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猪血管内皮细胞microRNA库的建立及与猪瘟病毒感染相关microRNA的筛选

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-22页
 第一章 microRNA 研究进展第12-18页
   ·miRNA 基因组学第12-13页
   ·miRNA 的生物起源第13页
   ·miRNA 与siRNA 的区别第13-15页
   ·miRNA 靶标预测的种子序列第15页
   ·Supplement 和 Compensatory 位点第15-18页
 第二章 miRNA 与病毒第18-22页
   ·病毒miRNA 及其靶标第18页
   ·细胞miRNA 及其病毒靶标第18页
   ·病毒miRNA 的多种功能第18-20页
   ·干扰宿主细胞的基因表达第20页
   ·细胞miRNA 在病毒感染中的作用第20-22页
     ·细胞miRNA 能够影响哺乳动物病毒的复制第20-21页
     ·MiRNA 介导的抗病毒活性第21页
     ·病毒对RNA 干扰的回应第21-22页
试验研究第22-46页
 第三章 猪脐静脉血管内皮细胞microRNA 库的建立第22-30页
   ·材料第22-23页
     ·细胞第22页
     ·细胞培养试剂及其配置第22-23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器设备第23页
   ·方法与步骤第23-25页
     ·细胞的准备第23页
     ·细胞总RNA 的提取第23页
     ·总RNA 的完整性鉴定第23-24页
     ·Illumina Solexa 测序第24-25页
   ·结果第25-28页
     ·提取细胞总RNA 完整性鉴定第25页
     ·测序分析结果第25-28页
   ·讨论第28-29页
   ·小结第29-30页
 第四章 猪瘟病毒相关的miRNA 的筛选第30-36页
   ·材料第30页
     ·细胞与病毒第30页
     ·主要试剂第30页
     ·仪器与设备第30页
   ·方法与步骤第30-32页
     ·病毒材料的准备第30-31页
     ·样品的准备RNA第31页
     ·荧光标记miRNA 的制备第31页
     ·杂交反应第31-32页
     ·数据采集与分析第32页
   ·结果第32-34页
     ·RNA 完整性鉴定第32-33页
     ·芯片杂交图谱第33页
     ·miRNA 差异表达分析第33-34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
 第五章 miRNA 在CSFV 感染中作用的研究第36-46页
   ·材料第36页
     ·质粒与菌株第36页
     ·细胞与病毒第36页
     ·主要试剂第36页
     ·仪器与设备第36页
   ·方法与步骤第36-39页
     ·靶向CSFV RNA 基因组microRNA 的预测第36-37页
     ·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA inhibitors 共转染SUVEC第37页
     ·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA mimics 共转染SUVEC第37页
     ·突变psiCHECK~(TM)-3 质粒分别与miRNA 的inhibitor 和mimics 共转染SUVEC第37页
     ·microRNA inhibitors 转染猪瘟病毒感染的SUVEC第37-38页
     ·microRNA mimics 转染猪瘟病毒感染的SUVEC第38页
     ·猪瘟病毒感染SUVEC 后检测let-7a 和hnRNPA1 mRNA第38-39页
   ·结果第39-44页
     ·SUVEC 中miRNA 对猪瘟病毒作用的预测结果第39-40页
     ·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA inhibitors 共转染SUVEC 荧光活性检测结果第40-41页
     ·psiCHECK~(TM)-3′与合成的microRNA mimics 共转染SUVEC 荧光活性检测结果第41页
     ·突变质粒分别同miRNA 的inhibitor 和mimics 共转染SUVEC 荧光活性检测结果第41-42页
     ·microRNA mimics 转染猪瘟病毒感染的SUVEC 检测结果第42-43页
     ·microRNA inhibitors 转染猪瘟病毒感染的SUVEC 检测结果第43页
     ·荧光定量PCR 检测猪瘟病毒感染SUVEC 中hnRNP A1 m RNA 和let-7a 表达第43-44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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