 第36-46页 |
·材料 | 第36页 |
·质粒与菌株 | 第36页 |
·细胞与病毒 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·仪器与设备 | 第36页 |
·方法与步骤 | 第36-39页 |
·靶向CSFV RNA 基因组microRNA 的预测 | 第36-37页 |
·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA inhibitors 共转染SUVEC | 第37页 |
·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA mimics 共转染SUVEC | 第37页 |
·突变psiCHECK~(TM)-3 质粒分别与miRNA 的inhibitor 和mimics 共转染SUVEC | 第37页 |
·microRNA inhibitors 转染猪瘟病毒感染的SUVEC | 第37-38页 |
·microRNA mimics 转染猪瘟病毒感染的SUVEC | 第38页 |
·猪瘟病毒感染SUVEC 后检测let-7a 和hnRNPA1 mRNA | 第38-39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·SUVEC 中miRNA 对猪瘟病毒作用的预测结果 | 第39-40页 |
·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA inhibitors 共转染SUVEC 荧光活性检测结果 | 第40-41页 |
·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA mimics 共转染SUVEC 荧光活性检测结果 | 第41页 |
·突变质粒分别同miRNA 的inhibitor 和mimics 共转染SUVEC 荧光活性检测结果 | 第41-42页 |
·microRNA mimics 转染猪瘟病毒感染的SUVEC 检测结果 | 第42-43页 |
·microRNA inhibitors 转染猪瘟病毒感染的SUVEC 检测结果 | 第43页 |
·荧光定量PCR 检测猪瘟病毒感染SUVEC 中hnRNP A1 m RNA 和let-7a 表达 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |